晏小霞，邱燕連，王茂媛，王清隆，王祝年

(中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所，海南 儋州 571737)

益智(AlpiniaoxyphyllaMiq.)為姜科山姜屬植物，果實(shí)供藥用，味辛、性溫，歸脾、腎經(jīng)，有暖腎固精縮尿、溫脾止瀉攝唾的功效，常被作為助陽的溫補(bǔ)藥材[1-2]。益智盛產(chǎn)于海南，氣味芳香，作為重要的藥食同源作物，不僅是多種中成藥和保健品的重要原料，也廣泛用于休閑食品、調(diào)味品等中。民間將益智用于藥膳、釀酒、袋泡茶、果脯、腌菜等，海南及廣東有采摘未成熟的益智仁，用糖醋鹽腌漬，作為助餐的副食品，其有開胃、健脾、促進(jìn)食欲、幫助消化的作用[3]。

植物揮發(fā)油又稱植物精油，是植物產(chǎn)生的一種具有芬芳?xì)馕兜拇紊x產(chǎn)物，因其生物活性多樣化，被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝品等行業(yè)[4-6]。揮發(fā)油為益智的主要活性成分，其成分及含量在一定程度上可以反映益智的品質(zhì)。揮發(fā)油主要由相對分子質(zhì)量較小的簡單化合物組成，易受外界環(huán)境的影響而發(fā)生變異和變質(zhì)，張永清、田夢云等人研究也表明，干燥過程是影響植物中揮發(fā)油含量及成分的重要環(huán)節(jié)[7-9]。目前益智在產(chǎn)地的加工主要采用太陽曬干的干燥方法，益智在產(chǎn)地加工干燥過程中普遍未進(jìn)行質(zhì)量控制，干燥后揮發(fā)性成分的變化尚未見報道。本研究采用水蒸氣蒸餾法提取益智鮮果和干果的揮發(fā)油, 用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法分析鑒定其化學(xué)成分，探討益智果實(shí)干燥前后揮發(fā)油含量和成分的變化，為益智產(chǎn)地加工干燥過程質(zhì)量控制提供了參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

供試樣品采自海南省儋州市農(nóng)業(yè)部熱帶藥用植物種質(zhì)資源圃，由中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所王祝年研究員鑒定為姜科植物益智(AlpiniaoxyphyllaMiq.)成熟果實(shí)。去凈果梗及雜物后，分為兩份，一份置于陽光充足處進(jìn)行晾曬，一份直接進(jìn)行揮發(fā)油提取。

1.2 方法

1.2.1 揮發(fā)油的提取

按2015年版《中國藥典》四部通則2204法提取揮發(fā)油。將益智果實(shí)搗碎分別稱取鮮果100.0 g、干果30.0 g，裝入揮發(fā)油提取器中，加入蒸餾水，用恒溫加熱器加熱提取約5 h，至測定器中油量不再增加，靜置分層后收集揮發(fā)油，并計算得率。

1.2.2 GC-MS分析

用毛細(xì)管氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(HP6890/HP5975C GC/MS聯(lián)用儀，美國惠普公司)進(jìn)行GC-MS分析。

氣相色譜條件：色譜柱為HP-5MS 5% 苯基甲基硅氧烷(30 m×0.25 mm×0.25 μm)彈性石英毛細(xì)管柱，柱溫50 ℃(保留1 min)，以5 ℃/min升溫至280 ℃，保持2 min；汽化室溫度250 ℃；載氣為高純He(99.999%)；柱前壓7.62 psi，載氣流量1.0 mL/min；進(jìn)樣量1 μL；分流比40∶1。

質(zhì)譜條件：離子源為EI源；離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃；電子能量70 eV；發(fā)射電流34.6 μA；倍增器電壓1871 V；接口溫度280 ℃；質(zhì)量范圍20～550 amu。

1.3 數(shù)據(jù)處理及質(zhì)譜檢索

通過HPMSD化學(xué)工作站，結(jié)合Nist 05質(zhì)譜圖庫和Wiley質(zhì)譜圖庫對樣品成分進(jìn)行鑒定，按峰面積歸一化法進(jìn)行計算，求得各化學(xué)成分在揮發(fā)油中的相對含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 益智干燥前后揮發(fā)油含量

表1 益智鮮果和干果揮發(fā)油含量 (n=3)Table 1 The content of volatile oils in fresh and dried fruits of Alpinia oxyphylla(n=3)

由表1可知，益智果實(shí)干燥前后揮發(fā)油均為具有特殊濃郁香味的透明淡黃色油狀物。經(jīng)測定，益智干鮮比為26.77%，益智鮮果揮發(fā)油含量為0.35%，折算后，相當(dāng)于干品揮發(fā)油含量為1.31%，略高于干燥后的揮發(fā)油含量，說明干燥過程中揮發(fā)油有輕微損失。

2.2 益智干燥前后揮發(fā)油成分及其含量

采用GC-MS 分析技術(shù)對益智干燥前后揮發(fā)油成分進(jìn)行測定，總離子流色譜圖見圖1。

圖1 益智鮮果和干果揮發(fā)油GC-MS總離子流色譜圖Fig.1 The total ion chromatogram of volatile oils from fresh and dried fruits of Alpinia oxyphylla

經(jīng)計算機(jī)檢索及核對質(zhì)譜標(biāo)準(zhǔn)譜圖，從益智鮮果和干果揮發(fā)油中分別鑒定出64種和55種成分，主要為萜類及含氧衍生物，分別占其揮發(fā)油總量的88.85%和80.36%，其中共有成分51種，分別占揮發(fā)油總量的82.55%和78.11%，結(jié)果見表2。

表2 益智鮮果和干果揮發(fā)油化學(xué)成分Table 2 The chemical components of volatile oils from fresh and dried fruits of Alpinia oxyphylla

續(xù) 表

益智鮮果和干果揮發(fā)油中含量最高的成分均為圓柚酮，相對含量分別為26.79%、24.06%，干燥后含量減少了2.73%；其次為p-聚傘花烴，相對含量分別為5.72%、6.50%，干燥后含量增加了0.78%。(+)-氧代-α-衣蘭烯、1S,(Z)-菖莆烯、氧化蛇麻烯 II、順-羅勒烯干燥后含量分別增加了3.10%、2.04%、1.72%、1.11%；L-芳樟醇、γ-松油烯、桃金娘醛、松油烯-4-醇干燥后分別減少了3.73%、3.19%、1.54%、1.29%。益智鮮果中有13 種化合物在其干品中未檢出，如α-愈創(chuàng)木烯、刺伯烯、Valerenol、β-石竹烯和橙花叔醇。而在鮮果揮發(fā)油中未檢出的4種化合物卻在干果揮發(fā)油中被檢測出，如1S,(Z)-菖莆烯、香橙烯、辛醛、5,5-dimethyl-2(5H)-Furanone。

3 討論與結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)通過對益智干燥前后揮發(fā)油含量和成分進(jìn)行分析比較，以此探究產(chǎn)地干燥對益智藥材質(zhì)量的影響。研究結(jié)果表明，益智干燥前后揮發(fā)油得油率有一定的差異，鮮品的得油率稍高于干品?？赡苁怯捎诟稍飼r，溫度的升高導(dǎo)致一些易揮發(fā)的成分揮發(fā)，從而造成揮發(fā)油總含量降低。

益智果實(shí)干燥前后揮發(fā)油成分均以萜類及含氧衍生物為主，與前人研究報道的相似[10-11]，但揮發(fā)油化學(xué)成分及含量發(fā)生了明顯變化，共有的51種成分中，22種成分相對含量增加，29種成分相對含量減少，推測益智果實(shí)在干燥過程中，由于高溫使益智揮發(fā)油發(fā)生了某些化學(xué)或物理變化，使其含量在干燥前后發(fā)生了改變。鮮果中含有13 種化合物在其干品中未檢出，可能是鮮果在干燥的過程中揮發(fā)性成分揮發(fā)，或轉(zhuǎn)化成其他的化合物。在鮮果揮發(fā)油中未檢出的4種化合物卻在干果揮發(fā)油中被檢測出，可能是在干燥的過程中發(fā)生了化學(xué)或物理變化，產(chǎn)生了新的化學(xué)成分。

揮發(fā)油作為益智的主要活性物質(zhì)，其化學(xué)成分的組成及含量直接反映藥材質(zhì)量的好壞，本實(shí)驗(yàn)研究表明，益智干燥前后揮發(fā)油含量及其組成均有一定差異，說明干燥過程是影響藥材質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)，因此，應(yīng)加強(qiáng)對益智產(chǎn)地加工干燥過程的質(zhì)量控制并優(yōu)化干燥工藝，減少揮發(fā)性活性成分的損失，穩(wěn)定藥材質(zhì)量。