石 琳，李冰鵠，張廣梅，趙協(xié)慧，王樹(shù)林，陳湘宏，劉占厚，吳 萍

（青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院 西寧 810001）

張仲景在《傷寒雜病論》首提六經(jīng)辨證論治體系，在六經(jīng)病學(xué)說(shuō)中，陽(yáng)明病隸屬于里證、實(shí)證，主要指病邪客于胃腸或邪氣源于胃腸的里實(shí)證?！秱摗?80條：“陽(yáng)明之為病，胃家實(shí)也?！蔽讣?，包括足陽(yáng)明胃以及手陽(yáng)明大腸?！鹅`樞·本輸》謂：“大腸、小腸皆屬于胃?！睂?shí)乃邪氣實(shí)。陽(yáng)明胃腑為水谷之海，多氣多血，陽(yáng)明病易從燥化、熱化。陽(yáng)明病主要以胃腸燥、熱、實(shí)為病變特征，當(dāng)燥熱之邪與胃腸宿滯相搏，結(jié)成燥屎，以致腸道不通，而見(jiàn)腹?jié)M硬痛、不大便，甚或譫語(yǔ)、潮熱等，形成陽(yáng)明腑實(shí)證。研究表明，陽(yáng)明腑實(shí)證時(shí)存在嚴(yán)重的腸道屏障功能受損[1]，出現(xiàn)腸源性內(nèi)毒素血癥（Intestinal endotoxemia，IETM）和腸道菌群移位，兩者作為誘發(fā)因子誘使機(jī)體炎癥反應(yīng)失控，進(jìn)而表達(dá)、產(chǎn)生、釋放大量炎癥介質(zhì)[2-4]。

張仲景《傷寒論》提出的“欲解時(shí)”[5]概念是中醫(yī)天人相應(yīng)思想的進(jìn)一步發(fā)展。傷寒論193 條：“陽(yáng)明病，欲解時(shí)，從申至戌上?！闭J(rèn)為申至戌時(shí)正是太陽(yáng)西下，陽(yáng)氣衰減之時(shí)，人體熱邪順應(yīng)陽(yáng)氣衰減而下消，若加上正確有效的治療，有利于陽(yáng)明熱邪外出，使病情發(fā)展趨于向好的時(shí)刻。大承氣湯出自張仲景的《傷寒雜病論》，具有竣下熱結(jié)之功，是瀉法的代表方劑[6]，也是治療陽(yáng)明腑實(shí)證的主要方劑。研究表明，大承氣湯具有降低炎性細(xì)胞因子、抑制血清內(nèi)毒素、抗炎、提高機(jī)體免疫力等藥理作用，對(duì)重要組織臟器具有保護(hù)作用[7]。目前六經(jīng)病“欲解時(shí)”相關(guān)研究較少，本研究以陽(yáng)明腑實(shí)證模型大鼠為研究對(duì)象，觀察陽(yáng)明病“欲解時(shí)”（酉時(shí)）及其對(duì)時(shí)（卯時(shí)）TNF-α 含量的變化及大承氣湯干預(yù)效果，為臨床擇時(shí)治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

SPF 級(jí)SD 大鼠290 只，體質(zhì)量（178 ± 23）g，雌雄各半，由西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供（許可證號(hào)：SCXK（陜）2017-003）。

1.1.2 試劑與儀器

TNF-α 酶聯(lián)免疫試劑盒（美國(guó)云克隆生物研究所提供）。常規(guī)手術(shù)器械；超純水純化儀（Milli-Q，美國(guó)默克密理博有限公司）；DCNSG 多功能提取濃縮機(jī)組（上海達(dá)程實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）；TDL5M 低速冷凍離心機(jī)；RT-2100 酶標(biāo)儀與洗板機(jī)（深圳雷杜公司）；PY-2型恒溫箱（上海公私合營(yíng)國(guó)光醫(yī)化儀器廠）。

1.2 方法

1.2.1 分組

分籠適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周后，隨機(jī)分為正常組90 只、模型組100只，大承氣湯組100只。

1.2.2 藥物制備

①造模熱藥液：根據(jù)實(shí)驗(yàn)大鼠體質(zhì)量按每只20 g·kg-1體質(zhì)量計(jì)算總藥量，附子、肉桂、干姜以1:1:1量（購(gòu)于青海省新綠洲藥業(yè)有限公司，由青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系鑒定），加水浸泡30 min，水煎2 次（40 min/次），每次煎完用雙層清潔紗布過(guò)濾藥汁，將兩次煎液合并，加熱濃縮至含生藥量2 g·mL-1，4℃冰箱保存?zhèn)溆?。用時(shí)將藥液加熱至37℃。②糞便混懸液：收集大鼠自身糞便磨碎，置于蒸餾水中，配制成10%混懸液。③注射用LPS 制備：大腸桿菌LPS 使用前以1.6 g·L-1濃度溶于滅菌去離子水中。④大承氣湯液：芒硝、大黃、枳實(shí)、厚樸以3∶4∶5∶5 比例，枳實(shí)、厚樸加水浸泡30 min，水煎40 min 取汁，入大黃，水煎（2 - 3）min 取汁，入芒硝溶化，雙層清潔紗布過(guò)濾，加熱濃縮至2 g·mL-1，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.3 模型復(fù)制及給藥方法

參照樊新榮等[8]造模方法，建立陽(yáng)明腑實(shí)證動(dòng)物模型。

實(shí)驗(yàn)第1-12天：模型組、大承氣湯組大鼠每天按每只20 g·kg-1劑量灌熱藥液，正常組灌等量蒸餾水，每5 天稱重1 次以調(diào)整藥量，連續(xù)灌胃12 天。第13-14天：禁食不禁水12 h 后，模型組、大承氣湯組大鼠給予自身糞便混懸液灌胃，2 mL/只，正常組灌等量蒸餾水，2 次/日，連續(xù)2 天。第15 日：正常組、模型組、大承氣湯組再次隨機(jī)分為欲解時(shí)組與非欲解時(shí)組，模型組、大承氣湯組欲解時(shí)組于當(dāng)日14:00、非欲解時(shí)組于次日凌晨2:00 予以5 mg·kg-1脂多糖腹腔注射，正常組欲解時(shí)組當(dāng)日14:00、非欲解時(shí)組次日凌晨2:00大鼠腹腔注射生理鹽水。

模型判定：①大鼠進(jìn)食量較少，行動(dòng)遲慢，精神萎靡不振，體質(zhì)量略有下降，掙扎無(wú)力，排便干結(jié)且次數(shù)減少，偶有成硬球；②體溫先降低后升高。同時(shí)具備2個(gè)條件提示造模成功。造模成功后，非欲解時(shí)和欲解時(shí)大承氣湯組于每日5:00、17:00 予以大承氣湯2 mL·100 g-1灌胃，正常組和模型組灌等量蒸餾水，2 次/日。觀察大承氣湯組大鼠肛周污物明顯增加，瀉下稀溏樣便后分別在陽(yáng)明病欲解時(shí)中心時(shí)（酉時(shí)）17:00-19:00隨機(jī)取欲解時(shí)模型組、大承氣湯組大鼠10 只，正常組大鼠9只，陽(yáng)明病欲解時(shí)中心時(shí)對(duì)時(shí)（卯時(shí)）5:00-7:00隨機(jī)取非欲解時(shí)模型組、大承氣湯組大鼠10 只，正常組大鼠9只，剪斷大鼠頸部將其斷頭處死，將老鼠規(guī)定在鼠板上，逐層分離下腹部，截取小腸中段組織，預(yù)冷的生理鹽水漂洗干凈，注射器沖洗腸管內(nèi)部，稱取0.1 g 腸組織塊數(shù)段，收集于凍存管中，-80℃冰箱保存制備組織勻漿。連續(xù)取材5天。

1.2.4 效應(yīng)指標(biāo)及檢測(cè)方法

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋、加樣與測(cè)定根據(jù)試劑使用說(shuō)明書(shū)的要求，配置大鼠TNF-α 標(biāo)準(zhǔn)溶液，并在板孔內(nèi)稀釋為不同濃度梯度，復(fù)孔制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。設(shè)空白和質(zhì)控復(fù)孔，空白孔加100μL 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，余孔加大鼠組織勻漿100μL，酶標(biāo)板覆膜，37℃溫育1 h。棄去液體甩干后每孔加檢測(cè)溶液A 工作液100 μL（臨用前配制），酶標(biāo)板覆膜，37℃溫育1 h。棄去孔內(nèi)液體，每孔用350 μL 的洗滌液洗滌，浸泡（1-2）min，重復(fù)洗板3次。每孔加檢測(cè)溶液B 工作液（臨用前配制）100μL，酶標(biāo)板覆膜，37℃溫育30 min。棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5 次。每孔加TMB 底物溶液90μL，酶標(biāo)板覆膜，37℃避光顯色。每孔加終止溶液50μL，終止反應(yīng)，確保酶標(biāo)板底無(wú)水滴及孔內(nèi)無(wú)氣泡后，立即用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度值。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，計(jì)量資料用±s表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較用單因素方差分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α= 0.05，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般情況

模型組、大承氣湯組大鼠給予12天熱藥灌胃后出現(xiàn)體質(zhì)量降低，豎毛，活動(dòng)增加，飲水量增加，尿量減少、發(fā)黃；給予自身糞便混懸液后出現(xiàn)排便時(shí)間延長(zhǎng)，大便干結(jié)，呈串珠、圓珠狀；腹腔注射脂多糖后，實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)食量減少，行動(dòng)遲慢，精神不佳，體質(zhì)量略有下降，排便次數(shù)減少，糞便干結(jié)，肛溫先降低后升高；大承氣湯組大鼠給予大承氣湯干預(yù)后精神狀態(tài)差，活動(dòng)減少，抓取時(shí)反應(yīng)較快，呼吸較為急促，飲食飲水量有所增加，大小便次數(shù)增多，且肛周污物明顯增加或大便稀溏。

2.2 實(shí)驗(yàn)大鼠各組TNF-α含量變化

結(jié)果顯示，模型組、大承氣湯組陽(yáng)明病非欲解時(shí)第4 天TNF-α 表達(dá)高于正常組（P＜0.01），欲解時(shí)第1-3 天TNF-α 表達(dá)均高于正常組（P＜0.01）。欲解時(shí)大承氣湯組第3、4 天TNF-α 表達(dá)與模型組比較有顯著性差異（P＜0.01）。模型組欲解時(shí)第1、2、3 天TNFα 表達(dá)高于非欲解時(shí)（P＜0.01），大承氣湯組第1、3 天TNF-α表達(dá)高于非欲解時(shí)（P＜0.01），第4天低于非欲解時(shí)（P＜0.05）（表1、表2）。

表1 陽(yáng)明病非欲解時(shí)各組TNF-a比較（pg·mL-1,±s）

表1 陽(yáng)明病非欲解時(shí)各組TNF-a比較（pg·mL-1,±s）

注：同一天同一時(shí)點(diǎn)與正常組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。

時(shí)間第1天第2天第3天第4天第5天陽(yáng)明病非欲解時(shí)（5-7時(shí)）正常組（N=9）129.79±0.218129.98±0.210129.56±0.056129.59±0.067130.13±0.146模型組（N=10）129.80±0.118129.97±0.138129.56±0.033129.88±0.120**130.15±0.260大承氣湯組（N=10）129.75±0.182130.10±0.082129.57±0.029129.94±0.254**130.07±0.301

表2 陽(yáng)明病欲解時(shí)各組TNF-a比較（pg·mL-1,±s）

表2 陽(yáng)明病欲解時(shí)各組TNF-a比較（pg·mL-1,±s）

注：同一天同一時(shí)點(diǎn)與正常組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；同一天同一時(shí)點(diǎn)與模型組比較，#P＜0.05，##P＜0.01；模型組同一天不同時(shí)點(diǎn)比較，△P＜0.05，△△P＜0.01；大承氣湯組同一天不同時(shí)點(diǎn)比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01。

時(shí)間第1天第2天第3天第4天第5天陽(yáng)明病欲解時(shí)（17-19時(shí)）正常組（N=9）129.94±0.278129.98±0.232129.61±0.084129.89±0.243130.07±0.178模型組（N=10）130.23±0.292**△△130.32±0.115**△△129.87±0.158**△△130.00±0.192130.09±0.209大承氣湯組（N=10）130.42±0.172**▲▲130.24±0.221**130.24±0.232**＃?！?29.71±0.078＃?！?30.05±0.116

2.3 實(shí)驗(yàn)大鼠各組TNF-α?xí)r間節(jié)律性變化

正常組TNF-α 表達(dá)與模型組、大承氣湯組相比呈低趨勢(shì)（P＜0.01）。模型組TNF-α 表達(dá)第2 天達(dá)到高峰，第3 天降至最低，之后趨于平穩(wěn)；欲解時(shí)TNF-α 表達(dá)高于非欲解時(shí)。大承氣湯組TNF-α 表達(dá)第1-3 天與模型組節(jié)律存在一致性，但其表達(dá)量高于模型組，第4 天明顯降低（P＜0.05），第5 天各組間趨于一致（圖1）。

圖1 實(shí)驗(yàn)大鼠各組第1-5天TNF-a節(jié)律變化

3 討論

《素問(wèn)·生氣通天論》曰：“故陽(yáng)氣者，一日而主外。平旦人氣生，日中而陽(yáng)氣隆，日西而陽(yáng)氣已虛，氣門(mén)乃閉?！比伺c自然、天地相參，人體陽(yáng)氣的盛衰變化、運(yùn)行規(guī)律與一天內(nèi)陽(yáng)氣變化大體一致。陽(yáng)明之氣旺于申酉戌時(shí)（15:00-21:00），這段時(shí)間是太陽(yáng)落山前后的6個(gè)小時(shí)，此時(shí)自然界中的陽(yáng)氣逐漸衰退，借助逐漸衰退的陽(yáng)氣，可使體內(nèi)之熱隨自然界陽(yáng)衰而逐漸減退，故言陽(yáng)明病于此時(shí)欲解。

陽(yáng)明腑實(shí)證是多種急性腹部疾病中出現(xiàn)的一種證候，如急性闌尾炎、急性膽道感染、腸梗阻等，陽(yáng)明腑實(shí)證能使腸道病變加重，嚴(yán)重時(shí)引起多器官功能衰竭等并發(fā)癥。現(xiàn)代研究表明陽(yáng)明腑實(shí)證的發(fā)生和內(nèi)毒素血癥密切相關(guān)。陽(yáng)明腑實(shí)證由于宿食積滯、燥屎內(nèi)結(jié)，腸道內(nèi)大量積氣，腸道壓力明顯升高[9]，同時(shí)腸道菌群失調(diào)，腸道黏膜屏障受損，腸道通透性明顯升高，腸道內(nèi)革蘭陰性菌死亡后細(xì)胞壁崩解或活菌釋出內(nèi)毒素，釋放入血形成腸源性內(nèi)毒素血癥[10]。大量?jī)?nèi)毒素（Endotoxin，ET）與細(xì)胞上的CD14 相結(jié)合，構(gòu)成LPS-CD14 受體，此受體作用于TLR4，進(jìn)而激活LPSTLR4/NF-κB 信號(hào)通路，通過(guò)MyD88 蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)，激活NF-κB，NF-κB 進(jìn)入細(xì)胞核，調(diào)控眾多炎性遞質(zhì)的基因表達(dá)，促進(jìn)TNF-α、IL-1β等細(xì)胞因子的表達(dá)[11]。該病乃危重急癥，如不及時(shí)干預(yù)，釋放入血的諸多炎癥介質(zhì)進(jìn)一步激活炎癥細(xì)胞通路，導(dǎo)致嚴(yán)重的組織損傷、功能破壞[12,13]，最終導(dǎo)致多器官功能障礙（Multiple organ dysfunction syndrome，MODS），甚至死亡。

TNF-α 是一類具有多種生物效應(yīng)的細(xì)胞因子，在信號(hào)傳導(dǎo)和介導(dǎo)T淋巴細(xì)胞增殖上發(fā)揮重要作用。研究表明，內(nèi)毒素與內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞等細(xì)胞膜上的受體相結(jié)合，激活核因子κB（NF-κB）信號(hào)通路，促進(jìn)一氧化氮（Nitric oxide，NO）、腫瘤壞死因子-a（Tumor necrosis factor，TNF-α）及白介素-1（Interleukin-1，IL-1）等大量炎性因子的分泌與釋放，誘發(fā)炎性級(jí)聯(lián)瀑布反應(yīng)，從而造成組織器官受損[14]。本實(shí)驗(yàn)中，總體來(lái)看，模型組大鼠TNF-α 表達(dá)較空白組高（P＜0.01），因?yàn)榇笫髾C(jī)體免疫調(diào)節(jié)是動(dòng)態(tài)過(guò)程，非欲解時(shí)模型組大鼠TNF-α 表達(dá)較低，隨后TNF-α 表達(dá)逐漸升高，至同一天欲解時(shí)模型組大鼠TNF-α 表達(dá)高于空白組（P＜0.01），說(shuō)明體內(nèi)處于炎癥反應(yīng)狀態(tài)。研究表明：TNFα 等細(xì)胞因子在受到LPS 或PHA 刺激后顯示晝夜波動(dòng)，與刺激后的增殖反應(yīng)與淋巴細(xì)胞數(shù)相對(duì)應(yīng)，淋巴細(xì)胞DNA 合成的晝夜節(jié)律亦呈雙峰型，第1 個(gè)峰值出現(xiàn)在8:00-10:00 時(shí)，第2 個(gè)在20:00-24:00 時(shí)，谷值位于4:00 時(shí)[15]。這和本實(shí)驗(yàn)TNF-α 表達(dá)的峰值、谷值相近?！秱摗分械牧?jīng)病“欲解時(shí)”簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，就是在某個(gè)時(shí)刻，該經(jīng)正氣旺盛，抗邪更加有力。從中醫(yī)角度來(lái)看，TNF-α 作為炎性因子，是邪氣的一種表現(xiàn)，TNF-α 高表達(dá)可從側(cè)面說(shuō)明機(jī)體正邪交爭(zhēng)之激烈，疾病可能相愈。本實(shí)驗(yàn)TNF-α 陽(yáng)明病欲解時(shí)與非欲解時(shí)的表達(dá)顯示出晝夜節(jié)律。尤在涇在《傷寒貫珠集》指出：“申酉戌時(shí)，日晡時(shí)也。陽(yáng)明潮熱，發(fā)于日晡，陽(yáng)明病解，亦于日晡。則申酉戌為陽(yáng)明之時(shí)。其病者，邪氣于是發(fā)。其解者，正氣于是復(fù)也?！盵16]說(shuō)明在陽(yáng)明欲解時(shí)TNF-α 的高表達(dá)，既是由于細(xì)胞因子大量釋放，炎癥風(fēng)暴的發(fā)生，造成機(jī)體損傷，使疾病迅速惡化的時(shí)期；但也是通過(guò)免疫功能的調(diào)動(dòng)，有利于疾病康復(fù)的時(shí)間。同時(shí)在陽(yáng)明腑實(shí)證5 天的觀察中發(fā)現(xiàn)，模型組TNF-α 表達(dá)在陽(yáng)明病第1 天上升，第2 天達(dá)到峰值，72 h 達(dá)到最低值，之后趨于平穩(wěn)，這與許翠萍[17]等人研究相似，在疾病急性期時(shí)TNF-α釋放增加。

大承氣湯是《傷寒論》中治療陽(yáng)明腑實(shí)證的代表方，由大黃、厚樸、枳實(shí)、芒硝四味藥組成，具有瀉下通里、竣下熱結(jié)的功效，主治大便不通、腹中轉(zhuǎn)矢氣、腹?jié)M疼痛、拒按、潮熱、手足截然汗出、脈遲有力。此時(shí)痞、滿、燥、實(shí)諸證具備，故以大承氣湯攻下。原文指出：“傷寒若吐若下后不解，不大便五六日，上至十余日，日晡所發(fā)潮熱，不惡寒，獨(dú)語(yǔ)如見(jiàn)鬼狀。若劇者，發(fā)則不識(shí)人，循衣摸床，惕而不安。微喘直視，脈弦者生，澀者死。微者，但發(fā)熱譫語(yǔ)者，大承氣湯主之?！毖芯勘砻?，具有下法的中藥能降低腸腔壓力，具有抗過(guò)氧化物損傷的作用，降低腸道內(nèi)壓力，改善腸壁循環(huán)，減輕過(guò)氧化物損傷，并對(duì)腸道屏障功能具有保護(hù)作用，有利于維持水、電解質(zhì)平衡[18]。君藥大黃可通過(guò)維持腸粘膜細(xì)胞的正常結(jié)構(gòu)、防止或修復(fù)腸粘膜萎縮及損傷、保護(hù)腸粘膜完整性[19-20]。大黃的瀉下作用和總蒽醌的成分有關(guān)，大黃蒽醌類成分是瀉下的有效成分[21]。芒硝、厚樸、枳實(shí)和大黃配伍，能顯著增加大黃中蒽醌類成分的溶出率[22]。芒硝的瀉下作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ)和與硫酸鈉密切相關(guān)[23]。芒硝所含的Na2SO 可使腸內(nèi)滲透壓升高，大量水分保留到腸腔，引起機(jī)械性刺激，導(dǎo)致排便。厚樸能緩解實(shí)驗(yàn)大鼠胃腸動(dòng)力障礙，促進(jìn)小腸推進(jìn)率[24]。厚樸的功效成分厚樸酚通過(guò)抑制氧化應(yīng)激減輕細(xì)菌脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）誘導(dǎo)的急性肺損傷（Acute lung injury，ALI），下調(diào)大鼠血清中TNF-α、IL-1β含量[25]。下調(diào)絲裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase，MAPK）信號(hào)通路c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）、p38 的磷酸化水平，下調(diào)NF-κB 信號(hào)通路中核因子κB 抑制因子α（IkBa）、p65 的磷酸化水平而有明顯的抗炎活性[26]。厚樸酚還有廣譜抗菌活性，對(duì)白色念珠菌、革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌具有抑制作用[27]。枳實(shí)苦降，善，破氣除痞，消導(dǎo)積滯。四藥合用，具有強(qiáng)大的蕩滌腸道、峻下熱結(jié)的功效。

研究表明，大承氣湯具有減輕機(jī)體炎癥反應(yīng)的作用[28-30]。季永欣[31]等研究大承氣湯能有效防治急危重癥患者腸功能障礙并改善臨床預(yù)后，其機(jī)制可能與調(diào)節(jié)TLR/MyD88/NF-κB-p65 信號(hào)通路過(guò)度激活及其下游炎癥因子（IL-1β/IL-6/IL-8/TNF-α）有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)給予大承氣湯干預(yù)后，非欲解時(shí)組間差異不明顯（P＞0.05），第4 天藥物組TNF-α 仍高表達(dá)，猜測(cè)可能此時(shí)藥物瀉下作用發(fā)揮不充分或和動(dòng)物免疫晝夜節(jié)律表達(dá)相關(guān)。整體上在非欲解時(shí)點(diǎn)，TNF-α 沒(méi)有較明顯下降趨勢(shì)（P＞0.05），第4 天仍是一個(gè)高表達(dá)狀態(tài)；欲解時(shí)藥物組前3 天TNF-α 升高，第3 天明顯高于模型組（P＜0.01），至第4 天明顯低于模型組（P＜0.01），第5天組間無(wú)差異。且藥物組1、3 天欲解時(shí)TNF-α 表達(dá)高于非欲解時(shí)（P＜0.01），第4 天低于非欲解時(shí)（P＜0.05），說(shuō)明1-3 天處于疾病急性期，機(jī)體受LPS 刺激后增殖反應(yīng)加劇，盡管給予藥物干預(yù)，但此時(shí)邪氣較為旺盛，正邪交爭(zhēng)劇烈，故欲解時(shí)TNF-α 高表達(dá)且高于模型組，第4 天機(jī)體正氣勝邪，故TNF-α 表達(dá)下降，尤以欲解時(shí)明顯（P＜0.05），此時(shí)機(jī)體借助藥物及自然界陽(yáng)氣變化而驅(qū)邪外出。本實(shí)驗(yàn)給予大承氣湯干預(yù)后，欲解時(shí)組TNF-α表達(dá)總體上有下降趨勢(shì)。

綜上所述，大承氣湯可抑制下游炎性因子TNF-α表達(dá)，且在欲解時(shí)給藥效果顯著。陽(yáng)明腑實(shí)證是一個(gè)臨床急性病，需要盡早干預(yù)。本實(shí)驗(yàn)初探了對(duì)于陽(yáng)明?。?yáng)明腑實(shí)證）的欲解時(shí)的時(shí)間治療學(xué)意義，利用陽(yáng)明病欲解時(shí)的有效時(shí)機(jī)，給予合理藥物干預(yù)，能促使疾病向好的方向變化。本實(shí)驗(yàn)選取了陽(yáng)明病欲解時(shí)中心時(shí)酉時(shí)（17:00-19:00）及其對(duì)時(shí)卯時(shí)（5:00-7:00）兩時(shí)點(diǎn)進(jìn)行研究，但陽(yáng)明病（陽(yáng)明腑實(shí)證）欲解時(shí)本身是一個(gè)時(shí)間段，其他時(shí)點(diǎn)的探究需進(jìn)一步挖掘。