文/侯仕營(yíng) 董濟(jì)軍 劉朋 劉振華 李錫勇 王磊

本文將養(yǎng)殖生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)的中肋骨條藻分離、保存，并進(jìn)行室內(nèi)水泥池規(guī)?；囵B(yǎng)，指數(shù)生長(zhǎng)狀態(tài)可維持72h，實(shí)現(xiàn)了短期內(nèi)大量繁殖。中國(guó)明對(duì)蝦幼體投喂實(shí)驗(yàn)表明，利用4萬(wàn)個(gè)cell/mL中肋骨條藻投喂組與未投喂組比較，Z3～M1變態(tài)發(fā)育所需時(shí)間縮短24h，Z1～Z3期變態(tài)發(fā)育成活率分別為93.3%、68%，差異顯著。利用中肋骨條藻所育中國(guó)明對(duì)蝦苗活力強(qiáng)，變態(tài)期成活率高，育苗周期短，具有良好的經(jīng)濟(jì)效益。

中肋骨條藻隸屬硅藻門(mén)、中心硅藻綱、圓篩藻目、骨條藻科、骨條藻屬，屬于溫帶、熱帶海洋硅藻類，從北極到赤道、從外海高鹽度到沿海低鹽度水團(tuán)均有分布。中肋骨條藻富含海產(chǎn)動(dòng)物幼體生長(zhǎng)發(fā)育所需的高度不飽和脂肪酸、必需氨基酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，是中國(guó)明對(duì)蝦、日本囊對(duì)蝦、梭子蟹等蝦蟹類育苗初期的優(yōu)質(zhì)生物餌料，因其繁殖速度快，易于收獲，被廣泛應(yīng)用。自然環(huán)境中篩選的中肋骨條藻，具備較強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)能力，經(jīng)過(guò)實(shí)驗(yàn)室純化后，在餌料車(chē)間規(guī)?；囵B(yǎng)操作簡(jiǎn)單，生長(zhǎng)繁殖速度快，不易污染，可在短時(shí)間內(nèi)培養(yǎng)大量藻株，能夠滿足水產(chǎn)動(dòng)物規(guī)模化育苗生產(chǎn)需要。

中國(guó)明對(duì)蝦工廠化育苗，密度高、產(chǎn)量高、效益好，可有效防控疾病，提高育苗成活率，降低養(yǎng)殖成本。同時(shí)，工廠化育苗對(duì)餌料、水質(zhì)要求較高，提供適口、足量、營(yíng)養(yǎng)豐富的餌料已成為中國(guó)明對(duì)蝦工廠化育苗成功的關(guān)鍵因素。

一、藻種來(lái)源

2018年4月，乳山市瑞力水產(chǎn)品養(yǎng)殖場(chǎng)室外南美白對(duì)蝦養(yǎng)殖池，水溫14℃，鹽度22，pH值8.3，目測(cè)池塘水色為淺褐色，鏡檢發(fā)現(xiàn)中肋骨條藻密度較高。取樣后，在山東省海洋經(jīng)濟(jì)藻類資源開(kāi)發(fā)與利用工程技術(shù)協(xié)同創(chuàng)新中心采用微吸管分離法多次分離培養(yǎng)，得到中肋骨條藻藻株，置于F/2＋Si培養(yǎng)液中，溫度為20℃，鹽度25，光照強(qiáng)度3000lx～6000lx，日光暗比12L:12D，進(jìn)行不充氣擴(kuò)大培養(yǎng)，擴(kuò)大培養(yǎng)的藻種保存于藻種庫(kù)。

二、培養(yǎng)池及設(shè)施設(shè)備

（一）二級(jí)培養(yǎng)池

培養(yǎng)車(chē)間頂部為透明波紋玻璃鋼瓦，培養(yǎng)池為玻璃鋼育苗池，編號(hào)為1號(hào)～4號(hào)，池規(guī)格為2m×2m×0.8m。

（二）三級(jí)培養(yǎng)池

培養(yǎng)車(chē)間長(zhǎng)度為30m，頂部為透明塑料大棚，設(shè)有遮陽(yáng)網(wǎng)，可根據(jù)需要調(diào)節(jié)光照強(qiáng)度。培養(yǎng)池為東西走向水泥池，池號(hào)為5號(hào)～17號(hào)，池規(guī)格為2m×8m×0.8m。

（三）其他設(shè)備

渦旋增氧機(jī)、沉淀池、砂濾罐、消毒配水池、海水鍋爐、水泵、pH計(jì)、分光光度計(jì)、顯微鏡等。

三、中肋骨條藻的培養(yǎng)

（一）培養(yǎng)用水處理

自然海區(qū)海水沉淀，二次砂濾，用300目篩絹網(wǎng)過(guò)濾，注入消毒配水池備用。

（二）培養(yǎng)池準(zhǔn)備

培養(yǎng)池內(nèi)加入5cm海水，用漂白粉（有效氯含量為30%）80mg/L～100mg/L清洗，并保存消毒10h以上。注入90cm經(jīng)沉淀過(guò)濾的海水，漂白液（有效氯30%）15mg/L消毒，用淀粉碘化鉀檢查余氯，并加入Na2S2O3消除余氯，加入用消毒海水配制的F/2＋Si培養(yǎng)液。

（三）接種

在光線達(dá)到5000lx以上時(shí)，上午8:00～10:00，用消毒的抽水泵將指數(shù)生長(zhǎng)期的中肋骨條藻藻液接種到相應(yīng)的培養(yǎng)池，培養(yǎng)池水位控制在1m左右，二級(jí)、三級(jí)培養(yǎng)接種比例為1:20～1:30。

（四）日常管理

1.充氣

利用渦旋增氧機(jī)持續(xù)充氣，增氧機(jī)功率為2.2kW·h，充氣至微沸騰，延長(zhǎng)中肋骨條藻指數(shù)生長(zhǎng)期，避免藻體下沉進(jìn)入衰竭期，防止藻液表面產(chǎn)生菌膜。

2.控光

光照度在1000lx～15000lx時(shí)中肋骨條藻均可正常繁殖生長(zhǎng)，為配合養(yǎng)殖生產(chǎn)順利開(kāi)展，在光照度高時(shí)要利用遮陽(yáng)網(wǎng)調(diào)節(jié)，從而控制中肋骨條藻繁殖生長(zhǎng)速度。

3.控溫

采用保溫、加熱、通風(fēng)、熱交換器等措施，調(diào)節(jié)中肋骨條藻培養(yǎng)溫度，使溫度保持在20℃～24℃。

4.調(diào)pH

培養(yǎng)池pH控制在7.5～8.5，鏡檢發(fā)現(xiàn)中肋骨條藻細(xì)胞數(shù)達(dá)到200萬(wàn)個(gè)cell/mL以上時(shí)，加大充氣量降低pH，當(dāng)pH值高達(dá)9.0以上時(shí)，可通過(guò)添加30mg/L的醋酸調(diào)節(jié)，延長(zhǎng)指數(shù)生長(zhǎng)期。

5.追加營(yíng)養(yǎng)鹽

追加營(yíng)養(yǎng)鹽的主要品種有（NH4）2SO4、K2H2PO4、Na2SiO4、檸檬酸鐵等，比例為N:P:Fe:Si＝10:1:0.1:1，生產(chǎn)過(guò)程中根據(jù)培養(yǎng)池內(nèi)藻體濃度和水體無(wú)機(jī)鹽剩余量情況添加。

6.中肋骨條藻生長(zhǎng)結(jié)果

規(guī)?；囵B(yǎng)中肋骨條藻生長(zhǎng)狀況如圖1所示，指數(shù)生長(zhǎng)期可以維持72h，生長(zhǎng)速度快，能夠滿足中國(guó)明對(duì)蝦規(guī)?；缟a(chǎn)需要。

（五）收獲

中肋骨條藻繁殖速度快，數(shù)小時(shí)內(nèi)可出現(xiàn)明顯的水色變化，藻體老化，鏡檢可見(jiàn)細(xì)胞中空等現(xiàn)象，應(yīng)在藻體生長(zhǎng)旺盛期培養(yǎng)水呈現(xiàn)濃褐色開(kāi)始收獲投喂使用。生長(zhǎng)狀況良好的中肋骨條藻每隔24h收獲1/2，補(bǔ)充過(guò)濾海水至淺褐色，加入營(yíng)養(yǎng)鹽進(jìn)行連續(xù)培養(yǎng)。

四、中肋骨條藻在中國(guó)明對(duì)蝦育苗中的應(yīng)用

（一）無(wú)節(jié)幼體期接種

中國(guó)明對(duì)蝦無(wú)節(jié)幼體發(fā)育到II期時(shí)接入中肋骨條藻，濃度為3萬(wàn)～4萬(wàn)個(gè)cell/mL，接種時(shí)間一般在上午8:00～10:00。

表1 Z1～Z3期變態(tài)發(fā)育的成活率

（二）溞狀幼體期投喂

中肋骨條藻作為中國(guó)明對(duì)蝦育苗餌料，可單獨(dú)投喂，也可與其他藻類、蛋黃、豆?jié){、配合飼料等搭配投喂。中國(guó)明對(duì)蝦溞狀幼體期每天投喂中肋骨條藻量為4萬(wàn)個(gè)cell/mL，Z1期僅投喂中肋骨條藻，Z2期輔助投喂蝦片0.4g/萬(wàn)尾，Z3期每尾蝦輔助投喂1個(gè)～2個(gè)鹵蟲(chóng)無(wú)節(jié)幼體或10個(gè)～20個(gè)輪蟲(chóng)，分8次投喂。

在育苗池邊用12個(gè)50L的塑料桶同步開(kāi)展育苗試驗(yàn)，育苗桶內(nèi)充氣、光照、溫度、水質(zhì)等條件與育苗池保持一致，每個(gè)桶加育苗用水45L，每桶投入健康的中國(guó)對(duì)蝦Z1期幼體5000尾。1號(hào)～3號(hào)桶為一組平行試驗(yàn)，投喂餌料與育苗池保持一致；4號(hào)～6號(hào)桶為一組平行試驗(yàn)，投喂中肋骨條藻2萬(wàn)個(gè)cell/mL，其余條件與育苗池保持一致；7號(hào)～9號(hào)桶為一組平行試驗(yàn)，投喂中肋骨條藻1萬(wàn)個(gè)cell/mL，其余條件與育苗池保持一致；10號(hào)～12號(hào)桶為一組平行試驗(yàn)，Z1期、Z2期投喂蝦片0.5g/萬(wàn)尾，Z3期每尾蝦投喂15個(gè)～20個(gè)輪蟲(chóng)。

（三）幼體生長(zhǎng)狀況

1.幼體變態(tài)發(fā)育所需時(shí)間

Z1～Z3變態(tài)發(fā)育所需時(shí)間，接入中肋骨條藻的1號(hào)～9號(hào)桶和未接入的10號(hào)～12號(hào)桶，Z1～Z3期變態(tài)發(fā)育所需時(shí)間均為4天，無(wú)顯著差異。Z3～M1變態(tài)發(fā)育所需時(shí)間，1號(hào)～6號(hào)桶平均2天，7號(hào)～9號(hào)桶平均2.5天，10號(hào)～12號(hào)桶平均3天，差異顯著。

2.幼體成活率

Z1～Z3期變態(tài)發(fā)育的成活率如表1所示。1號(hào)～3號(hào)桶平均成活率為93.3%，4號(hào)～6號(hào)桶平均成活率為90.9%，7號(hào)～9號(hào)桶平均成活率為79.9%，未投喂中肋骨條藻的10號(hào)～12號(hào)桶平均成活率68%。投喂中肋骨條藻量為4萬(wàn)個(gè)cell/mL的1號(hào)～3號(hào)桶與未投喂中肋骨條藻的10號(hào)～12號(hào)桶，平均成活率差異顯著。

五、討論

（一）中肋骨條藻培養(yǎng)

中肋骨條藻規(guī)模化的培養(yǎng)受到培養(yǎng)液配方、藻種純化程度、接種密度、培養(yǎng)池水?dāng)噭?dòng)、光照、溫度、pH、營(yíng)養(yǎng)鹽等多種因素的影響，要確保規(guī)?；嘤某晒π枰⒁庖韵聨c(diǎn)：藻種純化度要接近100%，才能確保之后培養(yǎng)的純度，提高成功率；接種密度不能過(guò)低，確保中肋骨條藻種類的優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)；光照強(qiáng)度在理化因子中尤為重要，光照強(qiáng)度過(guò)低會(huì)影響中肋骨條藻的生長(zhǎng)，光照強(qiáng)度過(guò)高會(huì)使藻體短時(shí)間內(nèi)繁殖過(guò)剩，導(dǎo)致快速老化，需要配套遮陽(yáng)網(wǎng)等遮光設(shè)備調(diào)節(jié)光照度；每天定時(shí)鏡檢藻體生長(zhǎng)狀況，根據(jù)生長(zhǎng)狀況調(diào)整管理措施；加強(qiáng)消毒工作，避免交叉生物污染。

（二）中肋骨條藻在中國(guó)明對(duì)蝦育苗中的應(yīng)用

中國(guó)明對(duì)蝦無(wú)節(jié)幼體II期接入中肋骨條藻，能夠降低水體透明度、調(diào)節(jié)水質(zhì)，避免幼體出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng)。中肋骨條藻富含對(duì)蝦幼體發(fā)育所需的高不飽和脂肪酸，使對(duì)蝦苗種從Z3～M1變態(tài)發(fā)育所需的時(shí)間顯著縮短，說(shuō)明中肋骨條藻是中國(guó)明對(duì)蝦的優(yōu)質(zhì)餌料，能夠縮短幼體發(fā)育時(shí)間。

1號(hào)～3號(hào)桶與10號(hào)～12號(hào)桶相對(duì)比，對(duì)蝦苗種Z1～Z3期變態(tài)發(fā)育期的平均成活率差異顯著，中肋骨條藻能夠明顯提高中國(guó)明對(duì)蝦溞狀幼體成活率。究其原因，中肋骨條藻是參與構(gòu)建生物絮團(tuán)的重要組分，在育苗過(guò)程中合理應(yīng)用，不但為中國(guó)明對(duì)蝦提供了優(yōu)質(zhì)營(yíng)養(yǎng)元素，也起到凈化水質(zhì)、抑制有害菌繁殖等重要作用，能夠有效減少疾病發(fā)生，提高養(yǎng)殖生物成活率。