潘萬貴 蔣福亮 胡海燕 林毅輝

【摘要】 目的：研究衣殼抗原IgM抗體（VCA-IgM）、衣殼抗原IgG抗體（VCA-IgG）親和力指數(shù)（AI）及細胞免疫功能在EB病毒（EBV）感染患兒診斷中的應(yīng)用價值。方法：選擇2016年8月-2019年10月本院診治的85例EBV感染患兒作為研究組，分為傳染性單核細胞增多癥（IM）組（47例）和嗜血細胞綜合征（HPS）組（38例），另選取同期健康兒童50例作為對照組。比較三組的VCA-IgM、AI水平以及細胞免疫功能指標(biāo)，并利用ROC曲線分析其診斷價值。結(jié)果：IM組和HPS組的VCA-IgM、CD3+、CD8+均明顯高于對照組，且IM組均明顯高于HPS組（P<0.05）;IM組和HPS組的AI、CD4+以及CD19+均低于對照組，IM組的AI、CD4+均明顯低于HPS組，CD19+高于HPS組（P<0.05）。聯(lián)合診斷的AUC為0.942，明顯高于各指標(biāo)單項檢測的AUC，敏感度為95.5%，特異度為93.8%。結(jié)論：VCA-IgM、AI以及細胞免疫功能指標(biāo)均可為EBV感染的診斷提供判斷依據(jù)，聯(lián)合檢測上述指標(biāo)對于EBV感染具體類型的鑒別診斷有重要的輔助作用。

【關(guān)鍵詞】 衣殼抗原IgM抗體 衣殼抗原IgG抗體 親和力指數(shù) 細胞免疫功能 EB病毒

[Abstract] Objective： To investigate the diagnostic value of VCA-IgM， VCA-IgG affinity index （AI） and cellular immune function in children with EB virus （EBV） infection. Method： A total of 85 children with EBV infection diagnosed and treated in our hospital from August 2016 to October 2019 were selected as the study group， they were divided into infectious mononucleosis （IM） group （47 cases） and haemophilic syndrome （HPS） group （38 cases）， and 50 healthy children of the same period were selected as the control group. The levels of VCA-IGM， AI and cellular immune function of the three groups were compared， and the diagnostic value was analyzed by ROC curve. Result： VCA-IgM， CD3+， CD8+ in IM group and HPS group were significantly higher than those in control group， and those in IM group were significantly higher than those in HPS group （P<0.05）; AI， CD4+ and CD19+ in IM group and HPS group were lower than those in control group， AI and CD4+ in IM group were significantly lower than those in HPS group， and CD19+ in IM group was higher than that in HPS group （P<0.05）. The AUC of combined diagnosis was 0.942， which was significantly higher than that of single detection， the sensitivity and specificity were 95.5% and 93.8%， respectively. Conclusion： VCA-IgM， AI and cellular immune function indicators can provide judgment basis for the diagnosis of EBV infection， and combined detection of the above indicators has an important auxiliary role in the differential diagnosis of specific types of EBV infection.

[Key words] VCA-IgM VCA-IgG Affinity index Cellular immune function EB virus

First-authors address： Quanzhou Womens and Childrens Hospital， Quanzhou 362000， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2020.23.032

Epstein-Barr病毒（EBV）是一種皰疹病毒科嗜淋巴細胞病毒，在絕大部分成人身上均有攜帶，具有較高的感染率[1]。兒童處于生長發(fā)育階段，其自身免疫功能尚未發(fā)育完全，也是EBV感染的多發(fā)人群，有研究顯示，兒童血清EBV抗體檢測陽性率高達80%以上[2]，嚴重威脅患兒生命健康，導(dǎo)致部分患兒出現(xiàn)發(fā)熱、淋巴結(jié)腫大等癥狀，并伴有乏力、惡心、腹脹腹瀉等消化道癥狀，甚至出現(xiàn)神經(jīng)系統(tǒng)癥狀。但是EBV感染大多為急性過程，病程較短，感染的臨床類型較為復(fù)雜，大多數(shù)患兒感染后并未出現(xiàn)上述癥狀，導(dǎo)致在診斷過程中出現(xiàn)漏診、誤診情況，從而延誤治療時機。血清學(xué)檢查是目前臨床診斷EBV感染的主要方法，而衣殼抗原IgM抗體（VCA-IgM）和衣殼抗原IgG抗體（VCA-IgG）是EBV感染早期出現(xiàn)的抗體[3]，另有研究表明，機體細胞免疫功能也與EBV感染的發(fā)生息息相關(guān)[4]，故本研究致力于探討上述指標(biāo)在EBV感染患兒診斷中的應(yīng)用價值，為臨床及早確診提供新的依據(jù)?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2016年8月-2019年10月本院診治的85例EBV感染患兒臨床資料。診斷標(biāo)準(zhǔn)：實驗室檢查中VCA-IgM以及VCA-IgG均為陽性;聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測其DNA為陽性，上述兩項滿足任意一項即可確診。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）均經(jīng)血常規(guī)以及血清免疫學(xué)檢查確診;（2）年齡1～12歲;（3）均為首次感染;（4）患兒臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）皰疹病毒感染者;（2）合并其他嚴重疾病感染者;（3）合并自身免疫類缺陷疾病患兒。根據(jù)患兒病毒感染類型分為傳染性單核細胞增多癥（IM）組（47例）和嗜血細胞綜合征（HPS）組（38例），IM診斷標(biāo)準(zhǔn)：①患兒存在扁桃體或者咽部炎癥反應(yīng);②頸部淋巴結(jié)或者肝脾腫大;③發(fā)熱;④血常規(guī)檢查中計數(shù)淋巴細胞或者異型淋巴細胞總數(shù)超過5×109/L，上述條件任意滿足其中3項即可確診。HPS診斷標(biāo)準(zhǔn)：①患兒存在一周以上發(fā)熱現(xiàn)象;②脾腫大;③血常規(guī)檢查顯示全血細胞減少，并累及血紅蛋白、血小板等;④對骨骼或淋巴細胞進行涂片檢查顯示存在吞噬細胞，但無惡變跡象;⑤NK細胞活性明顯降低;⑥鐵蛋白超過500 μg/L;⑦空腹甘油三酯超過3 mmol/L或纖維蛋白原低于1.5 g/L;⑧可溶性白細胞介素-2受體超過2 400 U/mL，滿足上述任意5項即可確診[5]。另選取同期來本院進行體檢的50例健康兒童作為對照組，排除存在急性、慢性或者家族遺傳性疾病史患兒。本次研究經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 檢測方法

1.2.1 細胞免疫功能指標(biāo) 采用乙二胺四乙酸抗凝管采集所有研究對象靜脈血標(biāo)本，離心分離收集血清，在24 h內(nèi)采用流式細胞儀（美國BD醫(yī)療器械有限公司，型號為BD FACSCalibur）對細胞免疫功能進行檢查，即淋巴細胞亞群百分數(shù)。采用外周淋巴T/B細胞標(biāo)對標(biāo)本進行標(biāo)記篩查，用于檢測CD3+、CD4+、CD8+以及CD19+，操作流程嚴格按照使用說明書進行。

1.2.2 VCA-IgM、親和力指數(shù)（AI） 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測患兒VCA-IgM和VCA-IgG（高親和力）、VCA-IgG，試劑和儀器均由上海翊圣生物科技有限公司提供，檢測方法嚴格按照使用說明書進行。其中VCA-IgM陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)：標(biāo)本與標(biāo)準(zhǔn)吸光度的比值在0.80及以上即可確診;VCA-IgG（高親和力）以及VCA-IgG吸光度比值的百分比即為AI。

1.3 觀察指標(biāo) （1）比較三組患者VCA-IgM、AI及細胞免疫功能指標(biāo)水平。（2）比較三組患者VCA-IgM、AI及細胞免疫功能各項指標(biāo)的檢測陽性率。（3）利用logistic回歸篩選變量，并繪制ROC曲線，對上述指標(biāo)單項以及聯(lián)合的診斷效能進行分析。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 SPSS 20.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)。計量資料用（x±s）表示，多組計量數(shù)據(jù)比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗;各項指標(biāo)的診斷效能采用ROC曲線進行分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料比較 IM組：男29例，女18例;年齡1～11歲，平均（5.54±2.67）歲。HPS組：男23例，女15例;年齡2～12歲，平均（5.83±1.85）歲。對照組：男30例，女20例，年齡1～12歲，平均（6.01±2.21）歲。三組一般資料比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 三組VCA-IgM、AI和細胞免疫功能指標(biāo)水平比較 IM組和HPS組的VCA-IgM、CD3+、CD8+均明顯高于對照組，且IM組均明顯高于HPS組;IM組和HPS組的AI、CD4+以及CD19+均低于對照組，且IM組AI、CD4+均明顯低于HPS組，CD19+高于HPS組（P<0.05）。見表1。

2.3 VCA-IgM、AI及細胞免疫功能指標(biāo)水平診斷效能 VCA-IgM、AI及細胞免疫功能指標(biāo)聯(lián)合診斷的AUC為0.942，明顯高于各指標(biāo)單項檢測的AUC，敏感度為95.5%，特異度為93.8%，見圖1、表2。

3 討論

EBV感染作為兒科常見病毒感染性疾病，具有癥狀復(fù)雜、病情進展迅速、累及器官系統(tǒng)多等特點，現(xiàn)階段臨床上將EBV感染類型主要分為IM、HPS等，但在早期診斷中，多根據(jù)患兒癥狀、實驗室常規(guī)檢查等進行區(qū)分，一方面部分患兒在早期感染時并未出現(xiàn)較為典型的臨床癥狀，另一方面，部分患兒血清抗體在感染后存在產(chǎn)生延遲、持續(xù)時間短等現(xiàn)象，導(dǎo)致實驗室檢查在診斷中容易出現(xiàn)假陽性、假陰性，給臨床確診EBV感染帶來了較大的困難[6]。此外，不同類型的病毒感染其治療方法不同，在早期EBV診斷中及早鑒別病毒感染類型對于患兒的治療以及預(yù)后具有重要價值。

VCA-IgM是EBV感染時最早出現(xiàn)的抗體，一般在急性感染兩周內(nèi)出現(xiàn)，具有較高的敏感度和特異度，故臨床上將其作為EBV診斷的重要依據(jù)之一，但大量臨床實踐證實該指標(biāo)仍存在一定的誤診和漏診，主要原因是機體的免疫過程相對比較復(fù)雜，在感染后VCA-IgM抗體的產(chǎn)生可能出現(xiàn)延遲、持續(xù)陰性、持續(xù)陽性等情況，同時部分患兒體內(nèi)抗體檢測還受母體遺傳的影響，在EBV感染再激活等原發(fā)性感染的多克隆激活時出現(xiàn)，故僅憑單項VCA-IgM抗體陽性診斷還具有一定的缺陷[7]。EBV感染后其次出現(xiàn)的是VCA-IgG抗體（低親和力），隨著疾病的持續(xù)進展，在感染后期，機體將產(chǎn)生高親和力的VCA-IgG抗體。近年來，隨著臨床對EBV感染診斷方法的深入研究，發(fā)現(xiàn)病原體入侵機體后，會導(dǎo)致VCA-IgG抗體親和力發(fā)生較為顯著的動態(tài)變化，即抗體親和力升高，故低親和力的檢出即提示為原發(fā)性感染。黃倩雯等[8]研究對EBV感染患者發(fā)病10 d內(nèi)進行血清檢測，90%以上的患者會出現(xiàn)低親和力VCA-IgG抗體陽性結(jié)果，且約一半的患者在30 d內(nèi)仍顯示為陽性。本研究針對EBV感染患兒以及健康兒童進行血清檢查，結(jié)果顯示IM組以及HPS組的VCA-IgM均明顯高于對照組（P<0.05），AI均明顯低于對照組（P<0.05），與既往文獻[9]研究相一致，進一步證實EBV感染發(fā)生會導(dǎo)致患兒機體VCA-IgM和AI水平異常。此外，本研究還顯示IM組與HPS組的VCA-IgM和AI水平比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），提示上述指標(biāo)可為EBV病毒感染類型鑒別提供依據(jù)。