呂松杰,牛志剛,丁煜恭,何志鵬,司衣提·克熱木,黨 樂,陳 軍,史洪才,*
(1.新疆石河子大學動物科技學院,新疆 石河子832000;2.新疆畜牧科學院生物技術(shù)所,烏魯木齊830000;3.新疆五征綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司,新疆 麥蓋提縣844600;4.新疆喀什地區(qū)畜牧工作站,新疆 喀什844000;5.新疆維吾爾自治區(qū)畜牧總站,烏魯木齊830000)
多浪羊是新疆喀什地區(qū)主要的綿羊品種,具有體型大,生長速度快,肉產(chǎn)量高,屠宰性能良好等特點,特別是40~50 kg階段表現(xiàn)出眼肌面積大、肉色鮮紅、肌間脂肪含量高、多汁性好、嫩度理想等特性。多浪羊可以全年舍飼,能適應新疆南疆地區(qū)的夏季干燥炎熱的環(huán)境,抗病力強,耐粗飼,能四季發(fā)情,且具有早熟性,一般公羔在6~7月齡性成熟;母羔在6~8月齡可以初次配種,多浪羊是新疆優(yōu)良的地方品種[1-3]。
促卵泡素(FSH)是一種糖蛋白激素,促性腺激素釋放激素(GnRH)由下丘腦釋放,作用于垂體,垂體前葉的嗜堿性細胞合成和分泌[4]。與促黃體素(LH)協(xié)同促進卵泡發(fā)育,誘導排卵并將顆粒細胞轉(zhuǎn)變?yōu)辄S體細胞[5]。在發(fā)情前注射FSH,可以使將要退化的卵泡發(fā)育成熟,增加其排卵數(shù)[6],在綿羊生產(chǎn)上是常見的超數(shù)排卵藥物[7]。
大群體多浪羊一般一胎產(chǎn)一只羔羊,平均產(chǎn)羔率大約為107%,繁殖率較低。影響制約著規(guī)模化養(yǎng)殖場的經(jīng)濟效益,利用外源激素對多浪羊?qū)嵤┩诎l(fā)情處理和高效繁殖,從而可以提高繁殖效率,降低生產(chǎn)成本,增加養(yǎng)殖效益。孕酮+PMSG+PG的同期發(fā)情方法,可以達到很好的發(fā)情效果,F(xiàn)SH是一種超數(shù)排卵的常用藥物,較小劑量的FSH可以刺激少量卵泡同時發(fā)育排卵,產(chǎn)較多數(shù)量的羔羊。本課題組此前曾在多浪羊上注射100 IU FSH進行過試驗,產(chǎn)羔率達到178%,證明注射小劑量的FSH可以提高繁殖率,給養(yǎng)殖場帶來較好的經(jīng)濟效益,但是根據(jù)新疆喀什地區(qū)規(guī)?;B(yǎng)殖場實際經(jīng)濟效益測算情況,產(chǎn)羔率達到200%以上才有一定的盈利,因此本試驗在同期發(fā)情處理過程中將FSH注射劑量提高到150 IU,觀察不同的注射方法對發(fā)情效果的影響,為進一步提高多浪羊繁殖效率提供科學依據(jù)。
羊用孕酮海綿栓,新西蘭Inter Greaulane公司生產(chǎn)、注射用促卵泡素(規(guī)格為500單位),寧波市三生藥業(yè)有限公司、孕馬血清促性腺激素(規(guī)格為1 000單位)寧波市三生藥業(yè)有限公司、氯前列烯醇(規(guī)格為5 mL)寧波市三生藥業(yè)有限公司。高錳酸鉀粉、酒精、生理鹽水、碘酒、鏈霉素、青霉素、假陰道、集精杯、開膣器、輸精槍、顯微鏡、恒溫水浴鍋等均為國產(chǎn)。
2020年5月在新疆喀什五征綠色農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司,母羊為2~4歲健康體貌良好的純種多浪母羊172只。種公羊為2~4歲,體型外貌良好且性欲旺盛的成年公羊;試情羊選用體力好、性欲旺盛、有配種史的公羊。
本試驗采用單因素設(shè)計,選經(jīng)過B超診斷未懷孕的試驗羊,設(shè)為3個試驗組A、B、C和1個對照組D,在陰道中埋置1個孕酮海綿栓當天記為第0 d,第9 d A、B、C組按不同的FSH注射方法進行處理。
A組上午10:00一次性注射FSH 150 IU;
B組上午10:00注射100 IU FSH,8 h后再注射50 IU FSH;
C組上午10:00注射75 IU FSH,8 h后再注射75 IU FSH;
D對照組不注射FSH。
全部4組第11 d早上10:00撤栓時,肌肉分別注射PG1 mL和PMSG 330 IU。
用試情公羊進行試情。在上午08:00和下午20:00,將試情公羊放到母羊圈各試情1次,以母羊接受爬跨后站立不動為發(fā)情標準,試情3 d,將每只羊從撤栓到發(fā)情的時間間隔記錄下來。
1.5.1 假陰道法進行采精
種公羊精液采出后,先通過肉眼觀察,為乳白有“云吞”狀,使用顯微鏡進行觀察,選留活力好密度高的精液。
1.5.2精液稀釋配制
稱取檸檬酸鈉1.4 g、葡萄糖3 g,鏈霉素、青霉素各10萬IU,在100 mL高壓滅菌雙蒸水中溶解,過濾使用0.22μm的濾膜。
1.5.3 精液稀釋
將稀釋液和精液降至室溫。先將等倍稀釋液加入精液中,再根據(jù)所需輸精量,加大稀釋倍數(shù),本試驗稀釋倍數(shù)為3倍。
輸精時使用陰道開張器,在發(fā)情后的12 h和24 h進行兩次人工授精,將稀釋后鮮精0.1 mL輸入于子宮頸口內(nèi)0.5~1 cm處。
應用SPSS 20.0對發(fā)情率數(shù)據(jù)進行卡方檢驗。
統(tǒng)計4個試驗組6個時間點的發(fā)情母羊數(shù),并計算撤栓后12~72 h總體的同期發(fā)情率。表1為統(tǒng)計結(jié)果。
表1 不同F(xiàn)SH處理方法對多浪羊同期發(fā)情的影響
由表1可知:A、B、C組注射FSH后的發(fā)情率分別為77.78%;80.65%;87.50%。D對照組發(fā)情率為80.36%,統(tǒng)計分析顯示四個組之間發(fā)情率差異不顯著(P>0.05);但C組發(fā)情率高于其他組。
FSH是一種對綿羊排卵有重要作用的激素,常用于羊的超數(shù)排卵,在綿羊超排試驗中,白云喜等在無角道塞特超數(shù)排卵試驗中,采用孕酮海綿栓+FSH+PG,遞減注射FSH的方法,注射總劑量為180~310 IU,其中:235~280 IU組發(fā)情率為91%,平均回收可用胚胎為7.8個,7~8次遞減注射法效果較好[8]。徐鵬舉等在薩??顺瑪?shù)排卵試驗中,采用CIDR+FSH+PG的超排方案,遞減注射FSH,人工授精時注射2.5μgA3的方法,試驗組發(fā)情率分別為100%和98.18%,可用胚胎數(shù)為6.56個和6.47個[9]。FSH對超排效果的報道主要是FSH總劑量、注射次數(shù)、季節(jié)和供體羊品種等方面,對發(fā)情率和可用胚胎數(shù)的比較分析試驗也表明這些方面對綿羊的排卵有較大的影響。
在利用FSH提高繁殖率方面,張永固[10]等利用FSH提高灘羊繁殖效率的試驗中,六個試驗組設(shè)計注射劑量在30~80 IU之間,六個實驗組發(fā)情率在85.7%~93.5%之間,且差異不顯著,其中30~55 IU的三個試驗組產(chǎn)羔率均為100%,70 IU組最高為136.4%。發(fā)情率與本試驗平均注射150 IU FSH的發(fā)情率為87.5%相近。白丁平等在春節(jié)小尾寒羊?qū)嶒炛校捎肞G+炔諾酮+FSH,F(xiàn)SH總劑量40 IU和60 IU兩次平均注射的方法下,發(fā)情率分別為96.5%和94.7%[11]。上述研究表明,F(xiàn)SH注射總劑量30~150 IU都可以誘導發(fā)情,并且有較高的發(fā)情率。同時FSH劑量的增加可以有效的提高排卵數(shù)。
本課題組在此前使用100 IU FSH提高繁殖性能的試驗中,產(chǎn)羔率達到了178%,但仍然不能完全達到規(guī)模舍飼養(yǎng)羊場扭虧為盈的產(chǎn)羔率期望值。因此本試驗將FSH劑量提高到150 IU,并且按照不同的注射方法,觀察不同組別的繁殖性能。結(jié)果發(fā)現(xiàn),A組(150 IU)發(fā)情率為77.78%,B組(100 IU+50 IU)發(fā)情率為80.65%,C組(75 IU+75 IU)發(fā)情率為87.50%,對照D組發(fā)情率為80.36%,統(tǒng)計分析顯示四個組之間的發(fā)情率差異不顯著,此結(jié)果與上述兩個團隊的結(jié)果相同,說明不同劑量的FSH對發(fā)情率影響較小,在本實驗中,C組上下午各注射75 IU的發(fā)情率最高。
綜上所述,注射FSH后,統(tǒng)計分析顯示不同注射方法對發(fā)情率沒有較大的影響,本研究顯示150 IU分等量兩次注射后的發(fā)情率略高于其他組,后續(xù)在繼續(xù)觀察受胎率及產(chǎn)羔率的情況,最終期望能得到提高繁殖性能的FSH注射劑量及方法。