趙鵬飛,常明山,羅 輯,陳旭日,劉謀偉,鄧李星,蔣學建
(1.廣西壯族自治區(qū)林業(yè)科學研究院 廣西林業(yè)有害生物天敵繁育工程技術研究中心,廣西南寧 530002;2.廣西國有欽廉林場,廣西欽州 535000)
我國寄蠅種類豐富,已記載有167 屬722 種,約占世界已知種數的22%[1]。寄蠅是農業(yè)和林業(yè)中最重要的寄生性天敵,林業(yè)中的鞘翅目(Coleoptera)、直翅目(Orthoptera)、半翅目(Hemiptera)和膜翅目(Hymenoptera)等昆蟲大多都能被寄蠅寄生;天敵較少且生活隱蔽的天牛科(Cerambycidae)、木蠹蛾科(Cossidae)和金龜子科(Scarabaeidae)等林業(yè)害蟲,也有專門消滅它們的寄蠅[2]。日本追寄蠅(Exorista japonica)是雙翅目(Diptera)寄蠅科(Tachinidae)追寄蠅屬的大卵型寄生蠅[3],雌蠅將卵產于寄主體表,幼蟲孵化后鉆入寄主幼蟲體腔內,營容性寄生,在寄主蛹期鉆出寄主,寄主即被殺死。日本道寄蠅寄主廣泛,家蠶(Bombyx mori)、松毛蟲(Dendrolimus)、美國白蛾(Hyphantria cunea)、黏蟲(Mythimna sepa-rata)和斜紋夜蛾(Spodoptera litura)等30 多種害蟲都是其自然寄主,寄生率最高可達90%以上[4-8],已在我國部分地區(qū)取得了良好的林業(yè)害蟲防治應用效果,在農、林害蟲防治方面有廣闊的利用前景。目前,關于日本追寄蠅的研究多集中于生物學特性、生活史及寄主定位等方面[9-11],關于寄蠅替代寄主應用效果的研究鮮有報道,對替代寄主處理效益的研究更少。在生產中發(fā)現,現有的替代寄主(家蠶、粘蟲和甜菜夜蛾(S.exigua)等)存在寄生率和成活率低等問題,難以滿足生產需求。本研究在現有研究的基礎上對人工繁育日本追寄蠅的替代寄主進行篩選,確定最優(yōu)的替代寄主,提高日本追寄蠅的成品率,為其保護、繁殖和利用提供參考。
日本追寄蠅由廣西林業(yè)有害生物天敵繁育中心提供。
選取家蠶、甜菜夜蛾、大蠟螟(Galleria mellonella)和桉蝙蛾(Endoclyta signifer)幼蟲為寄主進行試驗。家蠶和大蠟螟幼蟲為室內累代繁殖所得;甜菜夜蛾幼蟲由濟源白云實業(yè)有限公司提供,用玉米苗飼養(yǎng);桉蝙蛾幼蟲為野外捕捉幼蟲后篩選的老熟幼蟲,接于桉樹木段備用,捕捉方法參考文獻[12]。
儀器有恒溫水浴箱、75%酒精、2個40瓦頭燈和收蠅籠。
1.2.1 日本追寄蠅替代寄主的初步篩選
2018年6 月— 2019年7月,在馬尾松(Pinus massoniana)受災林區(qū)采集攜帶3 ~4 齡馬尾松毛蟲(D.punctatus)幼蟲的新鮮馬尾松枝條,帶回室內放至養(yǎng)蟲籠(60 cm×60 cm×50 cm)內飼養(yǎng),室內條件為溫度(27 ± 1)℃、濕度(70 ± 5)%、L∶D = 16∶8,并定期投喂新鮮馬尾松枝條。日本追寄蠅幼蟲鉆入松毛蟲體內取食,老齡幼蟲在化蛹前咬開寄主表皮,然后靜止不動,慢慢化蛹,待其化蛹羽化后,收集其成蟲。
選取家蠶、甜菜夜蛾、大蠟螟和桉蝙蛾剛蛻皮的末齡幼蟲各20 頭,分別放入收蠅籠中進行試驗,并接入完成交尾后的寄蠅1 對和10%的蜂蜜水。1對寄蠅為1 個處理,每處理重復6 次。觀察并記錄幼蟲被寄生的情況,每24 h記錄1次;飼養(yǎng)被寄生的幼蟲直至結繭,調查寄蠅的化蛹數。
1.2.2 大蠟螟的處理對繁殖日本追寄蠅的影響
試驗1:筆者在以前的研究中發(fā)現,低于55 ℃的溫水處理不影響大蠟螟幼蟲的正常活動,因此試驗選取3 cm以上的大蠟螟老熟幼蟲各50頭,分別置于55、60 和65 ℃的溫水中,6 秒后取出,將蟲體表面水分晾干后備用。無任何處理為對照(CK1)。1 h 后觀察大蠟螟的活動情況,24 h后觀察死亡情況。
試驗2:選取3 cm 以上的大蠟螟老熟幼蟲各50頭,分別置于75%的酒精中2 min,撈出后分別放入55、60和65 ℃的溫水中,6秒后取出,將蟲體表面水分晾干后備用。僅75%酒精處理為對照(CK2)。1 h后觀察大蠟螟的活動情況,24 h后觀察死亡情況。
將試驗1 和試驗2 處理過的大蠟螟放入10 cm直徑的培養(yǎng)皿中,置于飼養(yǎng)籠中,并供給蜂蜜水。在籠的上方放置2個頭燈,1個頭燈的光射向蜂蜜水供給裝置,1 個射向盛放大蠟螟的培養(yǎng)皿。將10 對寄蠅移入飼養(yǎng)籠中。24 h 后取出大蠟螟,在解剖鏡下觀察并記錄寄蠅的產卵數量。將體表有寄蠅卵的大蠟螟轉移至透明塑料杯中,每天觀察被寄生的情況。每試驗重復6次。
桉蝙蛾幼蟲躲在蟲包內,日本追寄蠅無法寄生(圖1)。日本追寄蠅對家蠶和甜菜夜蛾幼蟲的寄生效果較好,寄生率均達到64%以上,對大蠟螟幼蟲的寄生效果不理想,寄生率只有21.67%。在家蠶幼蟲中的產卵數達到3 頭以上,與其他寄主中的產卵數差異顯著(P<0.05);家蠶幼蟲作為寄主的化蛹數達到3 頭以上,甜菜夜蛾幼蟲作為寄主的化蛹數為2.5頭,均顯著高于大蠟螟幼蟲(P<0.05)。
圖1 寄蠅對供試寄主的選擇性Fig.1 Selectivity of E.japonica to tested hosts
2.2.1 處理后1 h內幼蟲的情況
觀察發(fā)現,55 ℃溫水處理的大蠟螟幼蟲10 min內可全部蘇醒,隨后到處擴散尋找避光處躲避,其爬行速度與CK1中的大蠟螟幼蟲沒有區(qū)別,很容易翻越培養(yǎng)皿,30 min后全部逃離培養(yǎng)皿,找到籠內的隱蔽處躲藏并吐絲結繭。60 ℃溫水處理的大蠟螟幼蟲30 min 后逐漸蘇醒,其爬行速度和吐絲能力較CK1有所下降,80%的幼蟲爬出培養(yǎng)皿外,剩余的幼蟲1 h 后在培養(yǎng)皿中吐絲抱團,平均死亡率在1%以下。80%的大蠟螟幼蟲在65 ℃溫水處理后完全失去爬行和吐絲能力,蟲體變軟,平均死亡率在10%以上;剩余的幼蟲蟲體縮短,呈C 字形側翻,偶爾能蠕動。
75%的酒精在2 min 內能將所有的幼蟲麻醉,再經55 ℃溫水處理后的幼蟲與直接用55 ℃溫水處理的幼蟲相比差別不大,僅體色較CK2和直接用55 ℃溫水處理的幼蟲黃。酒精處理后再經60 ℃溫水處理的幼蟲20 min 后逐漸蘇醒,全部幼蟲蟲體縮短,呈C 字形側翻,完全失去爬行和吐絲能力,但能蠕動,平均死亡率在1%以下。酒精處理后再經65 ℃溫水處理的全部幼蟲蟲體縮短,呈C 字形側翻,完全失去爬行和吐絲能力,也不能蠕動,平均死亡率在15%以上。
2.2.2 幼蟲處理后對日本追寄蠅寄生的影響
65 ℃溫水處理與60 ℃溫水處理、55 ℃溫水處理以及CK1的產卵數、寄生率和化蛹數均差異顯著(P<0.05),其他3 個處理間差異不顯著,說明低于60 ℃的溫水處理對日本追寄蠅寄生大蠟螟幼蟲影響不大;CK2與CK1的寄生效果差異不顯著,說明單一酒精對日本追寄蠅寄生大蠟螟幼蟲影響不大;酒精處理協同60 ℃溫水處理可以大幅提高日本追寄蠅對大蠟螟幼蟲的產卵數、寄生率和化蛹數(表1)。
表1 日本追寄蠅對不同處理后大蠟螟幼蟲的寄生效果Tab.1 Parasitic effects of E.japonica on G.mellonella larvae with different treatments
日本追寄蠅的寄主范圍較廣,本研究選擇4 種寄主昆蟲為供試材料,在室內進行替代寄主優(yōu)化試驗。試驗發(fā)現,大蠟螟幼蟲行動迅速,有吐絲習性,由于摩擦,容易將日本追寄蠅的卵剮蹭掉,導致寄生率低。但大蠟螟對飼養(yǎng)的環(huán)境要求低,是比家蠶和甜菜夜蛾等更容易規(guī)?;a的替代寄主昆蟲,更容易滿足日本追寄蠅工廠化生產的要求。
通過采取物理技術措施,降低替代寄主的運動和吐絲能力,提高寄生率,以滿足其作為替代寄主的需要,是生產上常見的處理措施。胡鎮(zhèn)杰等[13]發(fā)現不同溫度處理替代寄主,有利于降低寄主的反抗能力,可以提高管氏腫腿蜂(Sclerodermus guani)的寄生能力,與本研究中不同溫度處理大蠟螟幼蟲的結果一致。60 ℃以下溫水處理對大蠟螟幼蟲沒有影響;60 ℃以上溫水處理能明顯降低大蠟螟幼蟲的爬行和吐絲能力,但也會引起部分幼蟲死亡。
本研究還發(fā)現,采用多種措施作用替代寄主,可以提高日本追寄蠅的寄生率。75%酒精浸泡增加了相同溫度溫水對大蠟螟幼蟲爬行和吐絲能力的影響。張桂莉[14]也發(fā)現使用75%酒精對寄主進行消毒后,既提高了周氏嚙小蜂(Chouioia cunea)的寄生率,又降低了替代寄主的腐爛率。75%酒精+60 ℃溫水處理能讓大蠟螟幼蟲失去爬行和吐絲能力,且對蟲體的影響較小,幼蟲死亡率較低,日本追寄蠅對其寄生效果較好。日本追寄蠅對處理后大蠟螟的寄生效果超過了對甜菜夜蛾的寄生效果,說明處理后的大蠟螟老熟幼蟲是日本追寄蠅較好的替代寄主。由于大蠟螟可工廠化生產,日本追寄蠅的大規(guī)模生產也成為可能。