潘貴珍 楊絨娟 李召斌 張曉東 周德剛

摘要：目的：研究芩黃顆粒對豬的安全性。試驗方法：共設4個組，每組8頭豬，分別為空白對照組、1倍推薦劑量組、3倍推薦劑量組、5倍推薦劑量組。各試驗組按試驗方案連續(xù)給予芩黃顆粒15d，每天觀察試驗豬的精神狀態(tài)、被毛、采食、糞便和眼睛狀況，并分別于給藥前、給藥結束后1d、給藥結束后7d檢查各試驗組豬血液學指標、血液生化指標；分別于給藥結束后1d、給藥結束后7d測定尿液學指標，并于給藥結束后7d對臟器進行組織病理學觀察。結果：給藥前、給藥結束后1d和給藥結束后7d，血液學指標、血液生化指標均在正常范圍內(nèi)；給藥結束后1d和給藥結束后7d，尿液學指標均在正常范圍內(nèi)；高劑量組的各臟器組織與空白對照組相比，均未見異常病理變化。結論：芩黃顆粒以推薦劑量5倍使用，未觀察到毒副作用，說明芩黃顆粒按推薦劑量使用，對豬的安全性良好。

關鍵詞：芩黃顆粒；血液學指標；血液生化指標；安全性；豬

使用中藥對動物機體生理機能進行綜合調(diào)理，在提高機體免疫力、抗病力和抗病毒等方面具有獨到之處，可有效防控和治療疾病，本試驗主要是評價芩黃顆粒對豬的安全性，為進一步臨床應用提供參考價值。

1試驗動物和材料

1.1受試動物

20日齡健康仔豬32頭，雌雄各半。

1.2供試藥物

芩黃顆粒（商品名：溫呼平）：批號：20170502；規(guī)格：1，000g：2，132g生藥；生產(chǎn)廠家：洛陽惠中獸藥有限公司。

1.3主要儀器與試劑

臺式高速冷凍離心機：型號為3-16KL，購自德國sigma公司；XFA6130型全自動血液細胞分析儀，購自南京普朗生物醫(yī)學有限公司；ANI稀釋液（生產(chǎn)批號：PN1701），ANI-3D溶血劑（生產(chǎn)批號：PN2701），HB含酶清洗液（生產(chǎn)批號：PB7707），探頭清洗液（生產(chǎn)批號：PB9701）均購自南京普朗生物醫(yī)學有限公司；EON酶標儀，購自美國BioTek公司；優(yōu)利特尿液分析儀，型號URIT-180，購自桂林優(yōu)利特醫(yī)療電子有限公司；優(yōu)利特尿試紙條（URIT11A）（貨號：56171012），購自桂林優(yōu)利特醫(yī)療電子有限公司；谷草轉氨酶（GOT）檢測試劑盒（批號：20171010）、谷丙轉氨酶（GPT）檢測試劑盒（批號：20171011）、尿素氮（BUN）檢測試劑盒（批號：20170928）、肌酐（Cr）檢測試劑盒（批號：20170926）、總蛋白檢測試劑盒（批號：20171011）、白蛋白檢測試劑盒（批號：20171011）、總膽紅素試劑盒（批號：20171011）、堿性磷酸酶（AKP）檢測試劑盒（批號：20171011）、乳酸脫氫酶（LDH）檢測試劑盒（批號：20171010）、鈣（Ca）檢測試劑盒（批號：20171011）、氯（Cl）檢測試劑盒（批號：20171011）、鉀（K）檢測試劑盒（批號：20171011）均購于南京建成生物工程研究所；葡萄糖（GLU）測試盒（批號：20170302147），購于上海榮盛生物藥業(yè)有限公司。

2試驗方法

2.1試驗動物分組與處理

動物適應14d后，隨機分為4組[1]，每組8頭，分別為空白對照組、1倍推薦劑量組、3倍推薦劑量組、5倍推薦劑量組，飼料經(jīng)粉碎后制備成半破碎料使用。第1組不給藥正常飼喂作為空白對照組，第2、3、4組分別以每1kg飼料添加4g芩黃顆粒、12g芩黃顆粒、20g芩黃顆粒進行飼喂，每天飼喂4次，上下午各2次，分組及具體給藥方法見表1所示。試驗豬群自由飲水，連續(xù)給藥15d，每天觀察試驗豬反應情況（精神狀態(tài)、被毛、采食、糞便和眼睛狀況）等，連續(xù)觀察至給藥結束后7d。

給藥前、給藥結束后1d、給藥結束后7d對各組試驗豬采血，每頭豬采血4～5mL，分成兩份，一份注入抗凝管內(nèi)制備抗凝血，用于血常規(guī)檢查，另一份不抗凝，于注射器內(nèi)放置，用于血清分離，進行血清生化指標檢測。

2.2觀察指標

2.2.1臨床觀察試驗期間每日觀察豬群，記錄各組豬群的精神狀態(tài)、被毛、采食、糞便和眼睛狀況。并于給藥前、給藥結束后1d、給藥結束后7d對各組動物進行稱重，記錄動物的體重。

2.2.2糞便觀察每天觀察糞便是否有血液或其它出血跡象、顏色和稠度、黏液和其它異常情況。

2.2.3尿液分析分別于給藥結束后1d、給藥結束后7d用膀胱穿刺方法采取豬尿液[2]，通過肉眼觀察尿液顏色，使用尿液分析儀檢測尿液比重、pH、亞硝酸鹽、葡萄糖、VC、隱血、蛋白質(zhì)、膽紅素、尿膽原、酮體和白細胞。

2.2.4血液學指標測定分別于給藥前、給藥結束后1d、給藥結束后7d對各組試驗豬采血，進行血常規(guī)檢查。

2.2.5血液生化指標檢測[3]分別于給藥前、給藥結束后1d、給藥結束后7d對各組試驗豬前腔靜脈采血，分離血清，按試劑盒說明書要求檢測谷丙轉氨酶（GPT）、谷草轉氨酶（GOT）、血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、堿性磷酸酶（AKP）、總膽紅素、血糖、氯、鉀、鈣、血清總蛋白、白蛋白、乳酸脫氫酶（LDH）。

2.2.6解剖學觀察給藥結束后7d對各組試驗豬進行剖檢，觀察其心、肝、脾、肺、腎等實質(zhì)器官的色澤、質(zhì)地、腫塊等，并觀察空腔臟器黏膜的完整性及色澤等。

2.2.7組織病理學觀察給藥結束7d時取空白對照組和5倍推薦劑量組的豬胃、腸、心、肝、脾、肺、腎、腸系膜淋巴結、卵巢（睪丸）和胰腺制備組織病理切片，進行組織病理學觀察。

2.3結果分析

所測數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標準差表示，用SPSS 19.0軟件進行統(tǒng)計分析，結果用“平均值±標準差”表示，顯著性用P值表示，其中P≤0.05表示差異顯著，P≤0.01表示差異極顯著。組間顯著性檢驗采用Duncans多重比較。