□ 馬玲飛 MA Ling-fei 王海紅 WANG Hai-hong 侯偉 HOU Wei

Objective To explore the application value of air particle counting method in the monitoring of air microbial concentration in laminar flow clean operating room. Methods Six clean laminar flow operating rooms in a tertiary hospital of Zhejiang Province from March 2018 to March 2019 were selected as monitoring objects. Four of them were Class I laminar flow clean operating rooms and two were Class III. The air particles were the detection targets, and the air particle counting method was used to evaluate the air microbial concentration in the laminar flow clean operating room. The correlation between the diameter of air particles and the concentration of microbes was analyzed using Pearson correlation analysis. Results The results of 23 tests of the air microbes in the laminar flow clean operating rooms showed that the qualified rate of air quality was 88.24% (15/17). The numbers of air particles were 0～3544/L and 0～2083/L for the diameter of≥0.3μm and 0.5μm, respectively. the numbers of air particles with diameter of ≥0.3μm,≥0.5μm, ≥2.0μm, ≥5.0μm were positively correlated to the number of microbes (r=0.719, 0.738, 0.727, 0.736, p＜0.001). Conclusion The air particle counting method has a high application value in the monitoring of air microbial concentration in the laminar flow clean operation room. The monitoring results are basically consistent with the results of the sedimentation method. The number of microbes in the air can be estimated from the number of air particles, which is beneficial for dynamically monitoring the air microbial concentration in the operating room.

手術(shù)間是院內(nèi)感染高發(fā)場所，積極控制或減少手術(shù)間相關(guān)院 內(nèi)感染發(fā)生，對確保手術(shù)效果和改善患者預(yù)后具有重要意義。研究指出，手術(shù)間空氣中微生物污染是導(dǎo)致手術(shù)間相關(guān)醫(yī)院感染的主要原因[1]。空氣中微生物含量較多，術(shù)中菌落定植在手術(shù)創(chuàng)面，可引起院內(nèi)感染。實(shí)際工作中，難以做到空氣的絕對無菌，僅能減少空氣中微生物含量，進(jìn)而減少醫(yī)院感染的發(fā)生[2]。目前，層流凈化方式被逐漸應(yīng)用于醫(yī)療機(jī)構(gòu)的手術(shù)間和部分特殊病房的空氣凈化，采用特殊空氣過濾裝置過濾空氣中的塵埃，減少空氣中的微生物含量。常規(guī)情況下，百級層流潔凈手術(shù)間可滿足普通手術(shù)相關(guān)無菌要求[3]。但實(shí)際工作中，因醫(yī)護(hù)人員流動，會直接影響手術(shù)間空氣的潔凈度，增加空氣中微生物含量。因此，密切監(jiān)測手術(shù)間空氣中微生物含量對控制醫(yī)院感染十分重要[4]?；诖?，本研究對空氣微粒計數(shù)法在層流潔凈手術(shù)間空氣微生物監(jiān)測中的應(yīng)用效果進(jìn)行分析，為臨床快速評估層流潔凈手術(shù)間空氣質(zhì)量提供理論依據(jù)。

資料與方法

1.一般資料。選擇2018年3月至2019年3月浙江省某三甲醫(yī)院6間層流潔凈手術(shù)間作為監(jiān)測對象，其中4間為Ⅰ級層流潔凈手術(shù)間，2間為Ⅲ級層流潔凈手術(shù)間。采用自然沉降法，用普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板(直徑9cm)進(jìn)行采樣，通過空氣激光微粒計數(shù)檢測儀檢測其空氣中微生物濃度，并對結(jié)果進(jìn)行分析。共采樣17次，層流潔凈手術(shù)間平均溫度為23.20℃，平均濕度為52.50%。

2.方法

2.1 檢測前準(zhǔn)備。徹底清潔手術(shù)間，在采樣前30分鐘，將層流凈化系統(tǒng)開啟，維持手術(shù)間內(nèi)溫度在20℃～25℃，控制相對濕度在40%～60%。于靜態(tài)且無人狀態(tài)下，由專業(yè)檢測人員采樣，要求穿無菌手術(shù)衣，戴口罩和帽子。

2.2 采樣點(diǎn)。依據(jù)GB50333-2013《醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范》相關(guān)要求準(zhǔn)確設(shè)定采樣點(diǎn)。

2.3 微生物濃度檢測。(1)自然沉降法：利用普通營養(yǎng)瓊脂平板(直徑9cm)于采樣點(diǎn)暴露0.5小時后，立即將培養(yǎng)皿送至實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)箱溫度為36℃±1℃，對培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行觀察，對平板上菌落數(shù)進(jìn)行計數(shù)。(2)空氣激光微粒計數(shù)檢測：通過空氣激光微粒計數(shù)檢測儀，在上述相同采樣點(diǎn)將激光微粒檢測儀啟動，分別對空氣中微粒直徑≥0.3μm、≥0.5μm、≥2μm、≥5μm相關(guān)微粒數(shù)(個/L)進(jìn)行讀取。

2.4 層流潔凈手術(shù)間空氣質(zhì)量檢測合格標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ級層流潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)域空氣中微生物濃度＜0.009cfu/(30min·Φ90皿)；周邊區(qū)域空氣中微生物濃度＜0.239cfu/(30min·Φ90皿)。Ⅲ級層流潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)域空氣中微生物濃度＜0.031cfu/(30min·Φ90皿)；周邊區(qū)域空氣中微生物濃度＜0.848cfu/(30min·Φ90皿)?？諝鈾z測合格率=空氣檢測合格次數(shù)/空氣檢測總次數(shù)×100%。

2.5 層流潔凈手術(shù)間空氣中微粒數(shù)監(jiān)測合格標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ級層流潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)域空氣中微粒數(shù)＜20個/L (直徑≥0.3μm)；周邊區(qū)域空氣中微粒數(shù)＜200個/L (直徑≥0.3μm)。Ⅲ級層流潔凈手術(shù)間手術(shù)區(qū)域空氣中微粒數(shù)＜70個/L (直徑≥0.3μm)；周邊區(qū)域空氣中微粒數(shù)＜400個/L (直徑≥0.3μm)。

3.統(tǒng)計學(xué)方法。采用SPSS20.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料用率和百分比表示，采用χ2檢驗(yàn)，計量資料用()表示，采用t檢驗(yàn)，采用Pearson相關(guān)性分析法，分析手術(shù)間空氣中微粒直徑與微生物濃度的相關(guān)性，以p＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié)果

1.層流潔凈手術(shù)間空氣中微生物濃度及空氣質(zhì)量合格率。6間手術(shù)間共檢測17次，其中2次空氣中微生物濃度檢測結(jié)果顯示不合格，而不合格手術(shù)間的手術(shù)區(qū)域、周邊區(qū)域空氣中平均微生物濃度分別是2.19cfu/(30分鐘·Φ90皿)、2.76cfu/(30分鐘·Φ90皿)。層流潔凈手術(shù)間空氣中微生物濃度的17間次監(jiān)測結(jié)果，手術(shù)間空氣質(zhì)量檢測合格率為88.24% (15/17)，檢測結(jié)果見表1。

表1 手術(shù)間空氣中微生物濃度檢測情況

2.微粒數(shù)檢測結(jié)果。層流潔凈手術(shù)間空氣中微粒直徑≥0.3μm、≥0.5μm的微粒數(shù)分別是0～3544個/L、0～2083個/L，見表2。

表2 手術(shù)間空氣中微粒數(shù)檢測情況

3.微生物濃度與微粒直徑相關(guān)性。Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，直徑≥0.3μm、≥0.5μm、≥2.0μm、≥5.0μm 的微粒與微生物濃度均呈正相關(guān)(r=0.719、0.738、0.727、0.914，p＜0.001)，見表 3。

表3 手術(shù)間空氣中微粒直徑與微生物濃度的相關(guān)性

討論

手術(shù)間空氣中微生物是引發(fā)手術(shù)間相關(guān)感染的主要原因，且空氣中微生物濃度與院內(nèi)感染風(fēng)險呈正相關(guān)。故空氣中微生物濃度監(jiān)測、切口感染防治，確保潔凈手術(shù)間空氣質(zhì)量是保證醫(yī)療質(zhì)量，預(yù)防院內(nèi)感染的關(guān)鍵措施之一[5]。層流潔凈手術(shù)間通過層流凈化系統(tǒng)能將室外新風(fēng)適當(dāng)引入高效過濾裝置并呈流線型等速流過手術(shù)間后再流出[6]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，層流凈化系統(tǒng)能經(jīng)過濾器過濾室外空氣中微生物、顆粒，避免室內(nèi)產(chǎn)生的微生物、塵粒擴(kuò)散至四周，使室內(nèi)微生物、塵粒隨氣流排出手術(shù)間，確保層流潔凈手術(shù)間的空氣質(zhì)量[7-8]。但因手術(shù)間中操作人員和參觀人員較多、頻繁流動，導(dǎo)致手術(shù)間空氣中微生物濃度增加，影響手術(shù)間空氣凈化。而監(jiān)測空氣中微生物濃度，并依據(jù)監(jiān)測結(jié)果加強(qiáng)相應(yīng)管理，能明顯提高手術(shù)間空氣質(zhì)量[9-10]。

研究表明，依據(jù)GB50333-2013《醫(yī)院潔凈手術(shù)部建筑技術(shù)規(guī)范》相關(guān)要求，所有醫(yī)療機(jī)構(gòu)均需將潔凈手術(shù)間空氣質(zhì)量視作常規(guī)監(jiān)測項(xiàng)目，準(zhǔn)確設(shè)定采樣點(diǎn)[11]。依據(jù)GB15982-2012《醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》提出的微生物指標(biāo)要求實(shí)施監(jiān)測，但因微生物濃度監(jiān)測耗時長，手術(shù)間空氣中微生物監(jiān)測結(jié)果通常需要24小時以上獲得，故認(rèn)為根據(jù)微生物采樣結(jié)果監(jiān)測手術(shù)間空氣中微生物濃度，醫(yī)師不能及時而準(zhǔn)確地判斷當(dāng)天手術(shù)患者院內(nèi)感染相關(guān)性。相關(guān)研究提出，相較于微生物采樣方法，利用粒子測量系統(tǒng)監(jiān)測潔凈手術(shù)間空氣中微生物濃度、顆粒計數(shù)能幫助臨床醫(yī)師預(yù)測手術(shù)間空氣中微生物污染狀況[12]。本研究結(jié)果顯示，6間手術(shù)間共檢測17間次，其中2間次空氣中微生物濃度檢測結(jié)果不合格，手術(shù)間空氣質(zhì)量檢測合格率為88.24% (15/17)。說明空氣微粒計數(shù)法在層流潔凈手術(shù)間空氣微生物濃度監(jiān)測中具有較高的應(yīng)用價值。而分析層流潔凈手術(shù)間空氣中微粒直徑≥0.3μm、≥0.5μm、≥2.0μm、≥5.0μm 微粒數(shù)相應(yīng)微生物濃度變化情況發(fā)現(xiàn)，微粒數(shù)與微生物濃度存在顯著相關(guān)性，其中直徑≥0.5μm微粒相關(guān)性最強(qiáng)。提示通過空氣微粒計數(shù)法分析層流潔凈手術(shù)間空氣中微粒數(shù)、微粒直徑，能反映空氣中微生物濃度，即隨著空氣中微粒直徑增加、微粒數(shù)升高，提示空氣中微生物濃度增高。

綜上所述，空氣微粒計數(shù)法用于層流潔凈手術(shù)間空氣微生物濃度監(jiān)測中的應(yīng)用價值高，其監(jiān)測結(jié)果和采用沉降法基本一致，能通過監(jiān)測層流潔凈手術(shù)間空氣中微粒數(shù)，對空氣中微生物數(shù)進(jìn)行推測，利于動態(tài)監(jiān)測手術(shù)間空氣中微生物濃度，故有較高的可行性。