俞永新，李玉華，賈麗麗

中國(guó)食品藥品檢定研究院，北京102629

流行性乙型腦炎（簡(jiǎn)稱(chēng)乙腦）是由乙腦病毒引起的一種人類(lèi)神經(jīng)系統(tǒng)疾病，由蚊蟲(chóng)傳播，主要在亞洲地區(qū)流行。據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）統(tǒng)計(jì)，全球每年有臨床癥狀的乙腦病例約5 萬(wàn)多例，病死率為20% ~30%，幸存者中30% ~ 50%有長(zhǎng)期的神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和后遺癥。預(yù)防乙腦的有效手段是接種乙腦疫苗。近年來(lái)，乙腦發(fā)病率大幅下降，基本得到控制，余向東［1］指出，主要原因是疫苗的大面積預(yù)防接種，特別是近20 年來(lái)乙腦減毒活疫苗的接種。

當(dāng)前全球廣泛應(yīng)用的乙腦疫苗有3 種：一種是由中國(guó)生產(chǎn)的SA14-14-2 株地鼠腎細(xì)胞制備的疫苗（簡(jiǎn)稱(chēng)乙腦減毒活疫苗），另兩種也均是基于SA14-14-2 株全病毒和部分基因制備的滅活疫苗（IC50）和乙腦 ／黃熱（JE ／YF）嵌合體活疫苗JE-CV（IMOJEV）。中國(guó)自主創(chuàng)新研制成功的SA14-14-2 株乙腦減毒活疫苗由國(guó)藥中生成都生物制品研究所有限責(zé)任公司（簡(jiǎn)稱(chēng)成都生物公司）生產(chǎn)，生產(chǎn)用SA14-14-2 株毒種是經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物非神經(jīng)組織多次交叉?zhèn)鞔鷾p毒及空斑試驗(yàn)10 多次篩選獲得的高度減毒株［2-4］。多種敏感動(dòng)物腦內(nèi)注射該病毒株不致病，其表型及基因型十分穩(wěn)定，免疫原性良好，能誘發(fā)較強(qiáng)的體液免疫和細(xì)胞免疫應(yīng)答［5-6］。另兩種疫苗均以SA14-14-2株病毒為基礎(chǔ)［7］，一種是法國(guó)巴斯德公司生產(chǎn)的乙腦 ／ 黃熱（JE ／ YF）嵌合體活疫苗 JE-CV（IMOJEV），該疫苗生產(chǎn)用毒種是將SA14-14-2 株具有免疫保護(hù)作用的關(guān)鍵蛋白基因片段（preM 和E）替換17D 黃熱病毒的相應(yīng)部位基因而產(chǎn)生的JE ／ YF 嵌合體病毒，以其作為生產(chǎn)用毒株在Vero 細(xì)胞中培養(yǎng)制成活疫苗，該疫苗已獲得WHO 的批準(zhǔn)，美國(guó)和其他西方國(guó)家也批準(zhǔn)應(yīng)用；另一種滅活疫苗的生產(chǎn)毒種是SA14-14-2 毒株在狗腎細(xì)胞中傳8 代，再經(jīng)Vero 細(xì)胞培養(yǎng)后，用甲醛滅活，加0.1%氫氧化鋁佐劑制成滅活疫苗，稱(chēng)為IC50 或IXIARO 疫苗，由奧地利Valneva 公司，以前的Intercell Biomedical Livingston UK生產(chǎn)，美國(guó)Novartis 公司分發(fā)，該疫苗常規(guī)免疫程序?yàn)? 針，間隔21 d，已在美國(guó)等10 多個(gè)西方國(guó)家批準(zhǔn)應(yīng)用［8］。本文對(duì)SA14-14-2 株乙腦減毒活疫苗自1989 年上市以來(lái)，在中國(guó)和其他亞洲地區(qū)的應(yīng)用現(xiàn)狀、安全性及發(fā)展趨勢(shì)作一概述。

1 SA14-14-2 株乙腦減毒活疫苗的應(yīng)用現(xiàn)狀

SA14-14-2 株乙腦減毒活疫苗在亞洲大規(guī)模應(yīng)用后，有效控制了乙腦在當(dāng)?shù)氐牧餍小?006 年，成都生物公司與美國(guó)帕斯適宜衛(wèi)生科技組織（Program for Appropriate Technology in Health，PATH）合作，啟動(dòng)乙腦疫苗WHO 預(yù)認(rèn)證項(xiàng)目，2013 年，成都生物公司乙腦減毒活疫苗獲得WHO 預(yù)認(rèn)證，成為中國(guó)具有參與聯(lián)合國(guó)機(jī)構(gòu)醫(yī)療采購(gòu)資格的第一個(gè)疫苗產(chǎn)品，目前已有12 個(gè)國(guó)家的5 億名兒童接種了成都生物公司的乙腦減毒活疫苗，保護(hù)了兒童免于乙腦導(dǎo)致的死亡或殘疾［9-11］。

美國(guó)疾控中心幾位著名專(zhuān)家發(fā)表文章稱(chēng)［12］，當(dāng)前全球有幾種乙腦疫苗可供選擇，但成都生物公司制備的乙腦減毒活疫苗已獲WHO 預(yù)認(rèn)證，并同時(shí)獲得全球疫苗和免疫聯(lián)盟（Global Alliance for Vaccines and Immunization，GAVI）的財(cái)政資助，因此，最利于低中收入國(guó)家乙腦疫苗的持久性免疫預(yù)防接種。

1.1 國(guó)內(nèi)應(yīng)用 該疫苗于1989 年上市并開(kāi)始在國(guó)內(nèi)應(yīng)用，2006 年納入國(guó)家免疫規(guī)劃中，在全國(guó)各省市全面接種，至今使用量已超過(guò)10 億劑，預(yù)防效果十分顯著，乙腦年發(fā)病率持續(xù)下降。據(jù)中國(guó)CDC 統(tǒng)計(jì)，2006 年乙腦納入免疫規(guī)劃后至2018 年，乙腦病例從2007 年的4 330 例下降至1 800 例，其中15 歲以下兒童從 2007 年的 3 752 例（1.50 ／ 10 萬(wàn)）下降至2018 年的 378 例（0.16 ／ 10 萬(wàn)），同期未免疫的 ≥40 歲成年人病例從 259 例（0.05 ／ 10 萬(wàn)）上升至1 153 例（0.18 ／ 10 萬(wàn)），在乙腦總發(fā)病例中，成年人比例從6.0%上升至64.0%［13-14］。貴州省是中國(guó)乙腦高發(fā)省份，2006 年將乙腦減毒活疫苗納入常規(guī)免疫和強(qiáng)化免疫后，全省乙腦發(fā)病率大幅下降，2019年全省乙腦發(fā)病率（0.06 ／ 10 萬(wàn)）較 2007 年（1.59 ／10 萬(wàn)）下降96%［15］。近年來(lái)，未免疫的成人乙腦病例在我國(guó)北方地區(qū)出現(xiàn)高發(fā)趨勢(shì)，2018 年北方11個(gè)省的乙腦病例為1 330 例，南方14 個(gè)省為470例，在乙腦總發(fā)病例中，成年人已成為乙腦發(fā)病的主要人群，并時(shí)有暴發(fā)流行［14］，國(guó)內(nèi)對(duì)乙腦的免疫預(yù)防不能松懈。

1.2 國(guó)外應(yīng)用 SA14-14-2 株乙腦減毒活疫苗于2002 年在韓國(guó)取得臨床觀察許可證，首次應(yīng)用于國(guó)外市場(chǎng)。1999 年，在尼泊爾對(duì)16 萬(wàn)1 ～16 歲兒童進(jìn)行了大規(guī)模接種（每人1 劑），結(jié)果顯示，在接種率高的地區(qū)乙腦確診病例僅49 人，接種率低的地區(qū)乙腦確診病例高達(dá)2 084 人，確診的住院患者（227例）中，無(wú)1 例有乙腦減毒活疫苗接種史，保護(hù)率達(dá)99.3%［16］，疫苗接種后第 2、5 年，保護(hù)率分別為98.5%和 96.2%［17］。2007 年，在印度對(duì) 930 萬(wàn) 1 ～15 齡兒童接種乙腦減毒活疫苗（每人1 劑），保護(hù)率為 94.5%［18］。2004 — 2014 年，在尼泊爾對(duì) 31 個(gè)大規(guī)模接種疫苗地區(qū)進(jìn)行評(píng)估，結(jié)果顯示，乙腦減毒活疫苗大規(guī)模接種后，乙腦確診病例發(fā)生率為0.7 ／10 萬(wàn)，較該地區(qū)未接種疫苗的預(yù)計(jì)病例發(fā)生率下降78%，避免了3 011 名兒童乙腦病例及9 497 例急性腦炎綜合征病例的發(fā)生，特別是在4 個(gè)高危地區(qū)，病例數(shù)下降尤為明顯，數(shù)據(jù)顯示，確診的乙腦病例和急性腦炎綜合征（acute encephalitis syndrome，AES）病例下降了 84%［19］。

2 SA14-14-2 株乙腦減毒活疫苗的安全性

2.1 國(guó)內(nèi)外應(yīng)用的安全性 在國(guó)內(nèi)，乙腦減毒活疫苗上市前，進(jìn)行了1 千多人的臨床觀察［20］，之后中國(guó)又進(jìn)行過(guò)兩次大規(guī)模有計(jì)劃有組織的免疫接種觀察：一次是1993 年在四川省成都市5 個(gè)地區(qū)，觀察人數(shù)達(dá)50 多萬(wàn)人［21］；一次是1998 年在湖北省，觀察了 6 萬(wàn)多名 1 ～ 10 歲兒童［22］。另外，1997 年由中美科學(xué)家合作，在四川省成都市對(duì)1 ～2 歲兒童接種組和對(duì)照組各1 萬(wàn)多名進(jìn)行了雙盲隨機(jī)觀察［23］。上述觀察結(jié)果均未發(fā)現(xiàn)因乙腦減毒活疫苗引起的腦炎相關(guān)病例。在國(guó)外，1999 年在尼泊爾對(duì)16 萬(wàn)1 ～ 16 歲兒童、2007 年在印度對(duì) 930 萬(wàn) 1 ～5 歲兒童、2012 年在斯里蘭卡對(duì)9 月齡兒童均接種1 針乙腦減毒活疫苗，均未發(fā)現(xiàn)與疫苗相關(guān)的乙腦病例［8，16，18］。自 1988 年以來(lái)，SA14-14-2 株乙腦減毒活疫苗已在不同國(guó)家進(jìn)行了10 多次有計(jì)劃的免疫接種安全性觀察，其中包括2014 年中國(guó)CDC 和廣東省的兩次大規(guī)模臨床觀察［24-25］，均未發(fā)現(xiàn)該疫苗引起的腦炎病例。2017 年，幾位國(guó)際知名專(zhuān)家對(duì)1995 — 2015 年10 年間在中國(guó)和亞洲不同國(guó)家的16 次大規(guī)模臨床安全性觀察資料進(jìn)行總結(jié)和分析評(píng)估，結(jié)果表明，自1988 年以來(lái)，SA14-14-2 株乙腦減毒活疫苗在全球發(fā)出了5 億劑，對(duì)8 月齡以上大范圍年齡人群均有良好的耐受性，并未發(fā)現(xiàn)接種乙腦減毒活疫苗后出現(xiàn)的個(gè)別嚴(yán)重不良反應(yīng)與疫苗有關(guān)的足夠證據(jù)。乙腦減毒活疫苗在中國(guó)和亞洲大規(guī)模應(yīng)用后，未發(fā)現(xiàn)與疫苗相關(guān)的腦炎確診病例［26］，其安全性也得到了WHO 的認(rèn)可。WHO 全球疫苗安全委員會(huì)（GlobalAdvisoryCommitteeonVaccine Safety，GACVS）曾多次召開(kāi)會(huì)議，探討乙腦減毒活疫苗的安全性試驗(yàn)資料，并確認(rèn)其具有可接受的大范圍安全性［27-28］。WHO 在一次討論會(huì)上根據(jù) GACVS 的多項(xiàng)報(bào)告，也認(rèn)為成都生物公司生產(chǎn)的乙腦減毒活疫苗具有可接受的大范圍安全性［29-30］。

2.2 地鼠腎細(xì)胞及SA14-14-2 株毒種的安全性

盡管乙腦減毒活疫苗的安全性和保護(hù)效果已被國(guó)內(nèi)外專(zhuān)家及WHO 肯定，但西方國(guó)家個(gè)別學(xué)者認(rèn)為SA14-14-2 株地鼠腎細(xì)胞疫苗是應(yīng)用動(dòng)物原代細(xì)胞生產(chǎn)的疫苗，可能存在外源病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)［31］，且病毒的神經(jīng)毒力存在回復(fù)突變的可能，有報(bào)道稱(chēng)，應(yīng)用地鼠腎細(xì)胞生產(chǎn)的疫苗尚未經(jīng)WHO 認(rèn)可［32］。

WHO 對(duì)中國(guó)的乙腦減毒活疫苗通過(guò)長(zhǎng)期調(diào)查及相關(guān)知名專(zhuān)家認(rèn)可后，于2002 和2003 年兩次在北京召開(kāi)WHO 生物制品標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)擴(kuò)大會(huì)議，邀請(qǐng)了國(guó)內(nèi)外生物制品知名專(zhuān)家，其中包括WHO生物制品標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)主任Petricciani 教授，WHO 生物制品質(zhì)量保證與安全部的Griffiths，WHO 疫苗與發(fā)展部的Pervikov，WHO 官員英國(guó)生物制品標(biāo)準(zhǔn)化與質(zhì)量控制部的Woods，美國(guó)FDA 生物制品評(píng)價(jià)與研發(fā)中心的Reeve，中國(guó)食品藥品檢定所所長(zhǎng)周海鈞等。主要討論中國(guó)SA14-14-2 減毒株的神經(jīng)毒力及用于疫苗生產(chǎn)的安全性和疫苗質(zhì)量的可控性等，以及地鼠腎細(xì)胞用于疫苗生產(chǎn)的安全性，最終認(rèn)可SA14-14-2 株毒種為疫苗生產(chǎn)用毒株，地鼠腎細(xì)胞為生產(chǎn)用細(xì)胞基質(zhì)以及質(zhì)量控制技術(shù)的有效性和可控性，制定了WHO 人用乙型腦炎減毒活疫苗生產(chǎn)和質(zhì)量控制指南（WHO Tech Rep Series 910，F(xiàn)irst report 2002）［33］。2012 年，WHO 又召開(kāi)會(huì)議進(jìn)行了補(bǔ)充修訂及肯定［34］。2013 年，WHO 專(zhuān)家組用 7年時(shí)間對(duì)成都生物公司的生產(chǎn)車(chē)間、SPF 地鼠質(zhì)控和標(biāo)準(zhǔn)以及生產(chǎn)工藝、質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)和臨床資料等進(jìn)行了全面檢查，結(jié)果均符合標(biāo)準(zhǔn)，2013 年獲得WHO的預(yù)認(rèn)證，專(zhuān)家組未提出應(yīng)用SPF 地鼠腎細(xì)胞生產(chǎn)的疫苗的不安全性。2015 年最新的一次WHO 會(huì)議再次肯定了SPF 地鼠腎細(xì)胞生產(chǎn)的減毒活疫苗的安全性［29-30］。

2.2.1 地鼠腎細(xì)胞 成都生物公司在中國(guó)首次成功建立了SPF 地鼠群用于疫苗生產(chǎn)，地鼠樣品包括地鼠血清、地鼠腎細(xì)胞，用地鼠腎細(xì)胞生產(chǎn)的疫苗樣品經(jīng)英國(guó)權(quán)威實(shí)驗(yàn)室Q-one biotech LTD 全面安全檢測(cè)，包括10 種小鼠病毒，18 種地鼠病毒，全部人、牛、豬病毒檢測(cè)，結(jié)果均為陰性，符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，特別是不含逆轉(zhuǎn)錄病毒［35］。

2.2.2 SA14-14-2 株毒種 個(gè)別學(xué)者對(duì)疫苗弱毒可能回復(fù)問(wèn)題的報(bào)道主要有以下3 點(diǎn)：①中國(guó)SA14-14-2株減毒活疫苗對(duì)小白鼠仍有致病性，高滴度病毒（PFU > 104）通過(guò)腦內(nèi)注射可引起小鼠發(fā)病死亡［36］；②SA14-14-2 株病毒基因序列均一性差，不同實(shí)驗(yàn)室測(cè)序的序列不完全一致［37］，因此認(rèn)為SA14-14-2株存在遺傳穩(wěn)定性差和神經(jīng)毒力返祖的危險(xiǎn)性；③SA14-14-2 株病毒疫苗安全有效，但仍存在可能弱毒回復(fù)為高毒力的理論上的危險(xiǎn)（theroretical risk），從而限制疫苗的全球使用［38］。經(jīng)查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，文章作者所用的SA14-14-2 病毒株為市售成都生物公司疫苗，病毒經(jīng)高度致癌的BHK21 細(xì)胞傳代后再注射小鼠，不能代表真正的SA14-14-2 原始病毒株，SA14-14-2 株病毒經(jīng)3 周齡幼鼠腦內(nèi)接種無(wú)致病性，除中國(guó)食品藥品檢定研究院蟲(chóng)媒病毒室（簡(jiǎn)稱(chēng)中檢院蟲(chóng)媒病毒室）多次實(shí)驗(yàn)證明外，國(guó)內(nèi)外很多不同實(shí)驗(yàn)室包括日本和美國(guó)等均有報(bào)道證實(shí)［39-40］。為進(jìn)一步證實(shí)，中檢院蟲(chóng)媒病毒室最近又用昆明瑞士種和ICR 兩種品系小鼠重復(fù)實(shí)驗(yàn)，均未發(fā)現(xiàn)小鼠致病。上述有關(guān)基因序列不一致的原因是不同實(shí)驗(yàn)室將SA14-14-2 株病毒通過(guò)不同種類(lèi)細(xì)胞傳代后測(cè)序的結(jié)果，不能代表SA14-14-2 原株序列。中檢院蟲(chóng)媒病毒室最近又重新對(duì)SA14-14-2 株原始毒種、主毒種和生產(chǎn)毒種進(jìn)行了全基因測(cè)序，結(jié)果3 個(gè)毒種序列一致，未發(fā)現(xiàn)不均一性［41］。另外，對(duì)疫苗生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的3 批成品疫苗病毒進(jìn)行全基因測(cè)序，也未發(fā)現(xiàn)其不均一性［42］。

有關(guān)SA14-14-2 株病毒弱毒特征的穩(wěn)定性是否可能回復(fù)突變而影響環(huán)境污染，有報(bào)道稱(chēng)，孕豬注射乙腦SA14-14-2 株減毒活疫苗后流產(chǎn)，說(shuō)明弱毒毒力的回復(fù)突變［43］。但從流產(chǎn)胎兒分離到的病毒，其表型和基因型仍保留SA14-14-2 株特征不變，即對(duì)乳鼠致病，而對(duì)幼鼠腦內(nèi)接種不致病，其核酸和氨基酸序列與SA14-14-2 株的同源性不變，分別為99.7%和99.6%［44］。表明SA14-14-2 株的弱毒穩(wěn)定，通過(guò)胎兒后的表型和基因型不變，引起流產(chǎn)是SA14-14-2株對(duì)乳動(dòng)物具有致病性的本身特征，而不是弱毒回復(fù)突變。中檢院蟲(chóng)媒病毒室最近將病毒通過(guò)蚊蟲(chóng)（胸內(nèi)）豬體（病毒血癥）蚊蟲(chóng)（胸內(nèi)）交叉?zhèn)鞔詈髲奈孟x(chóng)收集的病毒經(jīng)細(xì)胞傳代擴(kuò)增后進(jìn)行表型和基因型特性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，病毒對(duì)小鼠腦內(nèi)無(wú)致病性，全基因氨基酸序列與原SA14-14-2 株一致，表明病毒經(jīng)不同宿主反復(fù)交叉?zhèn)鞔淙醵咎卣饕埠芊€(wěn)定，未發(fā)生回復(fù)突變［45］。另外，楊會(huì)強(qiáng)等［46］從 3 批SA14-14-2 株減毒活疫苗中經(jīng)空斑純化出24 株（每批8株）病毒，對(duì)每株病毒包膜蛋白基因進(jìn)行測(cè)序并與SA14-14-2 原病毒株序列比對(duì)，結(jié)果顯示，核苷酸和氨基酸序列同源性分別為≥99.9%和≥98.8%，其中僅發(fā)現(xiàn)1 ~ 2 個(gè)氨基酸位點(diǎn)差異，差異位點(diǎn)未發(fā)生在與疫苗株毒力密切相關(guān)的8 個(gè)關(guān)鍵位點(diǎn)上。另外，中國(guó)農(nóng)業(yè)部已批準(zhǔn)將SA14-14-2 株用于生產(chǎn)預(yù)防豬感染乙腦的減毒活疫苗，已有多家企業(yè)投入生產(chǎn)，年產(chǎn)量達(dá)6 000 多萬(wàn)份，大量豬疫苗的應(yīng)用，未發(fā)現(xiàn)病毒傳播到自然環(huán)境，包括蚊子和動(dòng)物，表明SA14-14-2 株減毒活疫苗的弱毒穩(wěn)定，不會(huì)造成環(huán)境污染［47］。

SA14-14-2 株減毒活疫苗不可能發(fā)生毒力返祖的安全性還可通過(guò)10 億人接種未發(fā)生與疫苗相關(guān)病例證實(shí)，如與當(dāng)前西方國(guó)家普遍應(yīng)用的黃熱病17D 活疫苗相比，該疫苗病毒對(duì)小白鼠腦內(nèi)毒力可達(dá) 103LD50，猴體實(shí)驗(yàn)可允許死亡 1 ／ 10 只，而SA14-14-2 株均為0。17D 疫苗的臨床觀察已確認(rèn)嗜神經(jīng)疾病為（0.25 ~ 0.4）／ 10 萬(wàn)（北美國(guó)家）、1.1 ／ 10 萬(wàn)（巴西），嗜內(nèi)臟性為（0.3 ~ 0.4）／ 10 萬(wàn)，在 60 歲以上人群中為（1.4 ~ 1.8）／ 10 萬(wàn)［48］。

3 發(fā)展趨勢(shì)

3.1 增加SA14-14-2 減毒活疫苗的品種 以Vero細(xì)胞為基質(zhì)的SA14-14-2 株減毒活疫苗比法國(guó)巴斯德公司生產(chǎn)的僅含SA14-14-2 株部分基因（PrM 和E）的乙腦 ／ 黃熱（JE ／ YF）嵌合體活疫苗更有優(yōu)勢(shì)。首先，其免疫性?xún)?yōu)于乙腦 ／ 黃熱（JE ／ YF）嵌合體活疫苗，因?yàn)?SA14-14-2 株是全病毒，而 JE ／ YF 疫苗中僅含SA14-14-2 株的結(jié)構(gòu)蛋白（PrM 和E），缺乏乙腦病毒非結(jié)構(gòu)蛋白（NS），而目前普遍認(rèn)為黃病毒內(nèi)NS 蛋白是誘生細(xì)胞免疫保護(hù)作用的主要蛋白［49-50］。實(shí)驗(yàn)證明，SA14-14-2 疫苗免疫動(dòng)物能產(chǎn)生很強(qiáng)的細(xì)胞免疫和保護(hù)效果［3，51］。NS 蛋白中的 NS3 細(xì)胞免疫效果很強(qiáng)［52］，NS1 具有很強(qiáng)的免疫保護(hù)作用［53］。登革熱四價(jià)嵌合體疫苗（DEN ／ YF）即是以黃熱病毒（YFV）的非結(jié)構(gòu)蛋白為骨架組成的，其中缺乏DEN病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白，因此不能產(chǎn)生針對(duì)DEN 病毒的細(xì)胞免疫，而黃病毒間T 細(xì)胞交叉免疫又很弱［54］，記憶T 細(xì)胞在黃病毒疫苗中對(duì)保持疫苗免疫的持久性又特別重要［55］，因此，DEN ／ YF 四聯(lián)疫苗的免疫性不全面、不持久，導(dǎo)致若干年后產(chǎn)生抗體依賴(lài)性增強(qiáng)（antibody dependent enhancement，ADE）而難以進(jìn)一步擴(kuò)大應(yīng)用，其原因有關(guān)專(zhuān)家分析為缺乏NS的 T 細(xì)胞免疫應(yīng)答［49-50，56］和 NS1 抗體的免疫保護(hù)作用［57-59］。其次，在安全性方面，DEN ／ YF 嵌合體疫苗中的YF-17D 病毒曾發(fā)生過(guò)與黃熱疫苗相關(guān)的病例，而SA14-14-2 株減毒活疫苗免疫10 億人未發(fā)生與疫苗相關(guān)病例，因此，SA14-14-2 全病毒疫苗的安全性也優(yōu)于 JE ／ YF 疫苗。

與當(dāng)前西方國(guó)家廣泛應(yīng)用于旅游者的SA14-14-2 株 Vero 細(xì)胞滅活疫苗（IC50）相比，SA14-14-2 全病毒Vero 細(xì)胞活疫苗也具有更多優(yōu)點(diǎn)，如僅需注射1 針，減少了旅游者出發(fā)前等待時(shí)間，不含氫氧化鋁佐劑，減少了注射后局部副反應(yīng)；另外，中國(guó)具有應(yīng)用Vero 細(xì)胞生產(chǎn)多種疫苗的實(shí)際經(jīng)驗(yàn)，如狂犬病疫苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗、EV71 疫苗等，并可采用微載體培養(yǎng)技術(shù)大量生產(chǎn)，細(xì)胞培養(yǎng)純化技術(shù)已很成熟，如DNA 雜質(zhì)可降低至100 pg，低于WHO 的要求（10 ng）。另外，中國(guó)生產(chǎn)的Vero 細(xì)胞疫苗成本較低，有價(jià)格優(yōu)勢(shì)。因此，Vero 細(xì)胞SA14-14-2 株活疫苗比乙腦 ／ 黃熱（JE ／ YF）嵌合體活疫苗和 Vero 細(xì)胞滅活疫苗更安全、有效、價(jià)廉，具有全球推廣應(yīng)用的優(yōu)勢(shì)。

3.2 改進(jìn)和完善免疫程序 目前，已有12 個(gè)國(guó)家的6億兒童接種成都生物公司生產(chǎn)的地鼠腎細(xì)胞SA14-14-2 株減毒活疫苗，避免了數(shù)百萬(wàn)兒童的死亡和癱瘓。但在已接種疫苗的地區(qū)，疫苗接種還存在接種率低以及僅注射1 針免疫持久性不長(zhǎng)的問(wèn)題［60-61］。有報(bào)道表明，注射1 針抗體水平較低，加強(qiáng)注射1 劑，抗體水平有顯著提高，預(yù)計(jì)免疫持久性會(huì)更長(zhǎng)［62-64］，因此，通過(guò)加強(qiáng)注射來(lái)維持最大限度的持久性保護(hù)十分重要。乙腦減毒活疫苗在國(guó)外的免疫策略應(yīng)重新考慮與國(guó)內(nèi)接種2 針相同的方案。

3.3 擴(kuò)大疫苗的產(chǎn)量和應(yīng)用 在亞洲，一些尚未應(yīng)用中國(guó)乙腦減毒活疫苗的國(guó)家正在考慮申請(qǐng)資助和應(yīng)用，而已納入免疫規(guī)劃的國(guó)家，如采用2 針免疫程序和提高免疫覆蓋率，將大幅提高國(guó)外乙腦疫苗的需求量。而國(guó)內(nèi)近年來(lái)成年乙腦病例在我國(guó)北方地區(qū)出現(xiàn)高發(fā)趨勢(shì)，并時(shí)有暴發(fā)流行，已成為乙腦發(fā)病的主要人群，為我國(guó)乙腦防控提出了新的挑戰(zhàn)［14，65］。對(duì)成年人進(jìn)行乙腦疫苗免疫十分必要。因此，乙腦疫苗在全球的需求量將大幅增多。疫苗生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)擴(kuò)大生產(chǎn)地鼠腎細(xì)胞乙腦減毒活疫苗，另一方面應(yīng)盡快研制Vero 細(xì)胞SA14-14-2 株全病毒疫苗。

3.4 疫苗質(zhì)量提升 疫苗質(zhì)量應(yīng)進(jìn)一步提升，如去除疫苗保護(hù)劑中的明膠以及增加5 人份疫苗人白蛋白含量，以提高疫苗在熱帶地區(qū)的熱穩(wěn)定性等，進(jìn)一步提高疫苗的有效性和免疫持久性。

綜上所述，乙腦是自然疫源性疾病，大規(guī)模預(yù)防接種可有效控制發(fā)生地的乙腦流行。應(yīng)盡快研制Vero 細(xì)胞SA14-14-2 株乙腦全病毒疫苗，擴(kuò)大疫苗的國(guó)際市場(chǎng)，使中國(guó)首創(chuàng)的SA14-14-2 株乙腦減毒活疫苗能更好地服務(wù)于全球健康。