楊 旭 舒 鳴 白 玲 郭青春 王 湘
(懷化職業(yè)技術(shù)學院,湖南懷化 418000)
獸醫(yī)臨床進行診治過程中,有效微生物鑒定十分關(guān)鍵,而具體鑒定過程中,不同方法的鑒定效果和成效也存在著一定程度不同之處,那么就需要結(jié)合實際情況選用合理的方法進行鑒定。傳統(tǒng)鑒定方法中,可以通過顯微鏡首先進行形態(tài)鑒定,將形態(tài)分為球狀、桿狀和螺旋狀,這樣的觀察為后續(xù)其他生理生化特征鑒定會鋪下很關(guān)鍵的基礎(chǔ)。而除此之外,傳統(tǒng)鑒定過程中,又離不開生理生化特性鑒定,這也是相對關(guān)鍵一部分內(nèi)容,對于整體操作效果來說有著決定性影響價值和意義。
分離培養(yǎng)是在具體操作過程中十分關(guān)鍵一部分內(nèi)容,也是傳統(tǒng)鑒定過程中獲得純病原微生物的基礎(chǔ)手段、基本技能,每一類病原微生物自身都有較為明顯的特異性和特殊性,其自身生物學特征也十分明顯,因此培養(yǎng)過程中也需要充分認識這一特點[1]。一般來說病原微生物對于生長環(huán)境都有著一定要求,特別是對于氧氣、二氧化碳等方面有著基礎(chǔ)性要求,同時也有一些病原微生物會在液體、固體或半固體培養(yǎng)基中生長,同時還需要觀察其自身血平板上的溶血情況,色素以及氣味,這都是后續(xù)鑒定的最主要依據(jù)。而生化特征方面,則是利用生物化學的方法來辨別不同病原微生物,通過這樣試驗得到最終結(jié)果,一般活細胞中存在全部生物化學反應稱之為大些,而代謝主要是酶促反應過程,不同病原微生物自身的生物酶系統(tǒng)也存在著一定差異,因此對底物分解能力有所不同,營養(yǎng)物質(zhì)吸收利用、排泄物分解和合成也會存在著一定不同。那么在進行界定、鑒定過程中,就可以根據(jù)這樣的特異性差異,對其自身種類情況進行一定劃分,進一步有效鑒定其種類特點,優(yōu)化最終鑒定的效果和質(zhì)量的情況。
結(jié)合這一特點,具體應用的過程中也逐漸開發(fā)出來自動化的系統(tǒng),能夠準確進行鑒定,同時也能夠讓其自身試驗效果更加明確。在這樣情況下,由于其自身應用范圍相對較為廣泛,應用時間相對較長一些,憑借這樣優(yōu)勢,也一定程度上提高了其自身技術(shù)的成熟性,優(yōu)化了技術(shù)最終應用效果,自動檢定系統(tǒng)的優(yōu)越性也不容小覷。但值得一提的是,其自身應用時也有不足之處,影響最終效果以及效率等情況。
在具體應用過程中,傳統(tǒng)生化鑒定方法存在著一定不足之處,主要是在實際操作過程中,同一鑒定板檢測出現(xiàn)不同生物型原因試驗中,應用四種不同麥氏濃度,將三種不同種屬病原微生物放置于不同濕度恒溫箱中,得到不同濕度條件下鑒定板中汽包則會直接影響實驗結(jié)果[2]。這樣的情況會直接影響最終效果,歸根結(jié)底其自身很容易受多種因素影響,導致最終結(jié)果出現(xiàn)偏差,如果不能謹慎操作,則很容易出現(xiàn)一定問題。
基因分子鑒定的方法相對較為多樣,而目前應用相對較成熟的一類就是16SrRNA基因序列分析鑒定,其自身由保守區(qū)和可變區(qū)交錯排列所組成,自20世紀八十年代就開始有在這方面投入研究。一般而言此類方法應用相對較為廣泛,單純形態(tài)學以及生化檢查大多數(shù)都不能完全鑒定種屬,操作也相對較為復雜,影響最終質(zhì)量和效果的因素較多,而此類技術(shù)則可以充分有效鑒定,起到一個有效分類的作用。其自身作為分類方法,不僅僅應用于病原微生物分類,還可以應用于其他生物分類,作用效果相對較好。但其自身也可以與生化鑒定二者聯(lián)合,然后明確相應的種屬,提高最終鑒定的效果。
值得一提的是,23SrRNA基因序列所包含信息量是原本一類方法的兩倍,因此也經(jīng)用于物種鑒定,能夠特異性進行物種鑒定,對于種屬確定來說有著積極價值。此類方法具備較強特異性和變異性,對于親緣關(guān)系比較近種系鑒定有著積極意義,鑒定作用效果更好,尤其比傳統(tǒng)方法成效更佳??偟膩碚f,目前相關(guān)技術(shù)也在不斷走向成熟化,最終操作相對更為簡便,能夠針對性進行鑒定,效果也相對較好一些。而在具體進行操作過程中,此類技術(shù)不用依賴于微生物分離培養(yǎng),能夠快速精準進行相應的鑒定,比傳統(tǒng)技術(shù)和方法成效更佳,能夠輔助提升臨床鑒定的效果,要對相關(guān)技術(shù)充分重視。
如上所述,獸醫(yī)臨床細菌傳統(tǒng)鑒定以及基因分子鑒定技術(shù)的應用價值和意義十分明顯,傳統(tǒng)技術(shù)存在著一定不足之處,效果很容易受到諸多影響因素作用產(chǎn)生一定問題,而基因分子則可以有效鑒定,效果較好,可以結(jié)合實際情況選用。