董佳易
(西北農(nóng)林科技大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院陜西咸陽 712100)
貓冠狀病毒(feline coronavirus,F(xiàn)coV)是環(huán)境中廣泛存在的病原體,一般通過糞口途徑傳播。FCoV 進(jìn)入機(jī)體后,大多數(shù)情況下只在腸道內(nèi)感染,引起貓腸道冠狀病毒病。少數(shù)情況下,在貓自身以及環(huán)境因素的影響下FCoV 可能發(fā)生基因突變。FCoV 在不斷的隨機(jī)突變過程中致病性增強(qiáng),轉(zhuǎn)化為貓傳染性腹膜炎病毒(feline infectious peritonitis virus,F(xiàn)IPV)[1]。FIPV 能夠侵襲進(jìn)入單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞并造成全身性感染,引起免疫介導(dǎo)性血管炎等嚴(yán)重的炎性反應(yīng),導(dǎo)致全身多系統(tǒng)病理損傷[2]。基于以上特點,在臨床上需要結(jié)合病史、臨床癥狀及特征性檢查指標(biāo)綜合得出診斷結(jié)論。
根據(jù)后期臨床癥狀不同,貓傳染性腹膜炎(feline infectious peritonitis,F(xiàn)IP)主要分為滲出性即濕性FIP,以及非滲出性即干性FIP,亦有少數(shù)患貓同時表現(xiàn)出兩類癥狀。FIP 患貓出現(xiàn)的一般臨床癥狀包括嗜睡、厭食、體重下降或幼齡貓生長受阻、波動熱、淋巴結(jié)腫大,有時發(fā)生黃疸。雖然在臨床上將某些癥狀稱為干性癥狀或濕性癥狀,但在實際病例中干性FIP 與濕性FIP 的癥狀有很大重疊,許多癥狀在干性、濕性FIP 中均會出現(xiàn),在病程后期兩種病型可互相發(fā)展。
濕性FIP 病例的典型癥狀是胸腔、腹腔、心包、陰囊等處積液,為血管炎性病變導(dǎo)致。發(fā)生胸腔積液時,患貓往往會有一定程度的呼吸困難;發(fā)生腹腔積液時,可觀察到明顯的腹圍變化。干性FIP 病例往往不伴有腹水,病毒的大量復(fù)制導(dǎo)致機(jī)體免疫系統(tǒng)在各部位產(chǎn)生過激反應(yīng),并形成肉芽腫,這些病變主要侵襲眼、中樞神經(jīng)、腎和肝等實質(zhì)器官,此外還有一種在皮膚形成無痛的結(jié)節(jié)的特殊形式[3]。干性FIP 通常也會出現(xiàn)神經(jīng)癥狀及葡萄膜炎,有時伴有脊髓病變[4]。
2.1.1 病史在診斷過程中,首先要了解患貓病史,綜合考慮患貓的年齡、生活環(huán)境,收集并分析臨床癥狀。FIP 可在貓的任何年齡發(fā)病,但是大多數(shù)是在兩歲以下,其中以純種貓和公貓多發(fā)[5]。此外,F(xiàn)IP 多發(fā)于高密度飼養(yǎng)環(huán)境,如收容所、寵物店、多貓家庭等。由于貓具有強(qiáng)大的忍受和掩飾疾病的能力,F(xiàn)IP 的癥狀通常在疾病發(fā)展到非常嚴(yán)重的時期才會顯現(xiàn)出來,因此應(yīng)對主人觀察到的表現(xiàn)進(jìn)行分析。對于無明顯特征性臨床癥狀的患貓,持續(xù)高燒且抗生素治療無效的情況下也應(yīng)考慮FIP。
2.1.2 體況檢查體況檢查主要包括評估營養(yǎng)狀況、精神狀態(tài)、體溫、脈搏檢查等。營養(yǎng)狀況的評估包括體重、體長、生長速度、皮下脂肪和肌肉質(zhì)量。若患貓存在體腔積液的現(xiàn)象,也可以通過體況檢查對積液位置和程度做出初步判斷?;緳z查需注意同時結(jié)合患貓精神狀態(tài),觀察患貓是否出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。大多數(shù)患有干性FIP的幼貓具有眼球癥狀或神經(jīng)癥狀[6]。臨床上表現(xiàn)為歪頭、共濟(jì)失調(diào)、行為改變、感覺過敏、眼球震顫等,眼部出現(xiàn)虹膜變色、角膜水腫以及瞳孔大小不等、反應(yīng)異常,甚至導(dǎo)致失明等癥狀[4]。其中,主要臨床病征為葡萄膜炎,必要情況下可通過血清抗體檢測以及房水細(xì)胞學(xué)檢查與特發(fā)性葡萄膜炎進(jìn)行鑒別診斷。
2.2.1 實驗室檢查血常規(guī)和血清生化指標(biāo)可作為進(jìn)一步診斷的依據(jù)。在血常規(guī)檢查中,F(xiàn)IP 患貓的檢查結(jié)果通常表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞減少癥,以及輕度到中度的非再生性貧血、中性粒細(xì)胞性增多癥。由于在FIP 病程中不同患貓受病理損傷的器官不同,在血清生化檢查中指標(biāo)差異性比較大,異常指標(biāo)也有所不同。常見的異常指標(biāo)有高膽紅素血癥、高球蛋白血癥、低蛋白血癥,并且白蛋白與球蛋白比值低于0.8。此外,受影響的器官也會出現(xiàn)相應(yīng)的異常指標(biāo),如肝臟損傷時血清肝酶活性和膽汁酸濃度升高,腎臟損傷時肌酐和尿素氮濃度升高,胰腺損傷時胰脂肪酶免疫反應(yīng)性升高等。
2.2.2 影像學(xué)檢查經(jīng)過初步實驗室檢查后,可利用影像學(xué)檢查進(jìn)一步確定受損傷的器官[7]。放射學(xué)檢查可用于觀察如肝臟等腹部組織器官的病理變化,例如FIP 特征性的淋巴結(jié)和腎臟包塊。對于懷疑受損的組織器官如肝臟、腎臟、脾臟、胰腺、腸道、網(wǎng)膜和淋巴結(jié)等也可使用超聲波掃描檢查,以便進(jìn)一步做抽吸及活組織檢查。在體腔積液存在但量較少的情況下,可通過影像學(xué)檢查查找積液的位置,并在超聲引導(dǎo)下實施穿刺術(shù)獲得樣本進(jìn)行檢驗。
2.2.3 滲出液分析對于懷疑FIP 的病例,滲出液分析有極大的診斷意義。典型的FIP 積液是黃色的,呈清澈云霧狀并伴有黏稠物質(zhì),在血清管中常凝結(jié)成塊。積液通常會出現(xiàn)在腹部,有時也會出現(xiàn)在胸部或心包腔。積液的總蛋白水平通常會高于3.5g/L,其中球蛋白含量大于50%。FIP 積液的細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果通常為化膿肉芽腫性表現(xiàn),主要為巨噬細(xì)胞、非退行性中性粒細(xì)胞以及很少量的淋巴細(xì)胞[8]。類似的檢查結(jié)果還可能在淋巴細(xì)胞性膽管炎以及肝臟腫瘤的病例中,因此需結(jié)合影像學(xué)檢查綜合分析判斷。
臨床上也常常會使用李凡他試驗來快速鑒別積液的蛋白質(zhì)濃度情況以確定積液性質(zhì)。除了細(xì)胞學(xué)和蛋白質(zhì)濃度評估外,還可對積液進(jìn)行FCoV 抗原免疫染色檢查以及針對FCoV 的RT-PCR 檢測,以直接確認(rèn)有無病毒存在。
2.2.4 RT-PCR 檢測通過基因檢測的辦法確診FIPV 很難實現(xiàn)。即使進(jìn)行突變位點的檢測,除了常見的7b、3c 等基因片段的突變,同地區(qū)來源的病毒突變位點也存在差異,進(jìn)一步將基因檢測復(fù)雜化[9]。相對于傳統(tǒng)的PCR 檢測方法,RT-PCR 速度更快并可進(jìn)行病毒定量,在臨床上應(yīng)用更廣。通常來說,滲出液和組織樣本較血液來說更可能呈陽性,血漿較血清更敏感。尿液和腦脊液檢測率最低,因此不應(yīng)用作常規(guī)PCR 檢測。樣本RNA 降解或?qū)嶒灢僮鞯葐栴}可造成RT-PCR 檢測結(jié)果假陰性,因此需要細(xì)心處理樣品以避免無效的檢測結(jié)果,應(yīng)冷凍樣本并盡早進(jìn)行檢測。
2.2.5 免疫學(xué)檢查應(yīng)充分利用疑似FIP 滲出液和組織樣本進(jìn)行免疫組化檢測。FIP 患貓的滲出液中含有被巨噬細(xì)胞吞噬的FIPV病毒粒子,可將滲出液離心,取沉淀物進(jìn)行免疫組化檢測。若樣本在免疫染色中呈FCoV 陽性,基本可以確診為FIP[10]。但在實際檢查中,可能出現(xiàn)FCoV 假陰性現(xiàn)象。因此臨床上需盡可能采集足夠多的不同的樣本,覆蓋所有可疑的器官組織以做出準(zhǔn)確判斷。
除了上述診斷方法外,腦脊液和眼前房內(nèi)房水分析對于干性FIP 具有很高的診斷價值,檢查結(jié)果一般呈現(xiàn)蛋白濃度和嗜中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞數(shù)量均升高[4]。腦脊液和前房液也可用于評估和比較FCoV 抗體滴度,通常腦脊液或房水內(nèi)抗體與血清中抗體比值較腦脊液或房水總蛋白濃度與血清總蛋白濃度比值更高。
此外,組織病理學(xué)檢查也可作為確診FIP 的重要手段。對可疑組織樣本進(jìn)行活組織檢查以查找FIP 特異性損傷,如血管炎和膿性肉芽腫性炎癥,再結(jié)合PCR、免疫熒光抗體和免疫組化技術(shù)可查出組織樣本中的FCoV[6]。
由于FIP 的前驅(qū)期癥狀不明顯,主人難以發(fā)現(xiàn)患貓的異常狀況,常導(dǎo)致診斷和治療的時機(jī)延誤,因此需要做到準(zhǔn)確快速的診治。近年來,對FIP 的診斷技術(shù)水平有了很大發(fā)展,但目前仍無簡便精準(zhǔn)的診斷方法,在臨床上需要綜合各項檢查結(jié)果進(jìn)行判斷,及時對癥治療。█