馬光恕，梁 梟，李 梅，劉明鑫，陳玉蓉，廉 華*

（1.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)園藝園林學(xué)院，大慶 163319；2.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所，北京 100193）

黃瓜（CucumissativusL.）又名胡瓜，葫蘆科，是一種世界性的蔬菜經(jīng)濟(jì)作物，有重要的生產(chǎn)和經(jīng)濟(jì)價值[1]。隨著黃瓜種植面積的擴(kuò)大、復(fù)種指數(shù)的提高，土傳病害的發(fā)生和危害日益加重。立枯絲核菌（Rizoctoniasolani，簡稱Rs）等病原菌可侵染黃瓜發(fā)生立枯病，造成幼苗生長遲緩或迅速死亡[2]，是一種重要的黃瓜苗期土傳病害。目前主要采用種子和床土消毒等物理法，或用多菌靈、代森錳鋅、惡霉靈、甲霜靈等化學(xué)農(nóng)藥來防治黃瓜立枯病，存在病原菌抗藥性增強(qiáng)、農(nóng)藥殘留、土壤環(huán)境惡化等諸多問題和風(fēng)險[3]。利用拮抗微生物防治黃瓜立枯病，有利于黃瓜的安全生產(chǎn)，并日益受到關(guān)注。

木霉菌Trichodermaspp.是廣泛應(yīng)用的植病生防真菌，對多種植物病原真菌，特別是土傳病原真菌有較好的拮抗作用[4]，同時，木霉菌還是重要的植物促生菌（plant growth-promoting fungi，PGPF），不僅促進(jìn)植物的生長發(fā)育，還能夠改善植物生理代謝等功能[5-7]。不同的木霉菌種和菌株，對植物病害的防病機(jī)制、防病效果和適應(yīng)性存在較大的差異[8]。木霉能產(chǎn)生多種具有抗菌活性的次級代謝產(chǎn)物，并較多地溶解于發(fā)酵液中，因此，木霉發(fā)酵液更利于促進(jìn)植物生長，并提高對病害的防治效果[9]。如深綠木霉T.atroviride發(fā)酵液的稀釋液促進(jìn)了山新楊幼苗SOD（超氧化物歧化酶，superoxide dismutase）、POD（過氧化物酶，peroxidase）、CAT（過氧化氫酶，catalase）、PAL（苯丙氨酸解氨酶，phenylalanine ammonialyase）和PPO（多酚氧化酶，polyphenoloxidase）等防御酶活性的提高[10]。而不同稀釋倍數(shù)的深綠木霉T.atroviride發(fā)酵液對黑麥草幼苗具有明顯的促生作用，提高了幼苗的株高、根系的長度、鮮重、干重和根冠比，顯著提高幼苗葉綠素、可溶性蛋白含量和PPO、POD和PAL等酶的活性[11]。

利用生防木霉菌防治 Rs引起的立枯病已有較多的研究報道[12,13]，如綠色木霉對西瓜有顯著的促生效果，處理后植株的株高、莖粗、地上部質(zhì)量、根冠比、壯苗指數(shù)等均顯著高于對照[14]。利用深綠木霉 T95、哈茨木霉SQR-T37等防治黃瓜立枯病均取得了較好的效果[15,16]，能夠明顯增加黃瓜葉片中的葉綠素a、葉綠素b含量，葉片凈光合速率也穩(wěn)定在相對高的水平[17]。但目前關(guān)于木霉菌處理對黃瓜的生長特性、生理生化特性、防病效果的影響尚缺乏系統(tǒng)研究。本研究采用前期篩選出的對黃瓜立枯病菌 Rs具有較強(qiáng)拮抗效果的3株木霉菌，系統(tǒng)研究了木霉菌處理對黃瓜的生長及生理特性的影響，以及對黃瓜立枯病的防治效果，為揭示木霉菌與植物的互作機(jī)制，推動木霉菌的開發(fā)應(yīng)用提供依據(jù)，為黃瓜優(yōu)質(zhì)、安全、高產(chǎn)栽培提供技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試黃瓜品種：“長春密刺”購于山東新泰市裕園種業(yè)有限公司。

供試培養(yǎng)基：馬鈴薯葡萄糖瓊脂固體培養(yǎng)基（PDA）：馬鈴薯 200 g，葡萄糖 20 g，瓊脂 10 g，蒸餾水1000 mL，pH 7.0～7.2。馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基（PD）：馬鈴薯 200 g，葡萄糖 20 g，蒸餾水1000 mL，pH 7.0～7.2。

供試菌株：棘孢木霉Trichodermaasperellum437、哈茨木霉T.harzianum670和752，由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所木霉研究組提供。

立枯絲核菌Rhizoctoniasolani（Rs），由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所土傳病害生物防治研究組提供。

供試基質(zhì)材料：試驗中所使用的基質(zhì)材料是草炭和蛭石的混合物，草炭:蛭石（體積比）=2:1（基質(zhì)基本農(nóng)化性狀如下：pH 6.92，有機(jī)質(zhì)34.5%，堿解氮760 mg/kg，速效磷53 mg/kg，速效鉀157 mg/kg）?；|(zhì)過篩（1 mm）后于烘箱中160 ℃高溫滅菌2 h，自然冷卻后繼續(xù)在160 ℃烘2 h后放涼備用[18]。

1.2 木霉發(fā)酵液和立枯絲核菌菌絲懸浮液的制備

木霉發(fā)酵液的制備：將木霉菌株670、752、437分別接種于PDA平板，于28 ℃活化培養(yǎng)3 d。從菌落邊緣取直徑5 mm的菌餅，轉(zhuǎn)接到含有100 mL PD液體培養(yǎng)基的 250 mL三角瓶中，于28 ℃、250 r/min振蕩培養(yǎng) 3 d，雙層紗布過濾去除菌絲，制成木霉發(fā)酵液。用血球計數(shù)板測定孢子數(shù)，并將木霉發(fā)酵液的孢子數(shù)調(diào)整到1.5×108孢子/mL備用[18]。

立枯絲核菌菌絲懸浮液的制備：將病原菌Rs在PDA培養(yǎng)基上28 ℃黑暗條件培養(yǎng)3 d，從菌落邊緣取直徑5 mm的菌餅5塊，接種在含有100 mL PD的250 mL三角瓶中，28 ℃、250 r/min振蕩培養(yǎng)3 d，用雙層紗布濾出菌絲團(tuán)，將菌絲攪碎，用無菌水調(diào)整濃度為1.1×107CFU/mL的菌絲懸浮液，備用。

1.3 盆栽試驗方法

1.3.1 試驗設(shè)計 黃瓜育苗在黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)農(nóng)學(xué)院教學(xué)基地的日光溫室內(nèi)進(jìn)行。將滅菌基質(zhì)材料裝入塑料材質(zhì)的育苗盤（34.5 cm×24 cm×11 cm），每個育苗盤播入120粒催芽后的黃瓜種子。播種后澆無菌水，保證黃瓜正常出苗和生長。出苗后，根據(jù)苗勢保留大小一致的小苗50株。在第一片真葉展開時（播種后5 d），用木霉發(fā)酵液和Rs菌絲懸浮液進(jìn)行灌根處理，每個育苗盤用量為150 mL，即保證黃瓜單株接種量為3 mL。試驗共設(shè)9個處理，每個處理3盤，隨機(jī)區(qū)組設(shè)計，5次重復(fù)。處理如下：① 接種木霉437（T437）；② 接種木霉670（T670）；③ 接種木霉752（T752）；④ 復(fù)合接種木霉437和Rs（T437B）；⑤ 復(fù)合接種木霉670和Rs（T670B）；⑥ 復(fù)合接種木霉752和Rs（T752B）；⑦ 多菌靈 800倍液與 Rs處理作為化學(xué)對照（CB）；⑧ 接種 Rs為病原菌對照（B）；⑨ 接種無菌PD培養(yǎng)液為對照（P）。

1.3.2 試驗測定指標(biāo)與方法 播種后12 d，分別測定黃瓜的抗病性指標(biāo)、生長指標(biāo)和生理指標(biāo)。每個處理選30株苗，用于抗病性指標(biāo)測定，抗病性指標(biāo)包括植株發(fā)病率、病情指數(shù)、防治效果；每個處理選5株苗用于測定幼苗生長指標(biāo)；選15 株苗用于測定生理指標(biāo)。檢測指標(biāo)和方法如下：

株高：莖基部到生長點之間的距離，用直尺測定；莖粗：子葉節(jié)下1 cm處粗度，用游標(biāo)卡尺測定；根體積：采用排水法[19]；葉面積采用稱重法，即用葉片打孔器（1.5～2.0 cm）取一定面積（A1）的葉片，將它與其余的葉片分別烘干，求出打孔取樣的干葉重量（W1）和葉片其余部分的干葉重（W2），即可求出該葉片的面積（A），A=A1/W1×（W1＋W2）；植株鮮重：植株用清水反復(fù)沖洗后，用吸水紙吸干，用1/1000電子天平測定鮮重。

葉綠素含量，采用丙酮乙醇法[20]；根系活力，采用α—萘胺氧化法[21]；葉片硝酸還原酶活性，采用活體分光光度法[22]；根系總吸收面積，采用甲烯藍(lán)法[23]。

葉片超氧化物歧化酶（SOD）活性，采用氮藍(lán)四唑法[24]；葉片過氧化物酶（POD）活性，采用愈創(chuàng)木酚比色法[25]；葉片過氧化氫酶（CAT）活性，采用高錳酸鉀滴定法[26]；葉片多酚氧化酶（PPO）活性，采用滴定法[27]。

黃瓜苗期枯萎病參照方中達(dá)[28]的分級標(biāo)準(zhǔn)，病情指數(shù)參照宗兆鋒和康振生[29]的計算方法。0級：無癥狀；1級：莖基部有小病斑，占莖圍的1/4以下；2級：莖基部的病斑較大，約占莖圍的1/4～1/2之間；3級：莖基部的病斑占莖圍的1/2以上，但尚未破壞整個莖圍；4級：莖基部的病斑占據(jù)全部莖圍，植株死亡。植株發(fā)病率為播種后12 d各處理發(fā)病株數(shù)占調(diào)查總株數(shù)的百分比。病情指數(shù)= ∑（病級株數(shù)×代表級數(shù)）/（植株總數(shù)×最高代表級值）×100。防治效果（%）=（對照病情指數(shù)－處理病情指數(shù)）/對照病情指數(shù)×100。

1.4 田間試驗方法

1.4.1 試驗設(shè)計 田間試驗在黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)農(nóng)學(xué)院試驗基地塑料大棚內(nèi)進(jìn)行，土壤類型為黑鈣土。每畝施用有機(jī)肥5000 kg、磷酸二氫銨50 kg，土壤充分耕翻，設(shè)置高畦，下畦寬120 cm、上畦寬100 cm，畦高13～15 cm，畦長5 m。高畦定植2 行，株距25 cm，行距60 cm，一個栽培畦設(shè)置為一個試驗小區(qū)，小區(qū)面積為12 m2。試驗共設(shè)4個處理，每個處理3個試驗小區(qū)，隨機(jī)區(qū)組設(shè)計，5次重復(fù)。當(dāng)幼苗長到4葉1心（播種后30 d）時，選取長勢一致的健壯苗定植于大棚內(nèi)。每個小區(qū)栽植黃瓜42 株。緩苗（定植后3 d）后分別以木霉437（T437）、670（T670）和752（T752）的發(fā)酵液灌根處理，每株100 mL，對照灌無菌PD培養(yǎng)液（CK）。緩苗后及時吊蔓，單蔓整枝，每3 d澆水一次。

1.4.2 試驗測定指標(biāo)與方法 在黃瓜果實采摘中期，各試驗小區(qū)隨機(jī)選取 20 個果實，測定品質(zhì)指標(biāo)?？扇苄怨绦挝锖坎捎萌毡緪坼?PAL-1 型便攜式手持折光儀測定；可溶性糖含量采用蒽酮比色法測定[30]；Vc含量采用紫外分光光度法[31]；可溶性蛋白含量采用考馬斯亮藍(lán)G-250 染色法[32]。每個試驗小區(qū)隨機(jī)選取10個果實，測定平均單瓜重。跟蹤測定各小區(qū)產(chǎn)量，按照小區(qū)面積折算為畝產(chǎn)量。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

利用Microsoft Excel 2007軟件進(jìn)行圖表制作，試驗數(shù)據(jù)取3次重復(fù)的平均值和標(biāo)準(zhǔn)差，利用DPS 7.05（data processing system）進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 木霉對黃瓜幼苗形態(tài)和生物量積累的影響

經(jīng)木霉437、670和752處理的黃瓜幼苗株高、莖粗、葉面積、根體積、全株鮮重均顯著高于對照P，說明3株木霉菌對黃瓜幼苗的生長均具有顯著的促進(jìn)作用，其中以T670的促進(jìn)作用最強(qiáng)，T437居中，T752較弱。T670處理的黃瓜幼苗的株高、莖粗、葉面積、根體積和全株鮮重分別比對照增加了53.48%、19.80%、32.47%、26.00%和54.43%。病原菌與木霉菌或多菌靈同時接種，即T437B、T670B、T752B、CB處理，其幼苗的相應(yīng)生長指標(biāo)均顯著高于病原菌對照B，其中以木霉670對病原菌的抑制和對黃瓜的促生作用最強(qiáng)，T670B處理的黃瓜幼苗的株高、莖粗、葉面積、根體積和全株鮮重分別比B增加了42.14%、20.14%、27.47%、72.73%和66.42%（表1）。

表1 木霉菌對黃瓜幼苗形態(tài)和生物量積累的影響Table 1 Effect of Trichoderma on the morphology and biomass accumulation of cucumber seedlings

2.2 木霉對黃瓜幼苗生理特性的影響

2.2.1 木霉對黃瓜幼苗葉綠素含量和硝酸還原酶活性的影響 3個木霉菌處理（T437、T670、T752）的黃瓜幼苗葉綠素含量均顯著高于P處理，T670處理葉綠素含量最高，T670與T437、T437與T752之間差異均不顯著，說明木霉菌處理可以不同程度地提高幼苗葉綠素含量。病原菌Rs處理（B）的葉綠素含量最低，病原菌與木霉菌或多菌靈同時施用（T437B、T670B、T752B、CB）的葉綠素含量均顯著高于B處理，T670B處理葉綠素含量顯著高于其他處理，其中以T670B處理的葉綠素含量最高（圖1）。

木霉菌處理均不同程度地提高了幼苗葉片硝酸還原酶活性，其中 T670的促進(jìn)作用顯著高于 T437和T752，且T437和T752的差異不顯著。B處理的硝酸還原酶活性最低，顯示病原菌不利于黃瓜對氮素營養(yǎng)的利用；木霉菌或多菌靈與病原菌同時施用（T437B、T670B、T752B、CB）時，黃瓜葉片的硝酸還原酶活性均顯著高于B，表明木霉菌或多菌靈減弱了病原菌對黃瓜氮素利用的抑制作用（圖1）。

圖1 木霉菌對黃瓜幼苗葉綠素含量和葉片硝酸還原酶活性的影響Fig.1 Effect of Trichoderma on chlorophyll content and leaf nitrate reductase activity of cucumber seedlings

2.2.2 木霉對黃瓜幼苗根系活力和根系總吸收面積的影響 木霉菌處理（T437、T670、T752）可以不同程度地提高幼苗根系活力和根系總吸收面積，其中T670與T437之間差異不顯著但均顯著高于T752；B處理的根系活力和根系總吸收面積最低；病原菌與木霉菌或多菌靈同時施用（T437B、T670B、T752B、CB）處理的根系活力和根系總吸收面積均顯著高于B，表明施用木霉菌或多菌靈有利于提高幼苗根系活性，減弱病原菌對幼苗根系活性的抑制作用（圖2）。

圖2 木霉菌對黃瓜幼苗根系活力和根系總吸收面積的影響Fig.2 Effect of Trichoderma on root activity and total root absorption area of cucumber seedlings

綜上檢測結(jié)果，3株木霉菌處理對黃瓜幼苗的葉綠素含量、葉片硝酸還原酶活性、根系活力、根系總吸收面積均都有顯著的促進(jìn)作用，并以木霉670的促進(jìn)作用最強(qiáng)，播種后12 d，T670處理的黃瓜幼苗的葉綠素含量、葉片硝酸還原酶活性、根系活力、根系總吸收面積分別比P增加了43.55%、51.52%、28.42%、17.31%；復(fù)合接種中，以T670B的促進(jìn)作用最強(qiáng)，T670B處理黃瓜幼苗的葉綠素含量、葉片硝酸還原酶活性、根系活力和根系總吸收面積分別比B增加了68.82%、45.06%、64.44%和21.38%（圖1，2）。

2.2.3 木霉對黃瓜幼苗保護(hù)性酶活性的影響 3株木霉菌處理均不同程度地提高了幼苗葉片SOD和POD活性，其中T670對提高SOD和POD活性的促進(jìn)作用最大。處理B的SOD和POD活性最低；病原菌與木霉菌或多菌靈同時施用（T437B、T670B、T752B、CB）處理的SOD、POD活性均顯著高于處理B，其中T670B處理的SOD活性顯著高于其他含有病原菌的處理，T437B、T670B和T752B處理POD活性差異不顯著，但顯著高于處理CB（圖3）。

圖3 木霉菌對黃瓜幼苗超氧化物歧化酶和過氧化物酶活性的影響Fig.3 Effect of Trichoderma on superoxide dismutase activity and peroxidase activity of cucumber seedlings

3株木霉菌均不同程度地提高了幼苗葉片CAT和PPO活性，其中以T670處理的促進(jìn)作用最大。B處理的CAT和PPO活性最低，病原菌與木霉菌或多菌靈同時施用（T437B、T670B、T752B、CB）的黃瓜葉片中兩種酶活性均顯著高于B，T670B與T752B、T752B與T437B之間差異均不顯著，CB處理的兩種酶活性顯著低于T437B、T670B、T752B（圖4）。

圖4 木霉菌對黃瓜幼苗過氧化氫酶和多酚氧化酶活性的影響Fig.4 Effect of Trichoderma on catalase activity and polyphenol oxidase activity of cucumber seedlings

綜上結(jié)果，3株木霉菌處理對黃瓜幼苗葉片的SOD、POD、CAT、PPO活性均有顯著的促進(jìn)作用，以木霉670的促進(jìn)作用最強(qiáng)，播種12 d時，T670處理的黃瓜幼苗的SOD、POD、CAT、PPO活性分別比P增加了74.06%、92.91%、57.04%、87.38%；復(fù)合接種中以T670B處理的促進(jìn)作用最強(qiáng)，T670B處理的黃瓜幼苗SOD、POD、CAT、PPO活性分別比B增加了93.64%、101.60%、40.50%、53.00%（圖3，4）。

2.3 木霉對黃瓜枯萎病盆栽防治效果的影響

單獨病原菌處理（B）的發(fā)病率和病情指數(shù)顯著高于 Rs與木霉菌（T437B、T670B、T752B）及多菌靈（CB）的組合處理，T437B、T670B、T752B的防治效果分別為76.63%、76.87%和75.18%，三者的差異不顯著，但均顯著高于CB的防治效果53.25%（表2）。

表2 木霉菌對黃瓜立枯病防效的影響Table 2 Effect of the control efficiency of Trichoderma against cucumber R.solani

2.4 木霉對黃瓜產(chǎn)量和品質(zhì)的影響

3株木霉菌不同程度的提高了黃瓜的單瓜重和畝產(chǎn)量，并改善了黃瓜品質(zhì)。木霉菌處理（T437、T670、T752）的黃瓜果實的可溶性固形物、可溶性糖、Vc、可溶性蛋白含量均顯著高于CK。其中T670處理效果最好，黃瓜單瓜重、畝產(chǎn)量、可溶性固形物含量、可溶性糖含量、Vc含量和可溶性蛋白含量分別比CK增加了22.12%、22.08%、31.25%、24.40%、160.00%和23.72%（表3）。

表3 木霉菌對黃瓜產(chǎn)量和品質(zhì)的影響Table 3 Effect of Trichoderma on yield and quality of cucumber

3 討論

立枯絲核菌是一種全球性以危害葫蘆科、茄科和禾本科等作物為主的土傳病原真菌，由 Rs引起的植物立枯病經(jīng)常造成大面積缺苗和毀滅性的損失[33]，篩選高效廣譜的木霉菌株并采用合理的施用方法對有效防治立枯病具有重要意義[34]。本研究的盆栽試驗顯示，棘孢木霉437、哈茨木霉670和752對黃瓜立枯病的盆栽防治效果均達(dá)到75%以上，進(jìn)一步證明這3株木霉菌具有良好的應(yīng)用潛力。

木霉菌不僅能夠防治植物病害，還具有促進(jìn)植物生長、增強(qiáng)植物生理特性等功能[35]。張春秋等[36]利用拮抗木霉菌防治由尖孢鐮刀菌Fusariumoxysporum引起的黃瓜根腐病，表明拮抗木霉菌能夠顯著提高黃瓜幼苗生理活性、促進(jìn)幼苗生長，其中擬康氏木霉T.pseudokoningii886處理的黃瓜幼苗的株高、莖粗和全株鮮重與對照相比分別提高了28.8%、35.1%、10.70%；谷祖敏等[37]研究發(fā)現(xiàn)，綠色木霉T.virideTV菌株促進(jìn)了黃瓜的生長，黃瓜地上部分和地下部分鮮質(zhì)量分別增加了42.81%和86.92%。本研究中的3株木霉菌處理均可顯著提高黃瓜幼苗形態(tài)建成和物質(zhì)積累，并且不同木霉菌之間存在差異，其中以哈茨木霉 670對黃瓜幼苗的株高、莖粗、葉面積、根體積和全株鮮重促進(jìn)效果最明顯，分別比對照（P，無菌PD培養(yǎng)液）增加了53.48%、19.80%、32.47%、26.00%和54.43%；株高、莖粗和全株鮮重增加幅度均高于張春秋等[36]研究結(jié)果，全株鮮重略低于谷祖敏等[37]報道的對應(yīng)指標(biāo)，可能與木霉菌株、黃瓜品種、檢測時間以及植株生長環(huán)境的差異有關(guān)。而只接種病原菌 Rs幼苗的株高、莖粗、葉面積、根體積、全株鮮重最低，說明病原菌不利于幼苗的生長，木霉菌和多菌靈均對病原菌有較強(qiáng)的抑制作用，因此在與病原菌同時施用時，木霉菌或多菌靈能夠減弱病原菌對黃瓜幼苗生長的抑制作用。

植物抗氧化酶活性如SOD、POD、CAT、PPO等與植物抗病性的強(qiáng)弱存在正相關(guān)關(guān)系。木霉菌能夠誘導(dǎo)植物抗病相關(guān)防御酶活性提高，增強(qiáng)植物體的抗病防御能力[38]。宋玉娟[39]利用棘孢木霉T-6孢子懸浮液處理土壤后，煙草體內(nèi)SOD、POD、CAT酶活性顯著提高，酶活性達(dá)到峰值時分別比對照增加27.52%、47.26%和46.78%；李聰[40]利用哈茨木霉 TH 發(fā)酵液的5倍稀釋液處理蘆筍，提高了蘆筍苗根部SOD、POD、CAT、β-1,3-葡聚糖酶和幾丁質(zhì)酶活性，增加幅度分別為對照的5.89、2.32、3.12、5.21和1.22倍。本研究采用木霉菌或多菌靈處理黃瓜幼苗，黃瓜葉片中SOD、POD、CAT、PPO活性均顯著高于只接種Rs 的對照處理，其中以復(fù)合接種木霉670和Rs的促進(jìn)作用最強(qiáng)，說明不同木霉對黃瓜葉片保護(hù)作用存在差異，哈茨木霉670強(qiáng)于棘孢木霉437和哈茨木霉752，木霉處理對黃瓜的保護(hù)作用強(qiáng)于多菌靈。

張春秋等[36]利用棘孢木霉525、哈茨木霉610和擬康氏木霉886處理黃瓜，3株木霉均可以提高黃瓜幼苗生理指標(biāo)，黃瓜葉綠素含量、硝酸還原酶活性、根系活力、根系總吸收面積增加幅度分別達(dá)到38.7%～49.5%、29.5%～66.3%、10.8%～21.5%、19.6%～23.5%。葉綠素含量反映了植物光合作用的強(qiáng)弱，硝酸還原酶的活性直接影響植物體對氮素營養(yǎng)的利用效果，根系活力和根系總吸收面積是反映根系活性強(qiáng)弱的重要指標(biāo)，這4個指標(biāo)均會對黃瓜品質(zhì)和產(chǎn)量產(chǎn)生一定的影響。本研究的3株木霉菌處理對黃瓜幼苗的葉綠素含量、葉片硝酸還原酶活性、根系活力、根系總吸收面積均有顯著的促進(jìn)作用，單獨接種中以木霉 670的促進(jìn)作用最強(qiáng)，而復(fù)合接種中以T670B的促進(jìn)作用最強(qiáng)。同時，不同木霉菌處理的黃瓜產(chǎn)量和品質(zhì)之間也存在差異，與其對生理指標(biāo)的促進(jìn)作用相吻合。

木霉能產(chǎn)生一系列具有抗菌活性的次級代謝產(chǎn)物，并較多地存在于發(fā)酵液中。本研究利用木霉發(fā)酵液代替孢子懸液，顯著提高了黃瓜幼苗葉片的SOD、POD、CAT和PPO酶活性，提高了黃瓜生理活性，進(jìn)而提高了對立枯病的抗性，與前人研究結(jié)果[15,16]相似，對于發(fā)酵液中的哪些代謝產(chǎn)物起作用，有待進(jìn)一步研究。