天津市武清區(qū)中醫(yī)醫(yī)院 （天津 301700）

內(nèi)容提要： 白血病是一類造血干細(xì)胞惡性克隆性疾病?？寺⌒园籽〖?xì)胞因?yàn)樵鲋呈Э?、分化障礙、凋亡受阻等機(jī)制在骨髓和其他造血組織中大量增殖累積，并浸潤其他非造血組織和器官，同時(shí)抑制正常造血功能。血細(xì)胞分析儀又叫血液細(xì)胞分析儀、血球儀和血球計(jì)數(shù)儀，是醫(yī)院臨床檢驗(yàn)應(yīng)用非常廣泛的儀器之一。

臨床上常將白血病分為淋巴細(xì)胞白血病、髓細(xì)胞白血病、混合細(xì)胞白血病等。急慢性白血病病因較多，病毒、化學(xué)物質(zhì)、放射物質(zhì)、遺傳因素等都可導(dǎo)致患白血病[1]。血液分析儀用于檢測(cè)急慢性白血病主要是根據(jù)細(xì)胞獲取信號(hào)來識(shí)別，目前有光電式、電容式、電阻式、離心式和激光散射式等五種[2]。本文主要從血液分析儀發(fā)展、應(yīng)用于檢驗(yàn)急慢性白血病的作用等價(jià)格方面著重分析。

1.血液分析儀的發(fā)展歷程

20世紀(jì)初期，莫爾德蘭首次采用光電器對(duì)血細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)；1947年拉格克蘭茨開始將高效光電倍增管加上光電掃描技術(shù)及暗視野照明法進(jìn)行血液檢測(cè)分析，克服了莫爾德蘭光電法中存在的問題，證明了該方法可試用于臨床；1958年，庫爾特在前人的基礎(chǔ)上，采用電阻率變化與電子技術(shù)相結(jié)合的方法，研制出性能比較穩(wěn)定、操作比較方便的血液分析儀，取名為庫爾特電子血球計(jì)數(shù)器[3]。20世紀(jì)60年代，以庫爾特原理為基礎(chǔ)的各種類型血液分析儀應(yīng)運(yùn)而生并開始廣泛應(yīng)用到醫(yī)院臨床檢驗(yàn)中，逐步替代了傳統(tǒng)的顯微鏡常規(guī)操作。70年代，在庫爾特原理上開發(fā)出了以激光鞘流技術(shù)為基礎(chǔ)的各類血液分析儀[4]。80年代初又推出了雙通道儀器，除可直接計(jì)數(shù)血小板外，還能得到淋巴細(xì)胞總數(shù)和百分?jǐn)?shù)等14個(gè)參數(shù)。90年代以來，越來越多的學(xué)者根據(jù)幼稚細(xì)胞和成熟細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)差異進(jìn)行細(xì)胞分類，特別是對(duì)幼稚細(xì)胞的檢測(cè)，為血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀開創(chuàng)了新的領(lǐng)域[5]。

2.血液分析儀檢測(cè)急慢性白血病的檢測(cè)方法

2.1 電導(dǎo)、激光散射法

激光散射法又被稱為體積、電導(dǎo)、激光散射法是Beckman-coultr公司研發(fā)并生產(chǎn)的血細(xì)胞分析儀的一種檢測(cè)方法，用經(jīng)典物理學(xué)對(duì)自然原始狀態(tài)下的細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)和多參數(shù)分析，然后得到相關(guān)信息[5]。在檢測(cè)之前，需要先在標(biāo)本細(xì)胞中加入紅細(xì)胞溶血?jiǎng)⒓t細(xì)胞溶解掉，然后再加入適量穩(wěn)定劑來中和掉多余的紅細(xì)胞溶解劑，始終保持細(xì)胞表面、細(xì)胞漿和細(xì)胞體積的穩(wěn)定，然后應(yīng)用鞘流技術(shù)將標(biāo)本細(xì)胞運(yùn)送到計(jì)數(shù)池中，用血液分析儀進(jìn)行檢測(cè)[6]。體積測(cè)量法是庫爾特專利技術(shù)，在測(cè)量中應(yīng)用低頻電流能夠準(zhǔn)確分析細(xì)胞體積，可以有效對(duì)淋巴細(xì)胞和單核進(jìn)行識(shí)別。高頻電導(dǎo)測(cè)量法采用高平電磁探針遠(yuǎn)離測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的差異對(duì)細(xì)胞進(jìn)行識(shí)別，當(dāng)高頻電流通過具有導(dǎo)電性的細(xì)胞膜時(shí)，細(xì)胞核可使電流的傳導(dǎo)性發(fā)生改變，根據(jù)電流的變化量就可以得到細(xì)胞的信息，主要用于檢測(cè)急慢性白血病中淋巴細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞。激光散射測(cè)量法采用氦氖激光源發(fā)出的激光對(duì)細(xì)胞進(jìn)行逐一掃描，激光穿過細(xì)胞時(shí)，能夠探測(cè)到細(xì)胞核內(nèi)的狀況，區(qū)分出不同顆粒特性的細(xì)胞群體，一般用于區(qū)分粒細(xì)胞的嗜中性、嗜酸性和嗜堿性[6]。

2.2 電阻抗、頻射與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)

這項(xiàng)檢測(cè)方法共應(yīng)用了四個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)，需要將標(biāo)本細(xì)胞進(jìn)行特殊染色處理，然后再應(yīng)用RF會(huì)讓DC技術(shù)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分類和技術(shù)。嗜酸性粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)是利用電阻抗的方式，在血液與嗜酸性粒細(xì)胞技術(shù)溶血?jiǎng)┗旌虾?，特異的溶血?jiǎng)?huì)讓嗜酸性粒細(xì)胞以外的其他細(xì)胞被溶解[7]。嗜堿性粒細(xì)胞系統(tǒng)也利用了相同的原理對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)。淋巴、單核、粒細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)采用電阻抗和射頻聯(lián)合檢測(cè)的方式，采用能夠直達(dá)細(xì)胞質(zhì)的脈沖信號(hào)，能夠準(zhǔn)確探測(cè)到細(xì)胞核的大小和顆粒數(shù)量，淋巴細(xì)胞自身在大小、質(zhì)量、形態(tài)和密度等方面的差異，所以這一檢測(cè)方法的結(jié)果十分精確[8]。優(yōu)質(zhì)細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)也利用了電阻抗方式，利用幼稚細(xì)胞上的脂質(zhì)細(xì)胞成熟少，在細(xì)胞混懸液中加入硫氨酸，這樣能保證成熟細(xì)胞被溶解，而幼稚細(xì)胞完整保留。

2.3 激光散射和細(xì)胞化學(xué)染色

主要有過氧化酶和嗜堿細(xì)胞兩個(gè)檢測(cè)通道，過氧化酶主要存在于粒細(xì)胞和單核細(xì)胞中，并隨著細(xì)胞的成熟而逐漸增多，中性粒細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)強(qiáng)陽性反應(yīng)，嗜酸性粒細(xì)胞有很強(qiáng)的過氧化酶反應(yīng)，而嗜堿性粒細(xì)胞呈現(xiàn)陰性反應(yīng)，因此，可以根據(jù)淋巴細(xì)胞、幼稚紅細(xì)胞和巨核細(xì)胞的陰性反應(yīng)來進(jìn)行檢測(cè)[9]。

2.4 多角度偏振光激光散射技術(shù)

多角度偏振光激光散射技術(shù)是將標(biāo)本細(xì)胞用鞘流液按比例進(jìn)行稀釋，由于嗜堿性粒細(xì)胞具有吸濕性特點(diǎn)，所以內(nèi)部結(jié)構(gòu)會(huì)有輕微變化，當(dāng)紅細(xì)胞內(nèi)部滲透壓變高時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白就會(huì)分離出來，鞘流液的水分進(jìn)入紅細(xì)胞，然后通過激光束進(jìn)行照射，細(xì)胞的各個(gè)方向都會(huì)出現(xiàn)散射光，從而獲取到相關(guān)信息[10]。

3.分類結(jié)構(gòu)

3.1 分類

按自動(dòng)化程度血液分析儀又被分為半自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀、血細(xì)胞分析工作站和血細(xì)胞分析流水線。按檢測(cè)原理分為電阻型、激光型和綜合型。電阻型血液分析儀因?yàn)樽陨聿僮骱?jiǎn)捷、快速、價(jià)格相對(duì)便宜并且分析參數(shù)較多，能夠得到很多對(duì)臨床診斷和史料的信息，所以在國內(nèi)被廣泛應(yīng)用到急慢性白血病的檢測(cè)中。激光型血液分析儀的穩(wěn)定性比電阻型更好，不容易受到場(chǎng)外和電場(chǎng)因素的干擾，局限性就是價(jià)格相對(duì)較高，且激光管的壽命十分短。綜合型血液分析儀是多種先進(jìn)細(xì)胞分析技術(shù)的綜合運(yùn)用，對(duì)血細(xì)胞的參數(shù)更多，結(jié)果也更加準(zhǔn)確，但是價(jià)格十分昂貴，目前在國內(nèi)臨床血液檢查應(yīng)用比較困難，但是綜合型血液分析儀的優(yōu)秀性能代表了血液分析儀的發(fā)展趨勢(shì)，為血液分析儀的進(jìn)一步發(fā)展做出了貢獻(xiàn)。

3.2 結(jié)構(gòu)

各類型的血細(xì)胞分析因?yàn)槭褂玫臋z測(cè)原理和檢測(cè)技術(shù)不同，所以結(jié)構(gòu)各不相同，但都涉及到機(jī)械系統(tǒng)、電學(xué)系統(tǒng)、血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)、血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)和控制系統(tǒng)等。

4.血液分析儀在臨床應(yīng)用的注意事項(xiàng)

血液分析儀在臨床檢驗(yàn)急慢性白血病細(xì)胞時(shí)，為了保證檢測(cè)結(jié)果能夠真實(shí)地反映出患者的病情，必須要嚴(yán)格按照相關(guān)規(guī)定和標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行，一旦出錯(cuò)，就會(huì)使檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)偏差，影響到臨床診斷和后續(xù)治療，甚至對(duì)患者的生命造成危害。①在進(jìn)行血樣采集時(shí)要采用成分最穩(wěn)定、準(zhǔn)確度高的靜脈血，且不能使用第一滴血，不能過度擠壓局部，避免血樣中滲入組織液影響采集結(jié)果，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)誤差。②在使用抗凝劑時(shí)不能使用草酸鹽、肝素和枸櫞酸鹽等常規(guī)抗凝劑，容易影響細(xì)胞形態(tài)和血小板數(shù)量，而是采用國際上通用的EDTA-2K抗凝劑。③對(duì)于采集到的血樣要用塞子密封，且保存時(shí)間不能超過6h。④稀釋器等一起要經(jīng)過校準(zhǔn)才能使用，血液稀釋后要快速檢測(cè)，否則會(huì)引發(fā)稀釋性溶血。⑤進(jìn)行檢測(cè)前要混勻。⑥所有的溶血?jiǎng)⑾♂寗┖颓逑磩┒家涮资褂?，不能亂用。

5.小結(jié)

白血病作為癌癥，也具有無限制異常增生的特點(diǎn)，因此，白血病就是異常的癌細(xì)胞即白血病細(xì)胞在骨髓等造血組織中進(jìn)行性地、失去控制地?zé)o限制異常增生，又由造血組織漫布到血液和全身各種臟器，損害這些系統(tǒng)器官的功能，對(duì)人的身心健康造成了極大危害，因此，及早檢測(cè)，然后配合相關(guān)的治療對(duì)病情的恢復(fù)有極大的好處。血液分析儀在檢測(cè)急慢性白血病中，能夠?qū)Π准?xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白水平、CRP水平等重要指標(biāo)進(jìn)行精確快速的檢測(cè)，是目前檢測(cè)白血病病情進(jìn)展的最佳方法，已被廣泛應(yīng)用于國內(nèi)外臨床檢驗(yàn)上。隨著科學(xué)技術(shù)和醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展，希望未來可以有更加科學(xué)、精確、快速且成本較低的綜合型血液分析儀被應(yīng)用到急慢性白血病檢測(cè)中來，幫助患者早日恢復(fù)病情。