劉國元 方威 余春梅 連博琳 陳艷紅 鐘非 張健

摘要?花色是觀賞植物最重要的特征之一，它的形成和調控受到多種內外部因素的影響。因此，了解觀賞植物顏色產(chǎn)生的機理及其調控，為培育和改良觀賞植物顏色新品種提供了重要的理論依據(jù)和前提。概述了常見花色素，尤其是花色苷的合成和種類;重點介紹了MYB轉錄因子調控花青素影響花色的最新研究進展，為觀賞植物花色改良提供了廣闊的背景。

關鍵詞?花色;花青素;觀賞植物;調控

中圖分類號?Q943.2?文獻標識碼?A?文章編號?0517-6611（2021）03-0001-04

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.03.001

Abstract?Flower color is one of the most important characteristics of ornamental plants. Its formation and regulation is affected by a series of internal and external factors. The understanding of mechanism and regulation of ornamental plant color production provides theoretical basis for breeding and improvement of new ornamental plant varieties.This article summarized the common pigment， especially the synthesis and types of anthocyanins. It focuses on the latest research progress of MYB transcription factors regulating anthocyanins to affect flower color， which provides a broad background for flower color improvement of ornamental plants.

Key words?Flower color;Anthocyanidins;Ornamental plants;Regulation

植物花器官尤其是花瓣的顏色多種多樣，它不僅可以吸引傳粉者，同時也對保護植物花粉活性、提高授粉成功率有重要意義。植物開花后花器官暴露在陽光下，花瓣中類黃酮、類胡蘿卜素等物質對維持紫外光線下花粉活性、防止花粉基因突變有重要作用?；ㄉ怯^賞植物的重要性狀，對花色的研究一直是研究的熱點。

研究者們已經(jīng)對花瓣顏色的形成原因和調控機理進行了大量的研究?；ㄉ男纬膳c花瓣自身的結構、包含色素的種類及色素位置分布有關，受到外界環(huán)境因素以及自身遺傳因素的調控。外界環(huán)境因素主要包括溫度、光照、水等物理因素以及環(huán)境的pH、礦物離子、植物激素、糖類等化學因素。自身遺傳因素主要包括植物本身產(chǎn)生的色素類種類以及其合成過程中的相關調控基因的差異。筆者介紹了一些常見色素種類，并重點描述了花青素合成和調控相關的最新進展，以利于更好地理解觀賞植物花色形成過程。

1?花瓣中色素分布

花的顏色與花瓣的組織結構、花瓣細胞中色素的類型和數(shù)量有關，其中色素起主要作用?；ò甑慕M織結構可分為上表皮、柵欄組織、海綿組織和下表皮4部分。色素在花瓣的上表皮中分布較多，在有些顏色較深度花瓣中，柵欄組織和下表皮也有色素分布[1-2]。雖然花瓣的海綿組織中沒有色素分布，海綿組織的厚度和密度會影響花色的亮度。海綿組織越厚越密，花瓣顏色越鮮艷[3]。

不同類型的色素在細胞中的亞細胞定位也不同。類胡蘿卜素一般在細胞質的質體中積累，類黃酮主要存在于液泡中。在有些植物花瓣表皮細胞壁中也檢測到黃酮類化合物的存在[4]。

2?色素的主要類型

迄今為止，根據(jù)色素的化學結構、細胞定位和生物化學合成途徑，可以把色素大致上分為三大類：類胡蘿卜素、類黃酮和生物堿。

2.1?類胡蘿卜素

類胡蘿卜素是自然界中分布最廣泛的色素，它又能分為胡蘿卜素和葉黃素兩大類。除了花，它們還存在于高等植物的果實、葉和根中。類胡蘿卜素一般表現(xiàn)出較為鮮艷的紅色、橙色和黃色，因為其主要吸收短波長的光[5]。在不同物種的花瓣中類胡蘿卜素的具體成分并不相同，在桂花中淡黃色花瓣含有少量β-胡蘿卜素，金黃色花瓣中葉黃素含量高，橙紅色花瓣中α-胡蘿卜素和β-胡蘿卜素含量較高[6];萬壽菊和黃色菊花的花瓣中只含有葉黃素[7-8];蓮花中含量較高的是紫黃質和玉米黃質[9];文心蘭黃色花瓣中的主要成分是反式紫黃素和9-順式紫黃素[10];藏紅花花瓣中色素的主要成分是玉米黃素、β-胡蘿卜素和ζ-胡蘿卜素[11]。

2.2?類黃酮

黃酮類化合物是一大類次生代謝物，廣泛存在于植物體內。一般來說，所有含有2-苯基色酮核結構的物質都可以稱為黃酮類化合物，也簡稱為類黃酮。類黃酮是最重要的色素類群，它產(chǎn)生的顏色范圍最廣，從淡黃色到藍紫色，是各種觀賞植物花瓣中最重要的色素之一，在菊花[12]、大麗花[13]、月季[14]、紫羅蘭[15]、芍藥[16-19]等物種中都已被報道是主要色素。在黃酮類化合物中，主要有紅色系、純黃系2種顏色系列。其中紅色系主要包括花青素，它能調控的顏色從粉紅色到藍紫色;其他黃酮類化合物主要屬于純黃系列，如深黃色的查爾酮和極光酮，淡黃色或近乎無色的黃酮和黃酮醇等。相同物種的不同顏色的花瓣中，黃酮類化合物的組成也可能有很大差異，如白色菊花中僅含有黃酮和黃酮醇，而粉紅色菊花中主要含有花青素、黃酮和黃酮醇[20]。

2.3?生物堿

生物堿是一類含氮的堿性有機物，主要包括甜菜堿、罌粟堿和小檗堿等。其中，甜菜堿是一種水溶性氮化合物，主要存在于紅色甜菜和一些植物的花、果、根、葉中。迄今為止，甜菜堿僅在石竹目植物中被檢測到，而且甜菜堿和花青素是不共存的[21-22]。甜菜青素和甜菜黃素的含量和比例可以決定花色是紅色、黃色還是中間色[22-23]。

3?花青素和花色

在三大類色素中，黃酮類化合物可以產(chǎn)生從淡黃色到藍紫色的全光譜顏色?；ㄇ嗨匾彩屈S酮類化合物的主要組成，表現(xiàn)出從粉紅色到藍紫色的廣泛的顏色，在植物的花色形成過程中起著不可替代的作用。目前已知的花青素有100多種[24]，其中有6種花青素在植物中比較常見，即天竺葵花青素、矢車菊花青素、飛燕草花青素、芍藥花青素、牽牛花花青素和錦葵花青素。芍藥花青素是由矢車菊花青素合成產(chǎn)生的，牽?；ɑㄇ嗨睾湾\葵花青素由飛燕草花青素合成而來的。因此，天葵花青素、矢車菊花青素和飛燕草花青素是3種最主要的花青素[25]。

由于花青素在植物中不能穩(wěn)定的單獨存在，它們可以與糖類以糖苷鍵結合，以花色苷的形式存在。可以結合形成花色苷的糖基主要有葡萄糖、鼠李糖、木糖、半乳糖和阿拉伯糖，以及由他們組成的二糖或三糖，最常見的是3-單葡萄糖苷、5-二葡萄糖苷、3，5-二糖苷和3，7-二糖苷[26]。

花色苷是一種糖苷，由花青素和各種糖自然形成。它們穩(wěn)定地定位在植物器官中，已有研究表明，顏色差異與花色苷含量有關，Kazuma等[27]對白色、藍色等蝶豆花花瓣中的花色苷含量進行了測定，發(fā)現(xiàn)花色苷的差異是各種顏色產(chǎn)生的重要原因。在銀杏[28]、豬籠草[29]等植物的花中均有類似報道。相同花青素結合的糖苷類型不同也會導致花色的差異，在睡蓮中，被檢測到的飛草花青素3-半乳糖苷（Dp3Ga）呈紅色，而飛草花青素3′-半乳糖苷（Dp3′Ga）呈藍色[30]。

3.1?花青素的生物合成及關鍵基因

花青素在植物中的生物合成途徑及關鍵基因已有過詳細報道[31]，其生物合成可以分為3個階段，初始合成底物是苯丙氨酸（圖1）。第1階段是苯丙氨酸解氨酶（PAL）、肉桂酸-4-羥化酶（C4H）和4-香豆酸輔酶A連接酶（4CL）催化苯丙氨酸轉化為香豆酸輔酶A。第2階段是1個香豆酸輔酶A分子和3個丙二酰輔酶A分子先后在查爾酮合酶（CHS）、查爾酮異構酶（CHI）、黃烷酮-3-羥化酶（F3H）、類黃酮3′-羥化酶（F3′H）和類黃酮3′5′-羥化酶（F3′5′H）的催化作用下生成二氫黃酮醇。第3階段是二氫黃酮醇4-還原酶（DFR）和花青素合成酶（ANS）催化二氫黃酮醇合成各種類型的花青素，然后進一步在類黃酮葡萄糖基轉移酶（UFGT）和甲基轉移酶（MT）的作用下通過一系列的糖基化和甲基化步驟進行修飾，與UDP-葡萄糖結合形成穩(wěn)定的花色苷。

CHS是植物花青素生物合成的第1個關鍵基因，在花色苷的合成和積累過程中起著重要作用。已有研究表明，CHS普遍存在于陸地植物、藻類植物中[32]。CHS在矮牽牛[33]、蝴蝶蘭[34]和芍藥[19]等觀賞植物中都已被鑒定出來。該基因家族的蛋白質序列在不同的物種中高度保守，相似性高達80%～90%[35]。在矮牽牛中轉入CHS1基因可以使其花色由白色變?yōu)榉奂t色[36]，而在煙草中過表達海棠的CHS基因可以促進花青素的積累得到深紅色花瓣[37]。

CHI是植物花青素生物合成過程中的第2個關鍵基因，它能催化查爾酮的異構化。查爾酮在CHI蛋白的作用下被修飾成黃烷酮。植物中的CHI蛋白根據(jù)其可催化的底物可以分為兩類：①以6′-羥基查爾酮為底物，②6′-羥基查爾酮和6′-脫氧查爾酮為底物[38]。無論是哪種類型，CHI的表達會影響植物的類黃酮代謝水平，從而影響花色的發(fā)育。已有研究在康乃馨、紫錐花、仙客來和煙草等植物中發(fā)現(xiàn)CHI表達量的減少會導致花瓣中查爾酮的大量積累，使花瓣顏色變黃[39]。

F3H蛋白可以催化黃烷酮C3位羥基化生成二氫黃酮醇，它是類黃酮生物合成途徑分支點上的關鍵酶。該基因經(jīng)常與CHS和CHI共同調控并催化下游產(chǎn)物的形成[40]。該基因在肉桂[41]、雪蓮[42]和芍藥[19]等物種中已被克隆。

DFR是植物花青素生物合成途徑中的另一個關鍵基因，在花色發(fā)育中起著重要作用。DFR蛋白能將二氫楊梅素類黃酮、二氫槲皮素和二氫山奈酚3種類型的二氫黃酮醇還原為相應的無色花青素，然后在下游基因修飾下合成各種花青素[43]。由于DFR表達的差異及其底物特異性會導致花色的變異，因此DFR對花色發(fā)育的調控機制一直是一個熱點。在亞洲百合[44]、龍膽[45]、芍藥[19]和雪蓮[46]等觀賞植物中均已鑒定到了DFR基因。在牡丹中發(fā)現(xiàn)DFR在花色苷積累較多的花瓣中表達量最高[19]。這些研究表明，DFR對花色發(fā)育的調控作用可能發(fā)生在轉錄水平。

ANS是花青素生物合成過程的另一個關鍵基因。該基因在Fe2+和2-氧化戊二酸作用下催化亮氨酸花青素轉化為有色花青素[47]。前人研究表明，ANS在許多植物中由一個小的基因家族編碼，該家族已在連翹、非洲菊[48]和芍藥[19]等物種中被鑒定出來。ANS基因的缺失會導致連翹花瓣中花青素的減少[49]，藤本花中也發(fā)現(xiàn)該基因能調控花瓣顏色變化[50]。

3.2?轉錄因子調控花青素合成

除了花青素生物合成途徑中的結構基因外，許多轉錄因子已被報道可以通過調節(jié)結構基因的表達來調控花色的形成[51]。目前，已知的參與花色形成的轉錄因子主要有三大類：MYB、bHLH和WD40[52]，三者主要通過形成MBW復合體來調控結構基因的表達，MYB轉錄因子是MBW復合體中的主要決定因子[53-54]。在MYB的3個亞型中，R2R3-MYB和R3-MYB型的轉錄因子通常被認為與花青素的代謝和調控密切相關[55-56]。

3.2.1?R2R3-MYB類型轉錄因子與花青素合成。

已有研究表明，有些R2R3-MYB轉錄因子對花青素合成途徑的結構基因有促進作用，而有些R2R3-MYB轉錄因子抑制花青素合成途徑基因的表達[57]。在非洲菊中，GhMYB10能促進花色苷的合成[58]。龍膽花GtMYB3基因的突變會引起花色漂白[59]，百合中LhMYB6和LhMYB12能正調控花青素的生物合成[60]。金魚草中首次鑒定到了抑制花青素合成的R2R3-MYB轉錄因子AmMYB308[61]。隨后，草莓中FaMYB1[62]和FcMYB1[63]、矮牽牛中PhMYB27[56]、葡萄中VvMYBC2-L1/3和VvMYB4-like[57]、桃中PpMYB17-20、蘋果中MdMYB16和MdMYB15L、楊樹中PtrMYB182和PtrMYB57、水仙中NtMYB2相繼被鑒定到負調控花青素的合成。

然而，R2R3-MYB負調控花青素生物合成的分子機制目前仍未完全闡明，根據(jù)已有研究，主要有兩類R2R3-MYB阻遏因子能抑制花青素的合成，一類是FaMYB1-like類型的轉錄因子，

這種類型的阻遏因子不能直接與靶基因的啟動子結合，因此自身不能抑制轉錄，它作為一個輔阻遏蛋白結合到MBW復合體中，以抑制通常由MBW激活復合體靶向的基因。目前已知的該類轉錄因子主要有PhMYB27、FaMYB1、VvMYBC2、MdMYB15L、PtrMYB182和MtMYB2[56]。另一類是AtMYB4-like型阻遏因子，通過與花青素途徑中許多結構基因的啟動子中的MYB基序結合，作為直接阻遏因子，導致該途徑的下調，它們通過其C末端結構域的基序來抑制轉錄。

3.2.2?R3-MYB轉錄因子與花青素合成。

除R2R3-MYB型轉錄因子外，擬南芥AtMYBL2和AtCPC、矮牽牛、龍膽GtMYB1R1和GtMYB1R9、楊樹PtrRML1、番茄SlMYBATV和SlTRY等R3-MYB型轉錄因子也能對花青素的合成產(chǎn)生負調控作用[56，64]。在酸漿草中，通過QTL定位的方式找到了一個調控花瓣花青素濃度的主效基因ROI1，也是R3-MYB轉錄因子[65]。還有報道發(fā)現(xiàn)，ILMYBL1基因與曼陀羅中花色素的消失有關。BoMYBL2-1序列的缺失會導致紫色甘藍變種的產(chǎn)生。所有這些研究表明，R3-MY型轉錄因子對花青素的生物合成也有調控作用。

與R2R3-MYB阻遏蛋白相比，R3-MYB阻遏蛋白在調節(jié)花青素生物合成中的作用機制更不明確[56]。目前僅知道CPC-like類型的R3-MYB抑制子可以與bHLH蛋白以競爭方式相互作用，阻止MBW復合體的形成，從而負向調節(jié)花青素的產(chǎn)生，擬南芥和矮牽牛等物種中已對此進行了證明[56]。

這些研究表明，正向和負向MYB調控因子之間表達水平的相互控制形成了一個復雜的調控環(huán)來調控花青素的生物合成[56]。轉錄激活因子會誘導抑制子的表達，抑制子的表達會抑制激活因子的表達，同時，抑制子還會對自身的表達產(chǎn)生抑制作用[64]。目前這種調控模式已在矮牽牛[56]、楊樹、葡萄、擬南芥等物種中被報道。

4?總結

植物的花色是多種因素共同作用的結果，前人已對色素的種類、成分、含量、生物合成途徑、關鍵基因以及相關調控基因進行了深入的研究，對許多觀賞植物花色差異的形成有了較為深入的認識。這些研究對植物花色、葉色等顏色差異的調控機制以及相關色素的合成代謝和積累的研究有重要作用，為觀賞植物花色發(fā)育與調控的研究、新品種的培育帶來了新的機遇和挑戰(zhàn)。

參考文獻

[1] QI Y Y，LOU Q，LI H B，et al.Anatomical and biochemical studies of bicolored flower development in Muscari latifolium[J].Protoplasma，2013，250（6）：1273-1281.

[2] SHOJI K，MIKI N，NAKAJIMA N，et al.Perianth bottomspecific blue color development in tulip cv.murasakizuisho requires ferric ions[J].Plant Cell Physiol，2007，48（2）：243-251.

[3] 戴思蘭，洪艷.基于花青素苷合成和呈色機理的觀賞植物花色改良分子育種[J].中國農(nóng)業(yè)科學，2016，49（3）：529-542.

[4] MARKHAM K R，RYAN K G，GOULD K S，et al.Cell wall sited flavonoids in lisianthus flower petals[J].Phytochemistry，2000，54（7）：681-687.

[5] CAMARA B.Carotenoids handbook[J].Plant science，2004，167（2）：387.

[6] HAN Y J，WANG X H，CHEN W C，et al.Differential expression of carotenoidrelated genes determines diversified carotenoid coloration in flower petal of Osmanthus fragrans[J].Tree Genet Genomes，2014，10（2）：329-338.

[7] MOEHS C P，TIAN L，OSTERYOUNG K W，et al.Analysis of carotenoid biosynthetic gene expression during marigold petal development[J].Plant Mol Biol，2001，45（3）：281-293.

[8] OHMIYA A，KISHIMOTO S，AIDA R，et al.Carotenoid cleavage dioxygenase（CmCCD4a）contributes to white color formation in chrysanthemum petals[J].Plant Physiol，2006，142（3）：1193-1201.

[9] SUZUKI S，NISHIHARA M，NAKATSUKA T，et al.Flower color alteration in Lotus japonicus by modification of the carotenoid biosynthetic pathway[J].Plant Cell Rep，2007，26（7）：951-959.

[10] HIEBER A D，MUDALIGEJAYAWICKRAMA R G，KUEHNLE A R.Color genes in the orchid Oncidium Gower Ramsey：Identification，expression，and potential genetic instability in an interspecific cross[J].Planta，2006，223（3）：521-531.

[11] CASTILLO R，F(xiàn)ERNNDEZ J A，GMEZGMEZ L.Implications of carotenoid biosynthetic genes in apocarotenoid formation during the stigma development of Crocus sativus and its closer relatives[J].Plant Physiol，2005，139（2）：674-689.

[12] CHEN S M，LI C H，ZHU X R，et al.The identification of flavonoids and the expression of genes of anthocyanin biosynthesis in the chrysanthemum flowers[J].Biol Plant，2012，56（3）：458-464.

[13] THILL J，MIOSIC S，AHMED R，et al.Le Rouge et le Noir：A decline in flavone formation correlates with the rare color of black dahlia（Dahlia variabilis hort.）flowers[J].BMC Plant Biol，2012，12：1-13.

[14] SCHMITZER V，VEBERIC R，OSTERC G，et al.Color and phenolic content changes during flower development in groundcover rose[J].J Am Soc Hortic Sci，2010，135（3）：195-202.

[15] TATSUZAWA F，SAITO N，TOKI K，et al.Flower colors and their anthocyanins in Matthiola incana cultivars（Brassicaceae）[J].J Jpn Soc Hortic Sci，2012，81（1）：91-100.

[16] ZHAO D Q，HAO Z J，TAO J.Effects of shade on plant growth and flower quality in the herbaceous peony（Paeonia lactiflora Pall.）[J].Plant Physiol Biochem，2012，61：187-196.

[17] ZHAO D Q，HAO Z J，WANG J，et al.Effects of pH in irrigation water on plant growth and flower quality in herbaceous peony（Paeonia lactiflora Pall.）[J].Sci Hortic，2013，154：45-53.

[18] ZHAO D Q，JIANG Y，NING C L，et al.Transcriptome sequencing of a chimaera reveals coordinated expression of anthocyanin biosynthetic genes mediating yellow formation in herbaceous peony（Paeonia lactiflora Pall.）[J].BMC Genomics，2014，15：1-17.

[19] ZHAO D Q，TAO J，HAN C X，et al.Flower color diversity revealed by differential expression of flavonoid biosynthetic genes and flavonoid accumulation in herbaceous peony（Paeonia lactiflora Pall.）[J].Mol Biol Rep，2012，39（12）：11263-11275.

[20] 陳建.非洲菊花瓣解剖結構及赤霉素處理對花色的影響研究[D].長沙：湖南農(nóng)業(yè)大學，2010.

[21] GANDAHERRERO F，GARCACARMONA F.Biosynthesis of betalains：Yellow and violet plant pigments[J].Trends Plant Sci，2013，18（6）：334-343.

[22] GANDAHERRERO F，GARCACARMONA F，ESCRIBANO J.Botany：Floral fluorescence effect[J].Nature，2005，437（7057）：334.

[23] FELKER P，STINTZING F C，MSSIG E，et al.Colour inheritance in cactus pear（Opuntia ficusindica）fruits[J].Ann Appl Biol，2008，152（3）：307-318.

[24] VEITCH N C，GRAYER R J.Flavonoids and their glycosides including anthocyanins[J].Nat Prod Rep，2008，25（3）：555-611.

[25] TANAKA Y，BRUGLIERA F，CHANDLER S.Recent progress of flower colour modification by biotechnology[J].Int J Mol Sci，2009，10（12）：5350-5369.

[26] 李巨秀，劉鄰渭，王海濱.食品化學[M].2版.鄭州：鄭州大學出版社，2017.

[27] KAZUMA K，NODA N，SUZUKI M.Flavonoid composition related to petal color in different lines of Clitoria ternatea[J].Phytochemistry，2003，64（6）：1133-1139.

[28] 孫衛(wèi)，李崇暉，王亮生，等.花青苷成分對瓜葉菊花色的影響[J].園藝學報，2009，36（12）：1775-1782.

[29] ZHENG Y J，TIAN L，LIU H T，et al.Sugars induce anthocyanin accumulation and flavanone 3hydroxylase expression in grape berries[J].Plant Growth Regul，2009，58（3）：251-260.

[30] ZHU M L，ZHENG X C，SHU Q Y，et al.Relationship between the composition of flavonoids and flower colors variation in tropical water lily（Nymphaea）cultivars[J].PLoS One，2012，7（4）：1-9.

[31] CHEYNIER V，COMTE G，DAVIES K M，et al.Plant phenolics：Recent advances on their biosynthesis，genetics，and ecophysiology[J].Plant Physiol Bioch，2013，72：1-20.

[32] SCHRDER J.A family of plantspecific polyketide synthases：Facts and predictions[J].Trends Plant Sci，1997，2（10）：373-378.

[33] MORGRET M L，HUANG G H，HUANG J K.DNA sequence analysis of three clones containing chalcone synthase gene of petunia hybrida[J].FASEB J，2005，19：303.

[34] HAN Y Y，MING F，WANG J W，et al.Cloning and characterization of a novel chalcone synthase gene from Phalaenopsis hybrida orchid flowers [J].Russ J Plant Physiol，2006，53（2）：223-230.

[35] BEERHUES L，ROBENEK H，WIERMANN R.Chalcone synthases from spinach（Spinacia oleracea L.）[J].Planta，1988，173（4）：544-553.

[36] SUN W，MENG X Y，LIANG L J，et al.Molecular and biochemical analysis of chalcone synthase from Freesia hybrid in flavonoid biosynthetic pathway[J].PLoS One，2015，10：1-18.

[37] TAI D Q，TIAN J，ZHANG J，et al.A Malus crabapple chalcone synthase gene，McCHS，regulates red petal color and flavonoid biosynthesis[J].PLoS One，2014，9（10）：1-15.

[38] CHMIEL E，STFELD R，WIERMANN R.Conversion of phloroglucinyltype chalcones by purified chalcone isomerase from Tulip anthers and from Cosmos petals[J].Biochem Physiol Pflanz，1983，178（2/3）：139-146.

[39] NISHIHARA M，NAKATSUKA T，YAMAMURA S.Flavonoid components and flower color change in transgenic tobacco plants by suppression of chalcone isomerase gene[J].FEBS Lett，2005，579（27）：6074-6078.

[40] OWENS D K，CROSBY K C，RUNAC J，et al.Biochemical and genetic characterization of Arabidopsis flavanone 3βhydroxylase[J].Plant Physiol Biochem，2008，46（10）：833-843.

[41] HU K，MENG L，HAN K T，et al.Isolation and expression analysis of key genes involved in anthocyanin biosynthesis of cineraria[J].Acta Hortic Sin，2009，36：1013-1022.

[42] JIN Z P，GROTEWOLD E，QU W Q，et al.Cloning and characterization of a flavanone 3hydroxylase gene from Saussurea medusa[J].DNA Seq，2005，16（2）：121-129.

[43] PETIT P，GRANIER T，DESTAINTOT B L，et al.Crystal structure of grape dihydroflavonol 4reductase，a key enzyme in flavonoid biosynthesis[J].J Mol Biol，2007，368（5）：1345-1357.

[44] NAKATSUKA A，IZUMI Y，YAMAGISHI M.Spatial and temporal expression of chalcone synthase and dihydroflavonol 4reductase genes in the Asiatic hybrid lily[J].Plant Sci，2003，166（4）：759-767.

[45] NAKATSUKA T，NISHIHARA M，MISHIBA K，et al.Temporal expression of flavonoid biosynthesisrelated genes regulates flower pigmentation in gentian plants[J].Plant Sci，2005，168：1309-1318.

[46] LI H H，QIU J，CHEN F D，et al.Molecular characterization and expression analysis of dihydroflavonol 4reductase（DFR）gene in Saussurea medusa[J].Mol Biol Rep，2012，39（3）：2991-2999.

[47] HELLER W，F(xiàn)ORKMANN G，BRITSCH L，et al.Enzymatic reduction of（+）dihydroflavonols to flavan3，4cisdiols with flower extracts from Matthiola incana and its role in anthocyanin biosynthesis[J].Planta，1985，165（2）：284-287.

[48] WELLMANN F，GRIESSER M，SCHWAB W，et al.Anthocyanidin synthase from Gerbera hybrida catalyzes the conversion of（+）catechin to cyanidin and a novel procyanidin[J].FEBS Lett，2006，580（6）：1642-1648.

[49] ROSATI C，CADIC A，DURON M，et al.Molecular characterization of the anthocyanidin synthase gene in Forsythia × intermedia reveals organspecific expression during flower development[J].Plant Sci，1999，149（1）：73-79.

[50] SHIMIZU K，OHNISHI N，MORIKAWA N，et al.A 94bp deletion of anthocyanidin synthase gene in acyanic flower lines of lisianthus [Eustoma grandiflorum（Raf.）Shinn.] [J].Journal of the Japanese society for horticultural science，2011，80（4）：434-442.

[51] XIE D Y，SHARMA S B，WRIGHT E，et al.Metabolic engineering of proanthocyanidins through coexpression of anthocyanidin reductase and the PAP1 MYB transcription factor[J].Plant J，2006，45（6）：895-907.

[52] RAMSAY N A，GLOVER B J.MYBbHLHWD40 protein complex and the evolution of cellular diversity[J].Trends Plant Sci，2005，10（2）：63-70.

[53] LAI B，LI X J，HU B，et al.LcMYB1 is a key determinant of differential anthocyanin accumulation among genotypes，tissues，developmental phases and ABA and light stimuli in Litchi chinensis[J].PLoS One，2014，9（1）：1-12.

[54] JIN W M，WANG H，LI M F，et al.The R2R3 MYB transcription factor PavMYB10.1 involves in anthocyanin biosynthesis and determines fruit skin colour in sweet cherry（Prunus avium?L.）[J].Plant biotechnology journal，2016，14（11）：2120-2133.

[55] DAVIES K M，ALBERT N W，SCHWINN K E.From landing lights to mimicry：The molecular regulation of flower colouration and mechanisms for pigmentation patterning[J].Functional plant biology，2012，39（8）：619-638.

[56] ALBERT N W，DAVIES K M，LEWIS D H，et al.A conserved network of transcriptional activators and repressors regulates anthocyanin pigmentation in eudicots[J].The plant cell，2014，26（3）：962-980.

[57] PREZDAZ J R，PREZDAZ J，MADRIDESPINOZA J，et al.New member of the R2R3MYB transcription factors family in grapevine suppresses the anthocyanin accumulation in the flowers of transgenic tobacco[J].Plant molecular biology，2016，90（1/2）：63-76.

[58] LAITINEN R A E，AINASOJA M，BROHOLM S K，et al.Identification of target genes for a MYBtype anthocyanin regulator in Gerbera hybrida[J].J Exp Bot，2008，59（13）：3691-3703.

[59] NAKATSUKA T，HARUTA K S，PITAKSUTHEEPONG C，et al.Identification and characterization of R2R3MYB and bHLH transcription factors regulating anthocyanin biosynthesis in gentian flowers[J].Plant Cell Physiol，2008，49（12）：1818-1829.

[60] YAMAGISHI M，SHIMOYAMADA Y，NAKATSUKA T，et al.Two R2R3MYB genes homologs of petunia AN2 regulate anthocyanin biosyntheses in flower tepals tepal spots and leaves of Asiatic hybrid lily[J].Plant Cell Physiol，2010，51（3）：463-474.

[61] TAMAGNONE L，MERIDA A，PARR A，et al.The AmMYB308 and AmMYB330 transcription factors from Antirrhinum regulate phenylpropanoid and lignin biosynthesis in transgenic tobacco[J].The plant cell，1998，10（2）：135-154.

[62] AHARONI A，DE VOS C H R，WEIN M，et al.The strawberry FaMYB1 transcription factor suppresses anthocyanin and flavonol accumulation in transgenic tobacco[J].The plant journal，2001，28（3）：319-332.

[63] SALVATIERRA A，PIMENTEL P，MOYALEN M A，et al.Increased accumulation of anthocyanins in Fragaria chiloensis fruits by transient suppression of FcMYB1 gene[J].Phytochemistry，2013，90：25-36.

[64] TOMINAGAWADA R，NUKUMIZU Y，WADA T.Tomato（Solanum lycopersicum）homologs of TRIPTYCHON（SlTRY）and GLABRA3（SlGL3）are involved in anthocyanin accumulation[J].Plant signaling & behavior，2013，8（7）：1-3.

[65] CAO X，QIU Z K，WANG X T，et al.A putative R3 MYB repressor is the candidate gene underlying atroviolacium，a locus for anthocyanin pigmentation in tomato fruit[J].Journal of experimental botany，2017，68（21/22）：5745-5758.