竇曉利,張占軍,范茂盛,劉 東,楊海平
(1.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜草與綠色農(nóng)業(yè)研究所,甘肅蘭州 730070;2.隴東學(xué)院農(nóng)林科技學(xué)院,甘肅慶陽(yáng) 745000;3.慶陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,甘肅慶陽(yáng) 745000;4.慶陽(yáng)市質(zhì)量檢驗(yàn)檢測(cè)研究院,甘肅慶陽(yáng) 745000;5.慶陽(yáng)陽(yáng)光惠農(nóng)生態(tài)科技有限公司,甘肅慶陽(yáng) 745000)
良鳳花雞是我國(guó)地方黃羽雞經(jīng)過(guò)純化雜交選育的肉用品種,主產(chǎn)于廣西南寧市郊良鳳江地區(qū),其外貌清秀,羽毛豐滿(mǎn),羽色光亮,具有肉味鮮美、香氣濃郁、細(xì)嫩可口等優(yōu)良肉品質(zhì)特點(diǎn)和適應(yīng)性強(qiáng)、耐粗飼、飼養(yǎng)周期短、周轉(zhuǎn)快等生產(chǎn)優(yōu)勢(shì),是研究?jī)?yōu)質(zhì)肉雞品種的理想模型[1]。良鳳花雞適于圈養(yǎng),產(chǎn)品風(fēng)味可與土雞媲美,深受養(yǎng)殖戶(hù)及消費(fèi)者歡迎[2-3]。
畜禽生產(chǎn)中抗生素的產(chǎn)品殘留間接危害消費(fèi)者健康[4],無(wú)抗養(yǎng)殖成為發(fā)展趨勢(shì)。植物精油是經(jīng)特殊工藝從植物中提取的單一成分或混合制劑[5],對(duì)人和動(dòng)物無(wú)害,應(yīng)用較廣泛,超過(guò)3 000 多種[6],主要由醛類(lèi)、萜烯類(lèi)、酯類(lèi)及醇類(lèi)等揮發(fā)性芳香物質(zhì)組成,散發(fā)特殊香味,具有抗菌、抗炎、抗病毒、免疫激活及抗氧化等多種功效[7-9],可促進(jìn)動(dòng)物健康、提高生產(chǎn)性能[10]、調(diào)節(jié)腸道菌群、提高動(dòng)物免疫力[11-13]和抗氧化能力、改善肉品質(zhì)[14-15]等,還可提高家禽對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率[16],減少疾病發(fā)生,改善雞肉品質(zhì)[17-19];且因其來(lái)源廣泛,生物活性多樣,被認(rèn)為是極具應(yīng)用潛力的安全、有效、綠色的飼料添加劑,常被作為抗生素替代物應(yīng)用于養(yǎng)殖中,具有良好的應(yīng)用前景。但目前有關(guān)黃芪精油的動(dòng)物應(yīng)用研究相對(duì)較少。本試驗(yàn)旨在研究黃芪精油對(duì)良鳳花雞生長(zhǎng)性能、免疫機(jī)能及抗氧化能力的影響,為植物精油在肉雞生產(chǎn)中的進(jìn)一步應(yīng)用提供依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)用黃芪精油由甘肅定西一制藥公司提供,從中藥黃芪中經(jīng)蒸餾萃取,主要成分為水芹烯、對(duì)傘花烴、萜品烯、萜品烯四醇、桉油醇、丁香酚、金合歡烯、香柑油烯、紅沒(méi)藥烯、石竹烯、姜烯、姜黃酮、香柑油醇等,有效物含量99%。
1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì),選擇30 日齡、體重(1.55±0.05)kg 的良鳳花肉雞200 只,隨機(jī)分成4 組,每組5 個(gè)重復(fù),每重復(fù)10 只。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.1%、0.2%、0.3%黃芪精油。預(yù)試期5 d,第1 天接種禽流感(AI)、新城疫(ND)疫苗;試驗(yàn)期30 d(2019 年3 月21 日—2019 年4 月20 日)。以重復(fù)為單位單獨(dú)飼養(yǎng),自由采食和飲水,室溫為22~23℃,濕度為60%~65%,按常規(guī)飼養(yǎng)管理方式進(jìn)行飼養(yǎng),按照免疫消毒程序定期進(jìn)行疫苗免疫及環(huán)境消毒。在陽(yáng)光惠農(nóng)生物科技有限公司養(yǎng)雞場(chǎng)進(jìn)行試驗(yàn),基礎(chǔ)日糧采用玉米-豆粕型,參照NRC(2008)肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制,日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見(jiàn)表1。
表1 試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧組成與營(yíng)養(yǎng)成分
1.5 生長(zhǎng)性能測(cè)定 試驗(yàn)期間,以重復(fù)為單位,在試驗(yàn)期初和期末空腹稱(chēng)重,并記錄每日投料量、剩料量,計(jì)算日平均采食量、平均日增重和耗料增重比。
1.6 免疫機(jī)能測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束時(shí),每重復(fù)隨機(jī)抽取3 只雞,心臟采血,4 000 r/min 離心分離血清。用血凝抑制試驗(yàn)測(cè)定ND、AI 抗體效價(jià)水平。ND 抗原、AI H9 抗原、標(biāo)準(zhǔn)陽(yáng)性血清購(gòu)自中國(guó)藥品食品監(jiān)察所,禽用免疫疫球蛋白IgG、IgA、ELISA Kit 均購(gòu)自 Elabscience 公司,按照說(shuō)明書(shū)用ELISA 方法測(cè)定血清中免疫球蛋白含量。
1.7 抗氧化能力指標(biāo)測(cè)定 超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒購(gòu)于南京建成生物研究所,按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行測(cè)定。
1.8 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行方差分析,采用Duncan's 法分析差異顯著性,試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示,以P<0.05 表示差異顯著性。
2.1 黃芪精油對(duì)良鳳花雞生長(zhǎng)性能的影響 由表2 可知,試驗(yàn)組的平均采食量和平均日增重均高于對(duì)照組,其中,0.2%、0.3%黃芪精油組的平均采食量較對(duì)照組分別提高17.93%(P>0.05)、18.96%(P<0.05),平均日增重分別提高19.37%(P<0.05)、20.41%(P<0.05)。耗料增重比無(wú)顯著差異。
表2 黃芪精油對(duì)良鳳花雞生長(zhǎng)性能的影響
2.2 黃芪精油對(duì)良鳳花雞免疫機(jī)能的影響 由表3 可知,試驗(yàn)組血清中AI、ND 抗體效價(jià)水平與IgG、IgA 含量均高于對(duì)照組。其中,與對(duì)照組相比,0.2% 和0.3%黃芪精油組血清中AI 抗體效價(jià)水平分別提高16.26%(P<0.05)、14.36%(P<0.05),ND 抗體效價(jià)水平分別提高16.16%(P<0.01)、16.48%(P<0.01),血清中IgG 分別提高15.98%(P<0.01)、20.58%(P<0.01),IgA 含量分別提高12.46%(P<0.05)、14.02%(P<0.01)。
表3 黃芪精油對(duì)良鳳花雞血清中免疫指標(biāo)的影響
2.3 黃芪精油對(duì)良鳳花雞抗氧化能力的影響 由表4 可知,試驗(yàn)組血清中T-SOD、GSH-Px、T-AOC 活性均高于對(duì)照組,0.2%、0.3%組的T-SOD 活性較對(duì)照組分別提高21.49%(P<0.05)、23.99%(P<0.05),GSH-Px 活性分別提高31.91%(P<0.05)、23.8%(P>0.05),T-AOC 分別提高27.93%(P<0.01)和28.99%(P<0.01)。
表4 黃芪精油對(duì)良鳳花雞血清中抗氧化能力的影響 U/mL
3.1 黃芪精油對(duì)良鳳花雞生長(zhǎng)性能的影響 植物精油主要由醇類(lèi)、醛類(lèi)、酸類(lèi)、酚類(lèi)、酯類(lèi)、酮類(lèi)和萜類(lèi)組成,通過(guò)影響胃腸道促進(jìn)單胃動(dòng)物生長(zhǎng)的功能,增加飼料適口性,刺激胃腸道消化液分泌,改善腸道形態(tài),穩(wěn)定腸道微生物菌群,減少炎癥發(fā)生[20]。張艷雯等[16]報(bào)道,添加植物精油均可提高肉雞體重、采食量、平均日增重和飼料轉(zhuǎn)化率等。Windisch 等[21]研究表明,精油主要通過(guò)提高消化酶活性和養(yǎng)分吸收來(lái)發(fā)揮作用,具有提高低營(yíng)養(yǎng)水平飼糧消化率的潛力。本研究也證實(shí),黃芪精油組平均日采食量和日增重均高于對(duì)照組,耗料增重比則降低,說(shuō)明添加黃芪精油具有同樣的作用,可通過(guò)調(diào)節(jié)肉雞的消化道內(nèi)環(huán)境分泌,提高養(yǎng)分利用率和飼料消化率,提高生產(chǎn)性能。
3.2 黃芪精油對(duì)良鳳花雞免疫機(jī)能的影響 禽流感、新城疫可以感染不同日齡的雞,其感染率和死亡率均較高,該病沒(méi)有有效的治療藥物,主要通過(guò)疫苗預(yù)防,AI、ND 抗體水平直接決定免疫狀態(tài)[22-23]。IgG、IgA 主要參與體液免疫,其中IgG 介導(dǎo)體液免疫,IgA 主要參與黏膜免疫[24]。植物精油對(duì)消化系統(tǒng)具有有益影響,可改善營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收,減少腸道病原體數(shù)量,同時(shí)發(fā)揮抗氧化活性,進(jìn)而改善免疫機(jī)能[14]。黃芪含有多種糖類(lèi)、黃酮類(lèi)、氨基酸、皂苷類(lèi)以及其他多種微量元素,可作為免疫促進(jìn)劑或調(diào)節(jié)劑,其精油經(jīng)高度提純,微量高效,可提升機(jī)體免疫力,調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)功能。張艷等[25]研究結(jié)果表明,黃芪可作為飼料添加劑和免疫增強(qiáng)劑,對(duì)動(dòng)物具有營(yíng)養(yǎng)、治療和保健功效。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,添加0.2%、0.3%黃芪精油血清中AI、ND 抗體效價(jià)水平及IgG 含量均顯著提高,試驗(yàn)組血清中IgA 含量也均高于對(duì)照組,說(shuō)明添加黃芪精油可激活機(jī)體免疫系統(tǒng),促進(jìn)抗體分泌合成,提高良鳳花雞AI、ND 抗體效價(jià)水平及血清中IgG、IgA 含量,增強(qiáng)免疫機(jī)能。
3.3 黃芪精油對(duì)良鳳花雞抗氧化能力的影響 抗氧化能力與機(jī)體抗病性、抗逆性及延緩衰老密切相關(guān)[26]。動(dòng)物通過(guò)體內(nèi)多種酶系統(tǒng)來(lái)清除自由基,防止機(jī)體發(fā)生病理性損傷,起到保護(hù)作用,AOC、SOD、GSH-Px 是動(dòng)物抗氧化能力的主要評(píng)價(jià)指標(biāo)之一[27-28],T-AOC 綜合衡量機(jī)體抗氧化功能,SOD 是清除自由基的重要酶類(lèi),GSH-Px 是機(jī)體內(nèi)重要的過(guò)氧化物分解酶[29]。植物精油是天然的抗氧化劑。Shang 等[30]研究發(fā)現(xiàn),牛至精油可改善氧化穩(wěn)定性、T-AOC 和GSH-Px。黃芪中的多糖、皂甙、黃酮等成分均具有提高機(jī)體抗氧化能力的作用[31]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,0.2% 和0.3% 精油組T-SOD活性顯著提高,血清中GSH-Px 活性也均高于對(duì)照組,說(shuō)明黃芪精油可以激活體內(nèi)酶系統(tǒng)活性,提高良鳳花雞的抗氧化能力,其作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究。
本研究結(jié)果表明,添加黃芪精油可提高良鳳花雞的生長(zhǎng)性能、免疫機(jī)能及抗氧化能,且以0.2%的添加量效果較好。