陳粉合 鄧 祎 王恩棟 王 琰

卵巢漿液性腫瘤能夠?qū)е禄颊呱骖A(yù)后的顯著惡化，在臨床上的長(zhǎng)期隨訪過(guò)程中，可以發(fā)現(xiàn)卵巢漿液性腫瘤的總體發(fā)病率占據(jù)了所有卵巢惡性腫瘤的15%以上[1]。卵巢漿液性腫瘤的發(fā)生，不僅能夠?qū)е陆诼殉材[瘤患者生活質(zhì)量的下降，同時(shí)還能夠增加遠(yuǎn)期患者致殘及多器官功能衰竭的風(fēng)險(xiǎn)[2]?？梢园l(fā)現(xiàn)細(xì)胞腫瘤相關(guān)蛋白，能夠在卵巢上皮細(xì)胞的異常病變過(guò)程中發(fā)揮作用。胚胎致死性異常視覺(jué)基因1(ELAV1)能夠通過(guò)影響到轉(zhuǎn)錄上游啟動(dòng)子的激活程度，加劇上皮細(xì)胞的早期異常分裂的風(fēng)險(xiǎn)，影響到卵巢腫瘤的發(fā)生[3]；人宮頸癌基因(HCCR)能夠通過(guò)整合病毒顆粒，降低對(duì)于癌基因的錯(cuò)配修復(fù)能力，最終提高惡性腫瘤細(xì)胞的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)[4]；微小染色體維持蛋白(MCM)能夠在染色體特性的維持方面發(fā)揮作用，其對(duì)于染色體穩(wěn)定性的修飾作用，能夠提高腫瘤細(xì)胞染色體異常分離的可能[5]。為了揭示ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)與卵巢漿液性腫瘤的發(fā)生關(guān)系，從而為臨床上卵巢腫瘤的發(fā)生提供理論參考，本次研究選取2016年3月至2017年8月在我院治療的卵巢漿液性腫瘤患者為研究對(duì)象，探討了ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)情況，報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取2016年3月至2017年8月在我院治療的卵巢漿液性腫瘤患者為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①成年者；②經(jīng)臨床表現(xiàn)和病理檢查確診為卵巢漿液性腫瘤；③無(wú)其他生殖系統(tǒng)疾病；排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料不完全者；②無(wú)其他嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病者。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)共納入患者150例，年齡35～65歲，平均(45.35±4.97)歲；其中，良性腫瘤組100例，年齡30～62歲，平均(45.31±5.03)歲；惡性腫瘤組50例，年齡35～65歲，平均(45.37±4.67)歲。兩組的一般資料方面無(wú)明顯差別，研究經(jīng)倫理委員會(huì)評(píng)審?fù)ㄟ^(guò)。

1.2 研究方法

石蠟切片采用二甲苯進(jìn)行脫臘至水，5%的雙氧水常溫在孵育10 min，采用磷酸鹽緩沖液孵育5 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，5%的山羊血清抗體封閉10 min，不沖洗，滴加一抗(購(gòu)自abcum公司 批號(hào)：20119304濃度：1∶500)，4 ℃冰箱孵育過(guò)夜，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，滴加生物素標(biāo)記好的二抗(購(gòu)自北京康泰生物 批號(hào)：20104856 濃度：1∶1000)，37 ℃孵育30 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，滴加第二代辣根酶標(biāo)記的工作液體，37 ℃孵育10 min，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，顯色之后采用酒精脫水、二甲苯透明、樹(shù)膠封片，鏡下觀察。

1.3 評(píng)價(jià)指標(biāo)

觀察兩組患者ELAV1、HCCR、MCM4表達(dá)情況，比較不同臨床病理類型卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4表達(dá)的差異，分析影響卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4表達(dá)的因素。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

數(shù)據(jù)采用Excel錄入后，應(yīng)用SPSS 11.5軟件分析。應(yīng)用卡方檢驗(yàn)、回歸分析法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者ELAV1、HCCR、MCM4水平的比較

卵巢漿液性惡性腫瘤組患者的ELAV1、HCCR、MCM4陽(yáng)性表達(dá)率分別為60.00%、70.00%、80.00%，高于對(duì)照組的12.00%、8.00%、5.00%(P<0.001)，見(jiàn)表1。

表1 兩組患者ELAV1、HCCR、MCM4陽(yáng)性表達(dá)的比較/例

2.2 不同臨床病理特征卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4的比較

臨床分期為Ⅲ+Ⅳ期、組織學(xué)分級(jí)為中、低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4蛋白陽(yáng)性表達(dá)水平較高，不同年齡的卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4水平無(wú)明顯差別，見(jiàn)表2。

2.3 影響卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4的因素分析

將單因素分析有意義的因素作為自變量，將ELAV1、HCCR、MCM4蛋白水平作為因變量進(jìn)行多因素分析，結(jié)果顯示，組織學(xué)分級(jí)是影響卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4蛋白水平的因素。見(jiàn)表3。

3 討論

多種多樣病理性因素導(dǎo)致的卵巢生發(fā)上皮細(xì)胞的異常病變，能夠影響到癌基因的突變、提高癌細(xì)胞內(nèi)腫瘤蛋白的激活程度。在遺傳因素或者后天卵巢性激素分泌紊亂的過(guò)程中，癌細(xì)胞的內(nèi)外環(huán)境的改變，均能夠提高卵巢漿液性腫瘤的總體發(fā)病率[6]。臨床上的觀察發(fā)現(xiàn)，卵巢漿液性腫瘤患者的3年或者5年生存率明顯的下降，患者的總體無(wú)瘤生存時(shí)間可顯著的縮短[7]。通過(guò)對(duì)于卵巢漿液性腫瘤患者臨床病理特征的評(píng)估，可以為臨床上卵巢腫瘤相關(guān)患者的診療提供參考依據(jù)。不同的腫瘤分子相關(guān)蛋白，均能夠在卵巢漿液性腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮作用。雖然現(xiàn)階段臨床上有多數(shù)研究者探討了腫瘤蛋白的波動(dòng)在卵巢漿液性腫瘤發(fā)生過(guò)程中的價(jià)值，但多數(shù)研究?jī)H僅限于對(duì)于CA125、CA199或者CEA等指標(biāo)的探討。相關(guān)研究缺乏新穎性和創(chuàng)新點(diǎn)。同時(shí)通過(guò)對(duì)于CA125、CA199或者CEA等指標(biāo)的研究，難以為臨床上卵巢漿液性腫瘤的臨床病理特征的評(píng)估提供可靠的依據(jù)[8]。而本次研究的創(chuàng)新性在于揭露了ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)與卵巢漿液性腫瘤病理特征的關(guān)系。最初認(rèn)為ELAV1主要存在于視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞中，近年來(lái)相關(guān)基礎(chǔ)方面的研究證實(shí)，在生發(fā)上皮或者間質(zhì)組織成分中，ELAV1的表達(dá)濃度同樣可以明顯上升。上升的ELAV1能夠通過(guò)影響到轉(zhuǎn)錄開(kāi)放閱讀區(qū)的激活程度，加劇癌細(xì)胞核DNA的異常分裂，最終影響到腫瘤的發(fā)生；HCCR是宮頸癌相關(guān)基因，在婦科惡性腫瘤患者中，HCCR的上升能夠影響到腫瘤細(xì)胞癌基因的擴(kuò)增活性，提高癌基因的單核苷酸擴(kuò)增效率[9]；MCM4是染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白，其對(duì)于染色體結(jié)構(gòu)的修飾作用，能夠影響到染色體的復(fù)制速度[10]。

表2 不同臨床病理特征卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4陽(yáng)性表達(dá)的比較/例

表3 影響卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4的因素分析

可以發(fā)現(xiàn)的是，免疫組化結(jié)果中ELAV1、HCCR、MCM4蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率水平明顯的高于卵巢良性組織，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著，表明ELAV1、HCCR、MCM4的高表達(dá)可能影響到了卵巢漿液性腫瘤的發(fā)生。ELAV1、HCCR、MCM4在漿液性來(lái)源惡性腫瘤患者中的高表達(dá)，主要由于漿液性腫瘤來(lái)源細(xì)胞，其癌細(xì)胞內(nèi)不同腫瘤相關(guān)信號(hào)通路的激活增加了腫瘤蛋白的合成和釋放有關(guān)[11-12]。而ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)上升，又能夠通過(guò)正反饋調(diào)控作用，提高腫瘤細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)復(fù)制組裝的效率，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)過(guò)程。有部分研究者揭露了MCM4的表達(dá)與婦科惡性腫瘤的關(guān)系，認(rèn)為在婦科惡性腫瘤患者中MCM4蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率水平可隨著患者病情的加重而顯著上升，同時(shí)婦科腫瘤患者的病情進(jìn)展率越高，MCM4蛋白的表達(dá)濃度越高[13]。在研究ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)與卵巢漿液性腫瘤患者臨床特征的關(guān)系中，發(fā)現(xiàn)在臨床分期為Ⅲ+Ⅳ期、組織學(xué)分級(jí)為中、低分化、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的卵巢漿液性惡性腫瘤患者中，ELAV1、HCCR、MCM4蛋白陽(yáng)性表達(dá)水平較高，高于相應(yīng)的臨床病理特征較輕的患者，統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著，提示ELAV1、HCCR、MCM4的高表達(dá)對(duì)于卵巢漿液性腫瘤具有顯著的標(biāo)志作用。臨床上通過(guò)檢測(cè)ELAV1、HCCR、MCM4，可能在協(xié)助卵巢腫瘤臨床病情的判斷方面發(fā)揮一定的作用。ELAV1、HCCR、MCM4上升對(duì)于卵巢漿液性腫瘤病理特征的具體影響機(jī)制，主要由于癌基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控的異常、癌細(xì)胞內(nèi)第二信使的激活及信號(hào)通路蛋白的異常波動(dòng)等因素有關(guān)[14-15]。危險(xiǎn)因素分析也可見(jiàn)，組織學(xué)分級(jí)是影響卵巢漿液性惡性腫瘤患者ELAV1、HCCR、MCM4蛋白水平的因素，進(jìn)一步表明了ELAV1、HCCR、MCM4蛋白的表達(dá)與卵巢腫瘤患者的病情關(guān)系。

綜上所述，在卵巢漿液性腫瘤患者中，ELAV1、HCCR、MCM4蛋白的表達(dá)濃度可明顯上升，同時(shí)ELAV1、HCCR、MCM4的表達(dá)可能影響到了卵巢漿液性腫瘤的臨床分期、組織學(xué)分級(jí)等病理特征。