黃若妃 陳天喜 呂靜平 夏靜瑤 徐琳琳

[摘要] 目的 探討2型糖尿?。═2DM）患者外周血可溶性白介素-2（sIL-2R）水平與糖尿病腎?。―N）的相關(guān)性。 方法 選取2018年9月至2019年7月在我院內(nèi)分泌科收治的T2DM患者327例，其中正常蛋白尿（NA）組190例、微量白蛋白尿（MA）組87例、大量白蛋白尿（OA）組50例。檢測并比較三組患者年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)（BMI）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、病程、外周血sIL-2R、血肌酐、腎小球?yàn)V過率（eGFR）、尿白蛋白/肌酐比值（UACR）水平差異。對比三組患者外周血可溶性白介素-2（sIL-2R）的水平差異，研究外周血可溶性白介素-2（sIL-2R）對糖尿病腎病的影響。 結(jié)果 血清sIL-2R在NA組、MA組及OA組中水平依次升高，組間比較及組內(nèi)兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P

[關(guān)鍵詞] 糖尿病腎病;可溶性IL-2受體;糖尿病;炎癥反應(yīng)

[中圖分類號] R587.1? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2021）03-0025-04

Correlation between serum soluble IL-2 receptor level and diabetic nephropathy in the patients with Type 2 diabetes mellitus

HUANG Ruofei? ?CHEN Tianxi? ?LYU Jingping? ?XIA Jingyao? ?XU Linlin

Department of Endocrinology， Yongkang First People′s Hospital in Zhejiang Province， Yongkang? ?321300， China

[Abstract] Objective To explore the correlation between soluble interleukin-2（sIL-2R） level in peripheral blood and diabetic nephropathy（DN） in the patients with Type 2 diabetes mellitus（T2DM）. Methods A total of 327 patients with T2DM admitted to and treated in Department of Endocrinology of our hospital from September 2018 to July 2019 were selected， including 190 patients in the normal albuminuria（NA） group， 87 patients in the microalbuminuria（MA） group and 50 patients in the massive albuminuria（OA） group. The differences among the three groups of patients were examined through the comparison of age， sex， body mass index（BMI）， glycosylated hemoglobin（HbA1c）， course of disease， sIL-2R in peripheral blood， serum creatinine， glomerular filtration rate（GFR）， urinary albumin/creatinine ratio（UACR） levels. The levels of soluble interleukin-2（sIL-2R） in peripheral blood of the three groups of patients were compared for the study of the effect of soluble interleukin-2（sIL-2R） in peripheral blood on DN. Results The level of serum sIL-2R in the NA group， MA group and OA group increased in turn， and the differences were all significant no matter among the groups or within each group（P<0.05 or P<0.01）. Multiple stepwise regression analysis showed that the course of disease and sIL-2R were independent influencing factors of ACR（P<0.01）. Conclusion The level of sIL-2R in peripheral blood is an independent influencing factor of DN，which further confirms that cellular immunity may participate in the occurrence and development of DN.

[Key words] Diabetic nephropathy; Soluble IL-2 receptor; Diabetes mellitus; Inflammatory reaction

糖尿病作為常見的慢性非傳染性疾病，其患病率、致殘率和病死率在慢性病中居第三位。我國患者人數(shù)已居全球首位，截止2011年初，我國18歲及以上人群樣本中，糖尿病發(fā)病率為11.6%，約有1.139億患者[1]。糖尿病腎?。―iabetic nephropathy，DN）是糖尿病常見并發(fā)癥，20%～40%的2型糖尿病患者最終會發(fā)展成糖尿病腎病，其主要特征為持續(xù)的蛋白尿、腎功能進(jìn)行性減退以及較高的心血管疾病發(fā)病率和死亡率[2]。美國數(shù)據(jù)庫研究顯示，糖尿病腎病的全因死亡率為31.1%，心血管死亡率為19.6%[3]。晚期糖基化終末產(chǎn)物（Advanced glycationend products，AGEs）導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)是糖尿病腎病的發(fā)生發(fā)展的重要機(jī)制[4]，但具體機(jī)制尚有待研究?；A(chǔ)研究顯示AGEs能促進(jìn)CD4+T細(xì)胞分化，加重炎癥反應(yīng)[5]。因此本研究推測CD4+T細(xì)胞參與了DN的發(fā)生發(fā)展。而CD4+T細(xì)胞的活化、炎癥反應(yīng)與外周血可溶性IL-2受體（sIL-2R）水平密切相關(guān)[6]。本研究通過比較2型糖尿?。═2DM）患者不同蛋白尿水平狀態(tài)下血清可溶性IL-2受體水平的變化，探討sIL-2R與DN的相關(guān)性及其可能的致病機(jī)制，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選取2018年9月至2019年7月永康市第一人民醫(yī)院內(nèi)分泌科收治的2型糖尿病患者327例。其中男195例，女132例，平均年齡（59.69±13.15）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)[7]：診斷標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)2017版中國2型糖尿病防治指南（采用WHO1999糖尿病診斷、糖代謝分類標(biāo)準(zhǔn)），入選對象對本研究有知情權(quán)并在同意書上簽字。排除標(biāo)準(zhǔn)[8-9]：其他腎病史、合并自身免疫疾病、免疫抑制狀態(tài)、惡性腫瘤、嚴(yán)重肝功能損傷、感染等其他可引起sIL-2R水平升高的疾病。依據(jù)尿白蛋白/肌酐比值（Albumin to creatinine ratio，ACR）將T2DM患者分成三組：ACR<30 mg/g Cr的正常白蛋白尿（NA）組;30 mg/g≤ACR≤300 mg/g Cr的微量白蛋白尿（MA）組;ACR>300 mg/g Cr的大量白蛋白尿（OA）組。其中正常蛋白尿（NA）組190例、微量白蛋白尿（MA）組87例、大量白蛋白尿（OA）組50例。本研究經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)且患者知情同意。各組研究對象一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。見表1。

1.2 方法

根據(jù)ACR將糖尿病患者分為三組，收集并記錄所有受試者的年齡、性別、BMI、病程、HbA1c、外周血sIL-2R、血肌酐、eGFR、尿白蛋白肌酐比值（UACR）等。

1.3 觀察指標(biāo)

收集T2DM患者的晨尿標(biāo)本及空腹靜脈血標(biāo)本。運(yùn)用免疫比濁法使用羅氏c701及其配套試劑測定尿白蛋白及尿肌酐，計(jì)算UACR。sIL-2R采用R&D公司安圖酶標(biāo)儀及其配套試劑，ELISA法檢測。HbA1c采用BIO-RAD糖化血紅蛋白測試系統(tǒng)（D-10 Hemog lobin A1c program）及其配套試劑，離子交換高壓液相法測定。血肌酐檢測采用Siemens ADVIA 2400全自動生化分析儀及其配套試劑，肌氨酸氧化酶法測定。操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。正態(tài)分布資料以（x±s）表示，偏態(tài)分布資料以[M（P25，P75）]表示。正態(tài)分布資料多組間比較用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)，率的比較采用χ2檢驗(yàn);偏態(tài)分布資料多組間比較采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)。組間兩兩比較用Nemenyi檢驗(yàn);變量間的關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析及多元逐步回歸分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 T2DM不同程度尿蛋白組一般資料及各指標(biāo)比較

病程（P=0.142）、BMI（P=0.525）、HbA1c（P=0.811）計(jì)量資料方差齊（P>0.05），呈正態(tài)分布，采用單因素方差分析;血肌酐（P=0.000）、UACR（P=0.000）、sIL-2R（P=0.000）、eGFR（P=0.000）計(jì)量資料方差不齊（P<0.05），呈偏態(tài)分布，采用非參數(shù)檢驗(yàn)。

NA組、MA組及OA組間性別、年齡、BMI、HbA1c比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。其余病程、血肌酐、UACR、sIL-2R、eGFR等指標(biāo)的組間比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與NA組比較，MA組的病程、血肌酐、UACR、sIL-2R均升高，eGFR降低（P<0.05）。與NA組比較，OA組的病程、血肌酐、UACR、sIL-2R均升高，eGFR降低（P<0.05）。與MA組比較，OA組的病程、血肌酐、UACR、sIL-2R均升高，eGFR降低（P<0.05）。見表2。

2.2 血清sIL-2R與其他指標(biāo)的相關(guān)性分析

Pearson相關(guān)分析顯示，T2DM中，sIL-2R與BMI無相關(guān)性（P>0.05）;與年齡、病程、HbA1c、血肌酐、UACR呈正相關(guān)（P<0.05或P<0.01）;與eGFR呈負(fù)相關(guān)（P<0.01）。見表3。

2.3 多元逐步回歸分析

以UACR為因變量，以年齡、病程、BMI、HbA1c、血肌酐、sIL-2R、eGFR為自變量，進(jìn)行多元逐步回歸分析，結(jié)果顯示，病程（B=31.961）、sIL-2R（B=1.173）是UACR的獨(dú)立影響因素（P<0.05）。見表4。

3 討論

DN作為糖尿病的常見并發(fā)癥，是造成患者死亡的主要原因。T2DM引起腎損害的發(fā)病機(jī)制和病因尚未完全闡明。目前認(rèn)為，其在遺傳因素的背景下和其他危險(xiǎn)因素共同作用導(dǎo)致發(fā)病，涉及多種可能的因素，包括遺傳因素、糖代謝紊亂、氧化應(yīng)激、血流動力學(xué)改變、微循環(huán)障礙、脂代謝異常、蛋白激酶c的激活、細(xì)胞免疫、慢性炎癥及炎癥細(xì)胞因子的參與等。這些影響因素中，細(xì)胞免疫及炎癥細(xì)胞因子的作用近來越來越受到研究者們的重視[10-12]。

CD4+T細(xì)胞又稱輔助性T細(xì)胞（T helper），在免疫調(diào)節(jié)中起著主要作用。Th細(xì)胞前體在抗原的刺激下，分化為中間階段的Th0細(xì)胞。在不同的微環(huán)境中，Th0細(xì)胞選擇性分化為Th1或Th2細(xì)胞。Th1細(xì)胞參與細(xì)胞免疫和遲發(fā)性超敏性炎癥反應(yīng)，Th2可輔助B細(xì)胞分化為抗體分泌細(xì)胞，參與體液免疫應(yīng)答[13]。多個(gè)臨床研究顯示Th1和Th2細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子與糖尿病腎病相關(guān)[14-15]。DN患者外周血中CD4+T細(xì)胞數(shù)量高于健康人群，CD8+T細(xì)胞數(shù)量低于健康人群，CD4+/CD8+比值高于糖尿病患者[16]，因此本研究推測CD4+T細(xì)胞的活化是糖尿病患者發(fā)生腎功能損傷的重要環(huán)節(jié)。

sIL-2R是T細(xì)胞活化的重要標(biāo)志。當(dāng)T細(xì)胞表面的T細(xì)胞受體被抗原活化時(shí)，體內(nèi)IL-2增多，IL-2可以正反饋使IL-2Rα鏈表達(dá)明顯增多。IL-2Rα鏈可從細(xì)胞膜上脫落進(jìn)入血清形成可溶性IL-2R（sIL-2R）。因此血清sIL-2R水平可用于T細(xì)胞活化和IL-2R鏈表達(dá)的替代標(biāo)志，可作為評價(jià)T細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥損傷在疾病發(fā)展中作用的指標(biāo)[17]。臨床研究顯示，外周血sIL-2R與炎癥反應(yīng)或自身免疫導(dǎo)致的腎功能損傷有較強(qiáng)的相關(guān)性。病例對照研究顯示，腎小球疾病患者血清sIL-2R水平較健康對照高，且sIL-2R水平與24 h肌酐清除率負(fù)相關(guān)[18]。隊(duì)列研究顯示，移植前sIL-2R水平與腎移植患者1年后腎功能相關(guān)[19]。橫斷面研究顯示，血漿sIL-2R水平與糖尿病腎病患者24 h尿蛋白正相關(guān)[20]。但是該研究樣本量太?。▋H12例），且未校正混雜因素。因此本研究選擇大樣本的研究來證實(shí)sIL-2R水平與DN的關(guān)系。本研究顯示2型糖尿病患者中，隨著sIL-2R的增加，尿白蛋白排泄量水平增高，sIL-2R水平與VACR正相關(guān)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。進(jìn)一步證實(shí)sIL-2R是糖尿病患者發(fā)生DN的風(fēng)險(xiǎn)因素，為DN高危人群篩查、早期干預(yù)，控制危險(xiǎn)因素提供臨床證據(jù)。

為了排除ACR的影響因素，本研究將所有可能影響ACR 的自變量均納入多元回歸方程，校正了年齡、BMI、HbAlc等影響因素后，發(fā)現(xiàn)病程、sIL-2R是UACR的獨(dú)立影響因素，在糖尿病腎病患者病情診斷以及病情進(jìn)展監(jiān)測中均具有較高的應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述，本研究通過sIL-2R與ACR之間的關(guān)系，進(jìn)一步證實(shí)細(xì)胞免疫參與DN的發(fā)生和發(fā)展，sIL-2R可用于高危人群篩查和提供治療靶點(diǎn)的理論依據(jù)。

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（收稿日期：2020-08-20）