黃 劍，馬曉彤，張亞杰，韓 冬，李麗靜，劉 佳

（長春中醫(yī)藥大學(xué)，吉林 長春 130117）

日光中的紫外線包括三個波段：短波UVC（200—280nm）、中波UVB（280—320nm）和長波UVA（320—400nm）。其中可穿過大氣層到達地球表面的是UVA和UVB，地球表面的紫外線由以上二者構(gòu)成。UVA能夠引起皮膚的黑色素聚集以及免疫抑制，而UVB通過皮膚照射可產(chǎn)生高度活化的自由基，損傷機體內(nèi)的DNA和細胞膜，并且破壞一些細胞酶類物質(zhì)。表皮生長因子（Epidermal growth factor，EGF）是一種由機體分泌的，可以與細胞表面的表皮生長因子受體（EGFR）結(jié)合，具有刺激細胞生長、增殖和存活的多肽，是一種細胞生長因子。EGF的生物效益已經(jīng)被廣泛運用于醫(yī)療用途，如改善傷口愈合，同時應(yīng)用于化妝品中。

一、紫外線皮膚損傷模型研究

1.動物模型。（1）豚鼠皮膚損傷模型。將豚鼠背部照射側(cè)皮膚剃毛，暴露3cm×5cm范圍。在距離動物皮膚10cm處進行紫外線光源（保健紫外燈，功率30W）照射。第一次正式照射前，先測定最小紅斑及光照射強度。開始每日1次，每次照射量：UVB為0.168J/cm2，UVA為0.276J/cm2，以后視皮膚對最小紅斑劑量適應(yīng)情況逐漸增加，持續(xù)照射60天[1]。（2）無毛鼠模型。將Skh：Hr1無毛鼠置于有熒光燈（280—320nm，峰值在313nm的TL 20W/12）的動物輻照室中，使其暴露于UVB輻射中。借助于UV計確定光強度。每周以80mJ/cm2的劑量進行3次UVB照射（照射時間1分鐘36s），連續(xù)10周[2]。

2.細胞模型。使用雌性供體的人真皮成纖維細胞或CCD-986sk，DMEM培養(yǎng)基（含10%FBS，2mmol/L谷氨酰胺，100單位/ml青霉素，50mg/ml鏈霉素），37℃，5% CO2培養(yǎng)。將細胞保持在磷酸鹽緩沖鹽溶液中，使用UVB照射（100mJ/cm；輻照時間10s），照射后立即用含10%FBS的DMEM代替。刺激后24小時收獲細胞用于實驗[2、3]。

二、EGF對紫外線引起損傷皮膚顏色的影響

有研究結(jié)果顯示，利用紫外線對小鼠背部照射進行造模，使用激光照射配以EGF凝膠涂抹，在造模后治療兩周，與模型組相比，皮膚色沉明顯改善，治療4周后，激光加EGF凝膠組皮膚顏色接近于造模之前的皮膚顏色狀態(tài)，同時進行病理觀察黑色素顆粒在表皮中的含量，并進行量化分析，在治療2周和4周時，與模型組相比，黑色素顆粒含量降低明顯，具有統(tǒng)計學(xué)意義[4]。含EGF血清可以提高萎縮性皮膚疤痕的受試者的IGA評分，并降低Goodman評級。在患者的自我評估中，81%的患者報告他們的疤痕較基線有“良好”到“極好”的改善[5]。

三、EGF對紫外線引起損傷皮膚病理變化的影響

EGF可以使紫外線誘導(dǎo)皮膚損傷小鼠表皮厚度降低[3]。減少表皮中黑色素細胞的數(shù)量，減少皮膚經(jīng)紫外線照射后的黑色素沉積[6]。

四、EGF保護紫外線引起損傷皮膚的機制

EGF可以抑制人類角化細胞經(jīng)UVB照射NF-κB基因表達，并且能夠逆轉(zhuǎn)紫外線照射誘導(dǎo)的NF-κB p65蛋白表達水平的升高[7]。EGF可以通過MAPK通路模擬非同源末端連接調(diào)控皮膚細胞DNA雙鏈斷裂的整體修復(fù)能力[8]。

五、展望

目前，已經(jīng)在尿液、唾液、牛奶和血漿中發(fā)現(xiàn)了EGF，但要有效地分離EGF仍然是一項艱巨的任務(wù)。隨著技術(shù)的進步，重組蛋白的純化技術(shù)已用于EGF的生產(chǎn)。然而，重組EGF的價格依然昂貴，臨床應(yīng)用難以普及，同時賦予并增加重組EGF穩(wěn)定的活性仍然是科研工作者長期研究的主題。