王小琴 王璐 王慶國 馮疆濤

摘 要：目的：建立同時(shí)測定蘋果中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的GC-MS檢測法。方法 樣品采用QuEChERS前處理，正己烷溶液進(jìn)行提取，經(jīng)無水硫酸鈉和PSA凈化，濃縮定容后用GC-MS法在SCAN和SIM模式下進(jìn)行測定，通過保留時(shí)間、特征離子及其相對豐度定性，外標(biāo)法定量。結(jié)果：6種有機(jī)磷農(nóng)藥質(zhì)量濃度范圍在0.025～1.000 μg/mL，久效磷在0.25～10.00 μg/mL的線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)R2均≥0.997。結(jié)論：該方法具有經(jīng)濟(jì)、快速、靈敏度高、重現(xiàn)性好等優(yōu)勢，適用于食品中多種農(nóng)藥殘留的同時(shí)快速測定。

關(guān)鍵詞：蘋果;QuEChERS;GC-MS;有機(jī)磷農(nóng)藥;外標(biāo)法定量

Determination of Seven Organophosphorus Pesticide Residues in Apple by Gas Chromatography-mass Spectrometry

WANG Xiaoqin1， WANG Lu1， WANG Qingguo2*， FENG Jiangtao1

（1.Xinjiang Aksu Center for Disease Control and prevention， Aksu 843000， China; 2.Center for Disease Control and prevention of Xinjiang Uygur Autonomous Region， Urumqi 830000， China）

Abstract： Purpose A GC-MS method for the simultaneous determination of seven organophosphorus pesticide residues in apples was established.Method Samples were pretreated with QuEChERS，Extraction with n-hexane solution，Purified by anhydrous sodium sulfate and PSA，After concentration and constant volume， it was determined by GC-MS in scan and sim mode，Qualitative analysis by retention time， characteristic ions and their relative abundance，External standard method.Result The mass concentration of Six Organophosphorus Pesticides ranges from 0.025 to 1.000 μg/mL，The linear relationship of monocrotophos in the mass concentration range of 0.25～10.00 μg/mL is good，The correlation coefficients R2 were ≥0.997. Conclusion the method has the advantages of economy， rapidity， high sensitivity and good reproducibility. It is suitable for the simultaneous and rapid determination of multiple pesticide residues in food.

Keywords： apple; QuEChERS; GC-MS; organophosphorus pesticides; external standard quantitative method

有機(jī)磷農(nóng)藥是我國應(yīng)用最多的磷酸酯類農(nóng)藥，當(dāng)前，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，有機(jī)磷農(nóng)藥的使用非常普遍、廣泛，是有效清除蔬菜、水果病蟲害危險(xiǎn)的高效廣譜殺蟲劑。而有機(jī)磷農(nóng)藥的品種非常多，常見的有樂果、久效磷、對硫酸和馬拉硫酸4種，這4種有機(jī)磷農(nóng)藥具有殺蟲譜廣、價(jià)格低廉、殺蟲速度快的優(yōu)點(diǎn)，也正是因?yàn)槿绱?，有機(jī)磷農(nóng)藥的使用范圍非常廣泛。有機(jī)磷農(nóng)藥屬于一種神經(jīng)毒物，如果攝入過量，會導(dǎo)致人的神經(jīng)功能紊亂，嚴(yán)重?fù)p害身體健康。因此，必須要開展更為高效的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測方法，才能夠準(zhǔn)確掌握農(nóng)藥的殘留情況并及時(shí)清除，對人們的生命安全做出全面保障。所以，開展蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留監(jiān)測工作，及時(shí)、準(zhǔn)確地檢測殘留農(nóng)藥，對蔬菜安全生產(chǎn)及提高蔬菜品質(zhì)具有重要意義。日常檢測中，農(nóng)殘監(jiān)測的任務(wù)繁重，當(dāng)前我國農(nóng)藥殘留監(jiān)測的方法主要為GC、GC-MS等，隨著氣相色譜三重四級桿質(zhì)譜的普及，GC-MS的檢測方法以其高選擇性、高靈敏度、高通量等特點(diǎn)，應(yīng)用越來越廣泛。

本研究以蘋果基質(zhì)作為實(shí)驗(yàn)材料，選擇本區(qū)域果農(nóng)常用的7種農(nóng)藥，建立使用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)法同時(shí)檢測7種農(nóng)藥殘留的分析方法，主要是優(yōu)化樣品前處理過程，提高檢測效率，從而降低檢測成本。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

蘋果超市自購;7種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品1 000 μg/mL（中國農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測所）;乙腈（色譜純）、正己烷（色譜純）、氯化鈉（優(yōu)級純），上海安普;無水硫酸鈉（分析純），天津化工。

Trace1300-ISQ7000氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，賽默飛;IKA混勻器;N-EVAP111氮吹儀;80-1電動離心機(jī)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 樣品提取

準(zhǔn)確稱取勻漿好的樣品5 g，于50 mL具塞離心管中，加2 g氯化鈉，渦旋混勻，加10 mL乙腈震蕩提取30 min，加無水硫酸鈉8 g，渦旋混勻1 min，4 000 r/min，離心5 min，取上清液于離心管中，加10 mL乙腈重提一遍。

1.2.2 QuEChERS凈化

將上述乙腈提取樣品的合并的10 mL提取液轉(zhuǎn)移至50 mL離心管中，加入1.5 g無水硫酸鈉和0.5 g的PSA粉末，渦旋后5 000 r/min離心2 min。取上清液用氮吹至近干，之后加1 mL正己烷混勻，過有機(jī)膜，上機(jī)用GC-MS分析。

1.2.3 氣相色譜-質(zhì)譜條件

（1）色譜條件。進(jìn)樣口溫度：290 ℃;不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣體積：1 L;載氣（高純氦氣）流速：1 mL/min;程序升溫：初始溫度60 ℃（保持1 min），以25 ℃/min升至150 ℃保持（1 min），再以15 ℃/min升至290 ℃。

（2）質(zhì)譜條件。傳輸線溫度：280 ℃;離子源溫度250 ℃;電離方式：EI;電離能量：70 eV;采集方法設(shè)置：SIM模式和SCAN模式;溶劑延遲：6 min。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

（1）農(nóng)藥單一標(biāo)準(zhǔn)中間液的配制。吸取1 mL標(biāo)準(zhǔn)溶液于10 mL容量瓶中，用丙酮稀釋并定容，配制成濃度為100 μg/mL的農(nóng)藥中間液。

（2）混合農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)使用液溶液的配制。分別準(zhǔn)確移取0.1 mL（馬拉硫磷、甲拌磷、樂果、甲基對硫磷、敵敵畏、內(nèi)吸磷）和1 mL（久效磷）單一標(biāo)準(zhǔn)中間液于10 mL容量瓶中，用丙酮稀釋并定容，配制成濃度為（馬拉硫磷、甲拌磷、樂果、甲基對硫磷、敵敵畏、內(nèi)吸磷）1 μg/mL，（久效磷）10 μg/mL的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)混合溶液，用正己烷配制標(biāo)準(zhǔn)系列。馬拉硫磷、甲拌磷、樂果、甲基對硫磷、敵敵畏、內(nèi)吸磷濃度為0 μg/mL、0.025 μg/mL、0.050 μg/mL、0.100 μg/mL、0.250 μg/mL、0.500 μg/mL、1.000 μg/mL;久效磷濃度為0 μg/mL、0.25 μg/mL、0.50 μg/mL、1.00 μg/mL、2.50 μg/mL、5.00 μg/mL、10.00 μg/mL。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍

標(biāo)準(zhǔn)曲線線性和特征離子見表1。

2.2 SIM和SCAN掃描確定特征離子和出峰時(shí)間

先在50～650范圍內(nèi)采用SCAN模式，對0.5 μg/mL的農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行掃描，確定每種農(nóng)藥的特征離子和保留時(shí)間，根據(jù)每種物質(zhì)的出峰順序，分別為每種化合物選擇一個定量離子，2個定性離子，再采用SIM模式進(jìn)行檢測。根據(jù)各物質(zhì)的保留時(shí)間和離子豐度比來定性，根據(jù)各物質(zhì)定量離子的峰面積進(jìn)行定量。各物質(zhì)出峰時(shí)間：馬拉硫磷12.07 min、甲拌磷10.29 min、樂果10.64 min、甲基對硫磷11.76 min、敵敵畏6.95 min、內(nèi)吸磷9.63 min、久效磷10.02 min。圖1為SIM掃描下各物質(zhì)的出峰時(shí)間。

2.3 加標(biāo)回收和精密度實(shí)驗(yàn)

本實(shí)驗(yàn)采用外標(biāo)法對農(nóng)藥進(jìn)行定量測定，準(zhǔn)確稱取9個平行樣品作為加標(biāo)樣品，選擇3個加標(biāo)濃度，每1個加標(biāo)濃度做3個平行，稱取10個樣品，1個作空白試驗(yàn)，9個加入0.5 μg/mL混標(biāo)測相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。該方法測定蘋果中7種農(nóng)藥組分在3個水平上的回收率均在74.2%～102.4%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在2.1%～11.5%，證明該檢測技術(shù)有良好的準(zhǔn)確度、精密度和重復(fù)性。

3 結(jié)論

建立QuEChERS-GC-MS法測定蘋果中7種有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的快速檢測分析方法，該方法具有經(jīng)濟(jì)、快速靈敏和足夠精確等優(yōu)勢;線性關(guān)系良好、加標(biāo)回收率均在74.2%～102.4%，9個加標(biāo)樣品回收率的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.1%～11.5%，與氣相色譜農(nóng)藥殘留檢測方法比，其具有提取效率高、溶劑用量少、操作簡單等優(yōu)勢，能滿足蘋果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測要求。

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作者簡介：王小琴（1986—），女，漢族，新疆阿克蘇人，本科，實(shí)驗(yàn)師。研究方向：理化、微生物檢驗(yàn)。

通信作者：王慶國（1985—），男，回族，新疆烏魯木齊人，本科，主管醫(yī)師。研究方向：食品與飲用水檢驗(yàn)檢測。E-mail：282990256@qq.com。