陳仕興

（祿豐縣彩云鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)農(nóng)村服務(wù)中心，云南祿豐651213）

狂犬病俗稱“瘋狗病”，是由狂犬病毒引起的一種人畜共患傳染病。主要侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)致死性的感染，導(dǎo)致急性、漸進(jìn)性、不可逆致死性腦脊髓炎，以神經(jīng)興奮和意識(shí)障礙以及繼之局部或全身麻痹而死亡為臨床特征。臨床表現(xiàn)為恐水，怕風(fēng)，流涎，狂躁，咽肌痙攣和進(jìn)行性麻痹。

1 狂犬病的病原及傳播途徑

1.1 狂犬病的病原

1）狂犬病毒為彈狀病毒科狂犬病毒屬的病毒，一般由自然感染狂犬病動(dòng)物所分離的病毒（稱為街毒） 引起。街毒引起動(dòng)物發(fā)病所需的潛伏期長(zhǎng)，更易侵染腦組織和唾液腺，在神經(jīng)細(xì)胞中易出現(xiàn)包涵體。而通過(guò)家兔腦內(nèi)多次繼代，其潛伏期縮短，不侵染唾液腺，具有固定特性的病毒稱為固定毒，這種固定毒因?qū)彝靡酝獾膭?dòng)物失去了致病性，故常用于制備狂犬病疫苗。

2）本病毒的增殖周期主要在宿主細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，病毒與細(xì)胞膜表面受體結(jié)合后，經(jīng)過(guò)內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞?？袢《驹趧?dòng)物的中樞神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)繁殖，并在腦漿內(nèi)形成包涵體，稱為內(nèi)基氏小體，此種小體呈圓形或卵圓形，為嗜酸性，用姬姆薩染成紅色，大小約10～30 μm，病程愈長(zhǎng)，其體積愈大。包涵體內(nèi)部有嗜堿性小顆粒（呈紫紅色）數(shù)目不定。

3）狂犬病病毒通常用BHK-21細(xì)胞和Neuro-2a小鼠神經(jīng)瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，其中病毒接種在Neuro-2a細(xì)胞上第4～5 d可出現(xiàn)明顯的CPE現(xiàn)象。病毒對(duì)酸、堿、石碳酸、福爾馬林、新潔爾滅、升汞等消毒藥敏感，可被1%～2%肥皂水、70%酒精、0.01%碘液、丙酮、乙醚以及日光和紫外線等滅活。

4）能抵抗自溶及腐爛，在自溶的腦組織中可存活7～10 d，保存于50%甘油的腦組織中可存活1個(gè)月以上。本病毒對(duì)高溫敏感，70 ℃經(jīng)15 min 或 100 ℃經(jīng) 2 min 可被滅活。4 ℃條件下可存活幾周，-70 ℃條件下傳染性可保持幾年，真空干燥條件下于0～4 ℃可存活多年。

1.2 流行病學(xué)

狂犬病屬于自然疫源性疾病，傳染源眾多是狂犬病廣泛傳播的重要原因之一。自然界里的一些野生動(dòng)物，如狐貍、狼、黃鼠狼、獾、浣熊、猴、鹿等都能感染，家畜如狗、貓易感染。但是犬類是攜帶和傳播狂犬病病毒的主要傳染源，占90%以上，其次是貓，被貓抓傷致狂犬病的人并不少見(jiàn)，并隨著養(yǎng)貓數(shù)量的增加而增多，貓作為傳染源也在不斷擴(kuò)大。

1.3 傳播途徑

1）狂犬病毒通過(guò)損傷的皮膚和粘膜表面直接接觸而感染，但不能穿過(guò)沒(méi)有損傷的皮膚。咬傷是本病毒傳播最主要的途徑，98%的病例主要是通過(guò)患病動(dòng)物的咬傷傳播，少數(shù)病例是被患病動(dòng)物抓傷或舔觸傷口、創(chuàng)面等而感染。在特殊情況下，本病毒可通過(guò)塵埃或氣溶膠而經(jīng)呼吸道感染，野生動(dòng)物可因啃食病尸而經(jīng)消化道黏膜感染。其中已經(jīng)證實(shí)患病動(dòng)物不會(huì)通過(guò)胎盤傳給胎兒。尤以犬科動(dòng)物（犬、狐、狼）感染率高，常成為人畜狂犬病的傳染源和病毒的貯存宿主。

2）通過(guò)舔傷消化道粘膜造成感染。病毒侵入中樞神經(jīng)系統(tǒng)后，還要沿著傳出神經(jīng)傳播，最終可到達(dá)許多臟器中，如心、肺、肝、腎、肌肉等，使這些臟器發(fā)生病變。故狂犬病的癥狀特別嚴(yán)重，一旦發(fā)病有10%的致死率。瘋狗在出現(xiàn)狂躁癥狀之前數(shù)天，其唾液中即已含有大量病毒。如果被狂犬動(dòng)物咬傷或抓傷了皮膚，病毒就隨唾液侵入傷口，先在傷口周圍繁殖，當(dāng)病毒繁殖到一定數(shù)量時(shí)，就沿著周圍神經(jīng)向大腦侵入。病毒走到脊髓背側(cè)神經(jīng)根，便開(kāi)始大量繁殖，并侵入脊髓的有關(guān)節(jié)段，很快布滿整個(gè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)。

2 臨床癥狀

癥狀潛伏期的變動(dòng)范圍很大，一般為6～150 d，平均26 d，長(zhǎng)的可達(dá)數(shù)月或一年以上。因個(gè)體差異，時(shí)間長(zhǎng)短，感染的病毒量，毒株和疫苗接種情況不同而異。按犬的狂暴型可分為三期。

2.1 前驅(qū)期（沉郁期）

前驅(qū)期時(shí)間為1～2 d，病犬情緒不安，舉動(dòng)反常，不聽(tīng)呼喚，躲藏暗處，食欲不振。喉頭輕度麻痹，吞咽時(shí)頸部伸展，瞳孔散大，唾液分泌增多，常有逃跑或躲避趨勢(shì)，可能失蹤數(shù)天后歸來(lái)，此時(shí)體重減輕，滿身污泥，皮毛上帶有血跡。

2.2 興奮期（狂暴期）

經(jīng)過(guò)2～4 d的前驅(qū)期后，進(jìn)入興奮期。出現(xiàn)異嗜，喜吃碎石，干草，泥土，羽毛及木片等異物。反射機(jī)能亢進(jìn)，兇相畢露，全身肌肉痙攣、震顫，角膜干燥，狂吠，流涎，病犬狂暴不安，攻擊人和其他動(dòng)物或咬傷自己。往往狂暴與沉郁交替出現(xiàn)，病犬臥地不動(dòng)，但不久又站起來(lái)，表現(xiàn)一種特殊的斜視和惶恐的表情。隨著病勢(shì)的發(fā)展，陷于意識(shí)障礙，反射紊亂，顯著消瘦，狂咬，吠聲嘶啞，散瞳或縮瞳等，吞咽困難，見(jiàn)水惶恐，故有“恐水病”之稱。

2.3 麻痹期（興奮期）

持續(xù)1～2 d后，進(jìn)入麻痹期。病犬消瘦，下頜下垂，反應(yīng)遲鈍，張口垂舌，從口中流出帶泡沫的唾液，后驅(qū)麻痹，走動(dòng)搖擺，常躺臥地上，最后因呼吸中樞麻痹或衰竭而死亡。病程6～8 d，亦有延至10 d的。興奮期很短或輕微表現(xiàn)即轉(zhuǎn)入麻痹期，經(jīng)2～4 d死亡。

3 診斷

根據(jù)臨床癥狀,結(jié)合病史,特別是一犬咬傷多人的情況，可作出初步診斷，WHO推薦的實(shí)驗(yàn)室診斷方法有直接熒光抗體技術(shù)、小鼠接種、組織培養(yǎng)和RT-PCR等方法。

3.1 組織病理學(xué)檢查

取新鮮腦組織制成壓印標(biāo)本或病理組織切片，用Seller染色法染色，內(nèi)基小體最易在大腦海馬回和大腦皮層的錐體細(xì)胞、小腦的浦肯野細(xì)胞等細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)檢出，也見(jiàn)于基底核、腦神經(jīng)核、脊神經(jīng)節(jié)以及交感神經(jīng)節(jié)等部位的神經(jīng)細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)。

3.2 病毒分離

常用動(dòng)物接種法。取患病動(dòng)物的腦組織制成腦懸液或直接抽取腦脊液，給3～5周齡的小鼠進(jìn)行大腦內(nèi)接種，接種3～5 d出現(xiàn)因神經(jīng)癥狀而死的小鼠，用其腦進(jìn)行組織病理學(xué)檢查可見(jiàn)內(nèi)基小體。細(xì)胞培養(yǎng)也是一種快速，敏感的病毒分離方法，通常用BHK-21細(xì)胞和Neuro-2a小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，觀察CPE現(xiàn)象。

3.3 直接熒光抗體技術(shù)

用酒精浸泡載玻片 30 min后取出吹干，分別取不同部位的腦組織剖面, 均勻地涂印在載玻片上；吹干后，取冷丙酮（4 ℃）室溫固定 7～10 min；取出吹干，進(jìn)行下一步檢驗(yàn)，或置于-70℃冰箱保存；將稀釋好的熒光抗體滴加在固定好的抗原片上，將抗原片放在37 ℃濕盒中溫育30 min；取出后，用緩流沖洗抗原片 3～5 s，再用PBS 振洗 2 遍， 蒸餾水振洗 1 遍，每次 2 min，吹干；用 90%甘油（ PBS）封片，加蓋玻片，熒光顯微鏡觀察。仔細(xì)觀察每個(gè)視野的熒光強(qiáng)度，并結(jié)合不同視野的熒光分布，作出熒光強(qiáng)度的等級(jí)判斷：陰性、可疑、 ＋～＋＋＋＋-：無(wú)熒光；＋/-：極弱的可疑熒光；＋＋＋～＋＋＋＋：熒光閃亮，可見(jiàn)尼基氏小體清晰，且范圍廣泛。直接熒光抗體技術(shù)是世界衛(wèi)生組織推薦的一種方法，能在疾病的初期做出診斷。

3.4 RT-PCR

RT-PCR是一種快速，敏感，特異的診斷方法，主要檢測(cè)病毒核酸，可用于樣品的微量診斷。通常根據(jù)病毒最保守的N基因序列設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，目前廣泛應(yīng)用于流行病學(xué)的調(diào)查研究。此方法與測(cè)序結(jié)合可區(qū)分不同宿主來(lái)源的病毒變異株。

3.5 快速熒光抑制試驗(yàn)

常用于檢測(cè)病毒中和抗體。接種過(guò)狂犬病疫苗的患者抗體滴度大于0.5 IU/mL ，表明已獲得一定的保護(hù)。未接種過(guò)疫苗的患者的抗體滴度大于1 IU/mL ，且近期有4倍增高，可考慮狂犬病。

4 防治措施

4.1 加強(qiáng)宣傳教育和疫情監(jiān)控

大力開(kāi)展宣傳教育、普及防治狂犬病的知識(shí)。加強(qiáng)對(duì)犬、貓等動(dòng)物的管理，在流行地區(qū)給犬和貓進(jìn)行強(qiáng)制性接種并登記掛牌，及時(shí)掌握狂犬病流行新動(dòng)態(tài)，對(duì)疫情進(jìn)行預(yù)測(cè)、預(yù)報(bào)，為狂犬病的防控提供科學(xué)依據(jù)。

4.2 控制傳染源

加強(qiáng)動(dòng)物檢疫，控制傳染源。對(duì)從國(guó)外入境的犬應(yīng)檢疫、隔離觀察4～6個(gè)月，發(fā)現(xiàn)病犬或可疑動(dòng)物，一般不宜治療，應(yīng)立即撲殺，防止其攻擊人及其他動(dòng)物。在當(dāng)?shù)卣托竽莲F醫(yī)部門的指導(dǎo)下組織人力進(jìn)行捕殺無(wú)主犬、流浪犬及野犬，以免造成犬傷人事件。

4.3 加強(qiáng)免疫工作

目前使用的狂犬病疫苗分為滅活疫苗和弱毒活疫苗兩類?？捎糜诩胰A(yù)防，于頸側(cè)或背側(cè)皮下注射1 mL。于第1次注射后3～5 d再注射第2次。所有犬在3月齡時(shí)進(jìn)行首免，免疫期為6個(gè)月，1年后加強(qiáng)免疫1次。普防時(shí)要求75%以上的犬在1個(gè)月內(nèi)接種疫苗。采取對(duì)犬進(jìn)行嚴(yán)格管理，犬免疫或滅犬是控制人狂犬病的積極有效方法，所以養(yǎng)犬農(nóng)戶應(yīng)積極配合獸醫(yī)防疫人員對(duì)健康家犬定期進(jìn)行預(yù)防接種。所有進(jìn)行狂犬病診斷以及進(jìn)行尸體剖檢的工作人員在工作之前，都應(yīng)進(jìn)行疫苗免疫接種并確認(rèn)獲得保護(hù)。對(duì)可能接觸狂犬病的專業(yè)人員都應(yīng)該接受暴露前免疫接種，WHO 建議在第 0 d、7 d、28 d 各注射一劑疫苗，并每2年加強(qiáng)1劑。

4.4 暴露后處理措施

懷疑或確定動(dòng)物發(fā)生狂犬病時(shí)，一般不進(jìn)行治療。若為貴重種畜被患狂犬病的犬咬傷后，則應(yīng)首先消毒傷口，讓傷口局部出血，用肥皂水沖洗，然后以0.1%升汞水、酒精、醋酸，3%石碳酸，硝酸銀等消毒劑處理，并迅速用狂犬病疫苗進(jìn)行緊急接種，使被咬動(dòng)物在潛伏期就產(chǎn)生主動(dòng)免疫。目前對(duì)此病尚無(wú)特殊有效的治療方法，接種疫苗和使用抗狂犬病血清至今仍是預(yù)防感染狂犬病的主要方法。如有條件，可結(jié)合應(yīng)用免疫血清進(jìn)行治療，有一定療效。