黃世群,文 婷,秦 琳,趙 珊, 仲伶俐,李 曦,白 勝

(1.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析測試中心，四川 成都 610066；2.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院服務(wù)中心,四川 成都 610066)

粗蛋白質(zhì)是動物飼料中重要的營養(yǎng)成分，也是衡量飼料營養(yǎng)價值極其重要的指標(biāo)之一。飼料范圍極其廣泛，常常會有顆粒飼料、飼料原料、飼料添加劑、預(yù)混料、青飼料、青貯飼料等等，作為檢測單位顆粒飼料、飼料添加劑、預(yù)混料等是最常見的飼料品種，制樣也方便、快捷，粗蛋白含量較高，檢測結(jié)果比較準(zhǔn)確。由于我國蛋白質(zhì)飼料資源缺乏，為充分利用自然資源，各種自然界的雜草都可能被探索，以期作為動物青飼料得以利用。因此作為檢測中心收到的樣品是五花八門，有稻草、滕蔓植物、雜草、紅薯葉等等，有的委托檢測時寫有品種名，有的直接就是牧草代替名稱，而且送檢青飼料90%以上都是原樣，長短不齊，粗細(xì)不均，老嫩不一等，如玉米植株直接就是玉米莖帶葉帶玉米棒整株送檢。因此，這類樣品既要保證樣品具有代表性，還要充分滿足檢測要求，選擇最合適的檢測方法和檢測儀器才能準(zhǔn)確測試青飼料粗蛋白質(zhì)含量。

目前，對于飼料粗蛋白質(zhì)測定有3個標(biāo)準(zhǔn)方法，GB/T6432-2018飼料中粗蛋白質(zhì)的測定 凱氏定氮法，此法適用于配合飼料、濃縮原料和單一飼料中粗蛋白質(zhì)的測定[1]；SN/T2115-2008進(jìn)出口食品和飼料中總氮及粗蛋白的檢測方法，此法適用于進(jìn)出口食品和飼料總氮測定并計(jì)算粗蛋白含量[2]；GB/T24318-2009杜馬斯燃燒法測定飼料原料中總氮含量及粗蛋白質(zhì)的計(jì)算，此法只適用于單一飼料原料中總氮含量和粗蛋白質(zhì)含量計(jì)算[3]。隨著人們環(huán)保意識的增強(qiáng)，燃燒法在我國越來越被認(rèn)可，不僅在化學(xué)制藥、能源、石油化工、測定環(huán)境等方面得到利用，而且在農(nóng)業(yè)土壤、肥料、飼料、農(nóng)產(chǎn)品及食品方面均已廣泛應(yīng)用，而燃燒法儀器也在不斷更新?lián)Q代，目前，德國ELementar公司生產(chǎn)的最新一代產(chǎn)品(rapid MAX N exceed)杜馬斯燃燒法氮/蛋白質(zhì)分析儀，它是從“微量分析”覆蓋到“痕量”“微量”“常量分析”，檢測氮含量范圍在0.04%～100%間，可以廣泛運(yùn)用于食品、飼料、肥料和土壤等氮或粗蛋白含量的檢測。

為探索 (rapid MAX N exceed) 杜馬斯燃燒法氮/蛋白質(zhì)分析儀測定青飼料中粗蛋白質(zhì)含量可行性，使用該杜馬斯燃燒法氮/蛋白質(zhì)分析儀與自動凱氏定氮儀分別以16個青飼料為材料進(jìn)行總氮測定，并利用其檢測所得總氮含量計(jì)算出粗蛋白含量并進(jìn)行對比分析，進(jìn)一步了解(rapid MAX N exceed) 杜馬斯燃燒法氮/蛋白質(zhì)分析儀性能，以及對青飼料樣品檢測的適應(yīng)性和準(zhǔn)確性，以便更好更快地提供服務(wù)。

1 材料與方法

1.1 樣品的選擇與制備

1.1.1 樣品的選擇 本試驗(yàn)選用的青飼料為4個金牧糧草、4個牧草、1個皇竹草、1個象草、1個聚才草、1個黃金草和4個甘薯葉片共16個樣品為供試材料，均由四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院分析測試中心提供，為客戶送檢樣。

1.1.2 樣品的制備 4個甘薯葉片分別切碎后用勻漿機(jī)制備成勻漿樣品后進(jìn)行測試，其他12個草類樣品樣品分別切成小段，用勻漿機(jī)打碎后用磁盤裝好攤平后放入恒溫干燥箱內(nèi)，按國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T6435-2014 飼料中水分的測定方法進(jìn)行烘干處理并恒重計(jì)算出水分[4]，然后將烘干樣品進(jìn)行制備成粉碎狀進(jìn)行測試。

1.2 主要測試儀器

AUY220 電子天平(精度0.1mg)；消化爐(FOSS公司)；自動凱氏定氮儀(FOSS8200 瑞典);新型杜馬斯燃燒法定氮儀(rapid MAX N EXCEED 德國ELementar公司)；恒溫干燥箱。

1.3 檢測方法

自動凱氏定氮法：GB/T6432-2018飼料中粗蛋白質(zhì)的測定 凱氏定氮法，以總氮×6.25為粗蛋白含量。

新型杜馬斯燃燒法氮/蛋白質(zhì)分析儀法：按GB/T24318-2009杜馬斯燃燒法測定飼料原料中總氮含量及粗蛋白質(zhì)的計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢測。按總氮×6.25粗蛋白換算系數(shù)儀器自動得出粗蛋白含量。

飼料水分測定方法：GB/T6435-2014 飼料中水分的測定中直接干燥法進(jìn)行測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

采用DPS統(tǒng)計(jì)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和多重比較，采用EXCEL軟件進(jìn)行線性回歸分析，P<0.05認(rèn)為統(tǒng)計(jì)學(xué)市委常委顯著性差異[5]。

2 結(jié)果與分析

由于飼料沒有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，因此新型杜馬斯燃燒法氮/蛋白質(zhì)分析儀法和自動凱氏定氮法均選用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)含氮量高、中、低的硫酸銨、全麥粉和土壤作參考進(jìn)行精密度和質(zhì)量控制測試，兩種儀器重復(fù)測試標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)含氮量均接近真實(shí)值，表明儀器運(yùn)行完全正常，測試供試樣品結(jié)果如下。

表1 2種方法測定出的16個供試樣品原樣粗蛋白質(zhì)含量結(jié)果與分析(n=3) (單位：%)

從表1得知，16個樣品采用自動凱氏定氮儀和新型杜馬斯燃燒法氮/蛋白質(zhì)分析儀測定粗蛋白質(zhì)含量結(jié)果其RSD<5%，同一樣品兩種儀器的測定結(jié)果沒顯著差異(P>0.05)，同一樣品測定值新型杜馬斯燃燒法氮/蛋白質(zhì)分析儀測定值多數(shù)高于自動凱氏定氮儀的測定值(R/K值>1.0以上的11個)。

3 結(jié)論

新型杜馬斯燃燒法氮/蛋白質(zhì)分析儀是利用燃燒過程中形成的氮?dú)鈿饬魍ㄟ^熱導(dǎo)檢測器(TCD)進(jìn)行檢測，利用所得峰面積得出氮含量，由于應(yīng)用軟件設(shè)計(jì)合理，只要輸入相應(yīng)的粗蛋白質(zhì)換算系數(shù)，一旦樣品檢測完畢則儀器自動得出所測樣品的粗蛋白含量，操作簡單、測量快速、結(jié)果準(zhǔn)確等，不需消煮，不需大量化學(xué)試劑特別不需強(qiáng)酸強(qiáng)堿，省力省時環(huán)保[6]，經(jīng)樣品測試精密度高，準(zhǔn)確性好，因此新型杜馬斯燃燒法氮/蛋白質(zhì)分析儀可以用于青飼料粗蛋白含量測定。