劉何春 姚小波 李楊 雷雪萍 王文峰

摘要 ：通過(guò)田間小區(qū)試驗(yàn)，開(kāi)展了6種病毒抑制劑對(duì)西藏青稞上大麥黃矮病防治效果的研究。采用帶毒蚜蟲(chóng)人工接種法，于青稞起身拔節(jié)期每株接種10～15頭帶毒麥長(zhǎng)管蚜，7 d后滅蚜，滅蚜后3 d噴施病毒抑制劑，在成株期出現(xiàn)黃矮病癥狀后調(diào)查病株率、病情指數(shù)、防治效果，以及長(zhǎng)勢(shì)和產(chǎn)量。結(jié)果表明，6種病毒抑制劑對(duì)青稞上大麥黃矮病有不同程度的防治效果，其中6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS和8%寧南霉素AS防治效果分別為65.38%、52.41%和50.11%;處理后的青稞有不同程度的增產(chǎn)，其中6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS和40%烯·羥·嗎啉胍SP處理增產(chǎn)率分別為78.44%、53.22%、27.42%。綜合本文結(jié)果表明，6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS對(duì)西藏大麥黃矮病有較好的防治效果和增產(chǎn)率。

關(guān)鍵詞 ：大麥黃矮病; 病毒抑制劑; 防效; 長(zhǎng)勢(shì); 產(chǎn)量

中圖分類(lèi)號(hào)： S 482.2; S 432.41

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2020184

Control efficacy of six plant virus inhibitors on barley yellow dwarf disease in Tibet

LIU Hechun1，2， YAO Xiaobo1，2*， LI Yang1，2， LEI Xueping1，2， WANG Wenfeng2，3

（1. Agriculture Research Institute， Tibet Academy of Agriculture and Animal Husbandry Sciences， Lhasa 850032， China; 2. Lhasa Crop Pest Scientific Observation and Experiment Station of Ministry of Agriculture and Rural Affairs， Lhasa 850032， China; 3. Institute of Agricultural Resources and Environment， Tibet Academy of Agriculture and Animal Husbandry Sciences， Lhasa 850032， China）

Abstract ：Control efficacy of six plant virus inhibitors on barley yellow dwarf disease of highland barley were evaluated in Tibet. The experiments were carried out to inoculate Barley yellow dwarf virus to the highland barley leaves at the stage of standing to jointing with viruliferous aphids （Sitobion miscanthi）. Each plant was inoculated with 10 to 15 viruliferous aphids. Aphids were killed with imidacloprid 10% WP seven days after inoculation， and all plants were sprayed three days later with plant virus inhibitors. Investigation of disease index， growth， and yield showed that six plant virus inhibitors have different degrees of control effect on barley yellow dwarf disease of highland barley. When treated by oligosaccharins·plant activator protein 6% WP， fungous proteoglycan 0.5% AS， and ningnanmycin 8% AS， the control efficacies on barley yellow dwarf disease were 65.38%， 52.41% and 50.11%， respectively. Compared with water treatment， the increase rate of barley yields were 78.44%， 53.22% and 27.42%， respectively， when treated by oligosaccharins·plant activator protein 6% WP， fungous proteoglycan 0.5% AS， and enadenine·oxyenadenine·moroxydine hydrochloride 40% SP. The above results indicate that oligosaccharins·plant activator protein 6% WP and fungous proteoglycan 0.5% AS have good control effect on barley yellow dwarf disease in Tibet.

Key words ：barley yellow dwarf disease; plant virus inhibitor; control efficacy; crop growth; grain yield

大麥黃矮?。╞arley yellow dwarf disease，BYD）是世界各地最重要且分布最廣泛的麥類(lèi)作物病毒病害，是包括大麥（青稞）、小麥和燕麥等作物在內(nèi)的多種禾谷類(lèi)作物的主要病害之一。作物感染黃矮病毒后，表現(xiàn)出植株矮縮、葉片黃化和有效分蘗減少等癥狀，從而導(dǎo)致減產(chǎn)[1]。

近年來(lái)，大麥黃矮病在西藏青稞上時(shí)有發(fā)生。2011年拉薩達(dá)孜縣、墨竹工卡縣的春青稞大麥黃矮病發(fā)病面積100余公頃，2016年曲水縣冬青稞‘冬青18發(fā)病面積70余公頃，發(fā)病田減產(chǎn)30%～50%[23]。大麥黃矮病造成了青稞嚴(yán)重減產(chǎn)，甚至絕收，且導(dǎo)致青稞產(chǎn)量與品質(zhì)不同程度下降，嚴(yán)重影響西藏青稞生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展[23]。目前西藏自治區(qū)主要通過(guò)適當(dāng)調(diào)整播期、施用化學(xué)農(nóng)藥防控傳毒介體麥蚜等措施進(jìn)行病害防治[2]。針對(duì)植物病毒還沒(méi)有特效藥，該病害的防治是生產(chǎn)上的一大難題。為防治大麥黃矮病，選育抗 BYDV 品種是最經(jīng)濟(jì)有效的方法，但栽培品種中抗病基因缺乏，常規(guī)育種周期長(zhǎng)，定向性差，易帶入不良性狀;化學(xué)防治也是控制大麥黃矮病的主要途徑之一，但主要以殺蟲(chóng)劑控制蚜蟲(chóng)為主，而蚜蟲(chóng)難以準(zhǔn)確預(yù)報(bào)[4]。

病毒抑制劑作用機(jī)理主要為抑制病毒侵染、復(fù)制和增殖、癥狀表達(dá)，也可能誘導(dǎo)寄主產(chǎn)生抗病性和促進(jìn)植株生長(zhǎng)。抑制劑種類(lèi)包括化學(xué)合成的具有抗植物病毒活性的化合物，以及植物源、微生物源、動(dòng)物源和植物激素類(lèi)抗病毒物質(zhì)[56]。

目前進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng)的病毒抑制劑有37種以上，用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的制劑有23個(gè)以上[7]，如鹽酸嗎啉胍類(lèi)、氨基酸衍生物類(lèi)、磺酸衍生物類(lèi)、三唑類(lèi)衍生物類(lèi)、三嗪類(lèi)衍生物類(lèi)和微生物源類(lèi)等[89]。這些制劑多見(jiàn)于其他植物病毒病的防治報(bào)道[914]，對(duì)大麥尤其是青稞上黃矮病防治效果的報(bào)道目前尚未見(jiàn)。為嘗試用病毒抑制劑防治青稞大麥黃矮病，本研究開(kāi)展了小區(qū)藥效試驗(yàn)，旨在為青稞上大麥黃矮病的防控篩選優(yōu)良藥劑。

1 材料與方法

1.1 供試材料

田間小區(qū)試驗(yàn)青稞品種為‘青稞喜拉22;室內(nèi)盆栽用于無(wú)毒蚜蟲(chóng)擴(kuò)繁、飼養(yǎng)的青稞品種為‘青稞藏青2000。滅蚜所用藥劑為10%吡蟲(chóng)啉可濕性粉劑（WP），山東恒利達(dá)生物科技有限公司產(chǎn)品。

供試病毒抑制劑：0.5%香菇多糖水劑（AS），青島東生藥業(yè)有限公司;8%寧南霉素水劑（AS），德強(qiáng)生物股份有限公司;6%寡糖·鏈蛋白可濕性粉劑（WP），中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所廊坊農(nóng)藥中試廠(chǎng);40%烯·羥·嗎啉胍可溶粉劑（SP），河北中保綠農(nóng)作物科技有限公司;0.5%氨基寡糖素水劑（AS），河北奧德植保藥業(yè)有限公司;30%毒氟·嗎啉胍可濕性粉劑（WP），廣西田園生化股份有限公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)置

小區(qū)試驗(yàn)選在農(nóng)業(yè)農(nóng)村部拉薩作物有害生物科學(xué)觀(guān)測(cè)試驗(yàn)站網(wǎng)室內(nèi)。試驗(yàn)地海拔3 650 m。各小區(qū)的肥水、田間管理嚴(yán)格一致，小區(qū)等行距、隨機(jī)區(qū)組排列。6種病毒抑制劑分別為6種處理，CK1為健康植株噴施清水對(duì)照，CK2為接種飼毒蚜并噴施清水對(duì)照，每處理3個(gè)小區(qū)重復(fù)，每個(gè)小區(qū)面積為9 m2，共24個(gè)小區(qū)。

1.2.2 帶毒蚜蟲(chóng)人工接種和病毒抑制劑噴施

采用水培青稞苗飼養(yǎng)麥蚜法獲得大量蟲(chóng)齡、大小一致的無(wú)毒麥長(zhǎng)管蚜Sitobion miscanthi（Fabricius）。采集感染大麥黃矮病毒GAV（BYDVGAV）的具有典型癥狀的青稞葉片，剪成1～2 cm小段，放入底部墊有保濕濾紙的培養(yǎng)皿中，投放饑餓24 h的無(wú)毒麥長(zhǎng)管蚜，蓋嚴(yán)，置于15℃培養(yǎng)箱，黑暗離體飼毒24～48 h后轉(zhuǎn)移到試驗(yàn)小區(qū)內(nèi)處于起身拔節(jié)期的青稞植株上，每株接種10～15頭帶毒麥長(zhǎng)管蚜。CK1罩網(wǎng)不接種蚜蟲(chóng)。接毒7 d后噴施10%吡蟲(chóng)啉WP（有效成分用量為300 g/hm2）滅蚜。滅蚜3 d后噴施6種病毒抑制劑和清水，每間隔7 d噴施1次，共3次。

1.2.3 調(diào)查方法

1.2.3.1 成株期出現(xiàn)典型黃矮癥狀后的病情調(diào)查

青稞成株期出現(xiàn)典型黃矮癥狀后，按NY/T3060.62016[15]計(jì)算病株率、病情指數(shù)和防治效果。

病株率=發(fā)病青稞株數(shù)/調(diào)查青稞總株數(shù)×100%;病情指數(shù)=Σ（各級(jí)病株數(shù)×各級(jí)代表值）/（調(diào)查總株數(shù)×最高級(jí)代表值）×100;防治效果=（對(duì)照病情指數(shù)-處理病情指數(shù)）/對(duì)照病情指數(shù)×100%。

1.2.3.2 6種病毒抑制劑處理對(duì)青稞長(zhǎng)勢(shì)和產(chǎn)量的影響調(diào)查

長(zhǎng)勢(shì)參數(shù)：收獲期采用5點(diǎn)取樣法，每點(diǎn)20株青稞，每小區(qū)共100株青稞，測(cè)量株高、穗長(zhǎng)和分蘗數(shù)。

產(chǎn)量參數(shù)：每小區(qū)隨機(jī)選取1 m2，收獲全部青稞麥穗，統(tǒng)計(jì)1 m2穗數(shù)、每穗粒數(shù)、千粒重及1 m2產(chǎn)量，并根據(jù)重復(fù)區(qū)組的千粒重折算每667 m2產(chǎn)量（折合產(chǎn)量）。折合產(chǎn)量（kg/666.7 m2）=1 m2 實(shí)際產(chǎn)量（g）×666.7/1 000;理論產(chǎn)量（kg/666.7 m2）=[1 m2穗數(shù)×每穗粒數(shù)×千粒重（g）×666.7]/1 000。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

采用Excel 2010對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理，SPSS 20.0 Oneway ANOVA模塊對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，采用Origin Pro 8.5作圖。統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)前，用KolmogorovSmirnov和Levene統(tǒng)計(jì)量分別檢驗(yàn)所有數(shù)據(jù)的正態(tài)性和方差同質(zhì)性，滿(mǎn)足方差齊性采用LSD多重比較，不滿(mǎn)足方差齊性采用GamesHowell多重比較法進(jìn)行分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同病毒抑制劑處理對(duì)青稞上大麥黃矮病的防治效果

不同病毒抑制劑處理對(duì)青稞上大麥黃矮病的防治效果如表2所示。不同處理之間病株率、病情指數(shù)均有極顯著差異（病株率F（6，14）=53.249，P<0.01;病情指數(shù)F（6，14）=54.981，P<0.01）。6種病毒抑制劑對(duì)青稞上大麥黃矮病的防治效果為27.06%～65.38%。其中6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS和8%寧南霉素AS防治效果突出，分別為65.38%、52.41%和50.11%。

2.2 不同病毒抑制劑處理對(duì)青稞長(zhǎng)勢(shì)的影響

健康植株噴施清水對(duì)照（CK1）與接種飼毒蚜并噴施清水對(duì)照（CK2）相比較，分蘗數(shù)差異極顯著，證實(shí)了大麥黃矮病毒危害使青稞有效分蘗減少;6種病毒抑制劑處理與接種飼毒蚜并噴施清水對(duì)照（CK2）相比，分蘗數(shù)極顯著增加，說(shuō)明噴施6種病毒抑制劑能夠有效降低大麥黃矮病毒造成的青稞分蘗數(shù)減少。

與接種飼毒蚜并噴施清水對(duì)照（CK2）相比，健康植株噴施清水對(duì)照（CK1）、6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS和30%毒氟·嗎啉胍WP株高差異極顯著，這3種病毒抑制對(duì)株高有促進(jìn)作用。

與接種飼毒蚜并噴施清水對(duì)照（CK2）相比，健康植株噴施清水對(duì)照（CK1）和6種病毒抑制劑處理的穗長(zhǎng)極顯著增加，說(shuō)明6種病毒抑制劑促進(jìn)了青稞穗長(zhǎng)增長(zhǎng)。

綜上，大麥黃矮病毒的侵染造成青稞分蘗數(shù)減少、株高降低、穗長(zhǎng)變短，但是噴施6種病毒抑制劑能增加分蘗數(shù)、增長(zhǎng)穗長(zhǎng)，噴施6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS、30%毒氟·嗎啉胍WP還能提高株高。

2.3 不同病毒抑制劑處理對(duì)青稞產(chǎn)量的影響

與接種飼毒蚜并噴施清水對(duì)照（CK2）對(duì)比，只有健康植株噴施清水對(duì)照（CK1）的穗粒數(shù)極其顯著增加。6種病毒抑制劑處理與接種飼毒蚜并噴施清水對(duì)照CK2差異不顯著，說(shuō)明6種病毒抑制劑對(duì)提高穗粒數(shù)作用不明顯。

6種病毒抑制劑對(duì)于穗頭數(shù)的影響不大。健康植株噴施清水對(duì)照（CK1）和接種飼毒蚜并噴施清水對(duì)照（CK2）穗頭數(shù)差異不顯著，說(shuō)明大麥黃矮病毒對(duì)穗頭的生成影響不大。

健康植株噴施清水處理組（CK1）的千粒重和6種病毒抑制劑處理及接種飼毒蚜并噴施清水的處理（CK2）差異極顯著，說(shuō)明噴施6種病毒抑制劑可提高青稞的千粒重。6種病毒抑制劑處理的青稞中，千粒重最高的6%寡糖·鏈蛋白WP顯著高于其他處理，千粒重最低的是30%毒氟·嗎啉胍WP。

6%寡糖鏈蛋白WP和0.5%香菇多糖AS處理，其1 m2實(shí)際產(chǎn)量顯著高于接種飼毒蚜并噴施清水的處理（CK2）;另外4種病毒抑制劑處理與CK2差異不顯著;說(shuō)明6%寡糖鏈蛋白WP和0.5%香菇多糖AS對(duì)青稞有增產(chǎn)作用。

綜上，6種藥劑處理對(duì)比接種飼毒蚜并噴施清水對(duì)照（CK2），穗粒數(shù)和穗頭數(shù)差異不顯著，千粒重差異極顯著，所噴施的6種病毒抑制劑是通過(guò)提高千粒重來(lái)增加理論產(chǎn)量的。

不同病毒抑制劑處理對(duì)青稞產(chǎn)量的影響如表3所示。接種飼毒蚜并噴施清水對(duì)照（CK2）與健康植株噴施清水對(duì)照（CK1）相比，減產(chǎn)率高達(dá)60.54%，說(shuō)明大麥黃矮病毒對(duì)青稞產(chǎn)量的影響較大。

穗粒數(shù)、穗頭數(shù)和千粒重為產(chǎn)量三因素，其中千粒重是決定理論產(chǎn)量的關(guān)鍵因素。通過(guò)對(duì)比千粒重、病株率等參數(shù)的差異顯著性，6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS兩種病毒抑制劑作為防治大麥黃矮病的藥劑效果較好。

3 結(jié)論與討論

通過(guò)千粒重、病株率等參數(shù)的差異顯著性，建議選用6%寡糖·鏈蛋白WP和0.5%香菇多糖AS這兩種病毒抑制劑作為防治大麥黃矮病的藥劑。

健康對(duì)照CK1，在嚴(yán)格一致的肥水、田間管理、取樣等條件下，1 m2實(shí)際產(chǎn)量及667 m2折合產(chǎn)量接近大田正常產(chǎn)量;而不噴藥感病對(duì)照CK2減產(chǎn)率達(dá)60.54%，說(shuō)明大麥黃矮病導(dǎo)致青稞明顯減產(chǎn)。

病毒抑制劑通過(guò)提高千粒重（籽粒飽滿(mǎn)度）、增加分蘗數(shù)、增長(zhǎng)穗長(zhǎng)、提高株高等一系列途徑減少黃矮病毒造成的減產(chǎn)，從另一方面講就是提高了產(chǎn)量。

病毒抑制劑對(duì)煙草花葉病[910]、小麥黃矮病[5，7，11]、番茄病毒病[12]等其他植物病毒病害[1314]的防治效果已有研究。張瓊芬[9]采用8%寧南霉素AS 1 600倍液、20%鹽酸嗎啉胍SP 600倍液、0.5% 氨基酸寡糖素AS 600倍液、20%嗎胍·乙酸銅WP 700倍液進(jìn)行煙草花葉病毒病田間藥效試驗(yàn)，結(jié)果表明20%嗎胍·乙酸銅WP 700倍液具有較好的防治效果。閆佳會(huì)等[11]曾在田間條件下研究了病毒抑制劑對(duì)小麥黃矮病的防治效果，結(jié)果表明，不同藥劑處理對(duì)小麥黃矮病均有一定的抑制作用，且小麥產(chǎn)量有不同程度的增加，并同樣得出了6%寡糖·鏈蛋白WP防效最高、增產(chǎn)效果最顯著。病毒抑制劑除了對(duì)小麥黃矮病和煙草花葉病效果較好外，對(duì)其他植物病毒病害也有較明顯的效果[1214]，而6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS相比其他藥劑，效果更為突出，可以作為未來(lái)防治大麥黃矮病的藥劑使用。

本研究中效果較好的2種藥劑6%寡糖·鏈蛋白WP和0.5%香菇多糖AS均為生物源制劑。6%寡糖·鏈蛋白WP包括3%氨基寡糖素、3%極細(xì)鏈格孢激活蛋白，作用方式為抑制病毒基因表達(dá)和病毒復(fù)制，同時(shí)通過(guò)細(xì)胞活化作用修復(fù)受害植株損傷，促根壯苗，增強(qiáng)作物的抗逆性;激發(fā)植物體內(nèi)基因表達(dá)，產(chǎn)生幾丁酶、葡聚糖酶及PR蛋白等物質(zhì)，誘導(dǎo)植物產(chǎn)生多重防御作用，提升自身抗病能力。0.5%香菇多糖AS起主要作用的成分系食用菌菌體代謝所產(chǎn)生的蛋白多糖，而真菌多糖、云芝多糖等多糖在相關(guān)研究中已經(jīng)證實(shí)對(duì)小麥黃矮病防治效果突出[1617]。6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS、0.5%氨基寡糖素AS，這些成分均為生物源成分農(nóng)藥，相比30%毒氟·嗎啉胍WP等化學(xué)成分農(nóng)藥，效果略佳。通過(guò)本試驗(yàn)推斷，化學(xué)農(nóng)藥阻斷病毒復(fù)制過(guò)程，對(duì)大麥黃矮病防治起到了一定的作用，但是生物農(nóng)藥中的生物源成分不僅能阻斷病毒復(fù)制傳播過(guò)程，還可作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)促根壯苗提升植株自身抵抗力，對(duì)大麥黃矮病的防治起到了更好的作用。上述推斷還需要進(jìn)一步的分子試驗(yàn)論證。

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（責(zé)任編輯：楊明麗）