郭雙雙(寧波中誠檢測技術(shù)服務(wù)有限公司，浙江 余姚 315408)

0 引言

HJ 535—2009《水質(zhì)氨氮的測定納氏試劑分光光度法》標(biāo)準(zhǔn)中給出了重復(fù)性限和再現(xiàn)性限[1-2]兩個術(shù)語，標(biāo)準(zhǔn)描述如下：

準(zhǔn)確度和精密度：氨氮濃度為1.21 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)性限為0.028 mg/L，再現(xiàn)性限為0.075 mg/L，回收率在94%～104%。氨氮濃度為1.47 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)性限為0.024 mg/L，再現(xiàn)性限為0.066 mg/L，回收率為95%～105%。作為非研究性檢測機(jī)構(gòu)，可以不研究重復(fù)性限和再現(xiàn)性限的來源。但是重復(fù)性限和再現(xiàn)性限的驗證，對一個實驗室某個時期內(nèi)測試結(jié)果的穩(wěn)定性具有實際應(yīng)用意義，我們有必要進(jìn)行重復(fù)性限和再現(xiàn)性限的驗證試驗。

1 術(shù)語與定義

(1)準(zhǔn)確度，指分析和測量結(jié)果與真值之間的接近程度。

(2)精密度，指多次測定結(jié)果互相接近的程度。

(3)重復(fù)性條件[1]是在同一實驗室，由同一操作員在短時間內(nèi)，依據(jù)相同的方法，使用相同的設(shè)備對同一被測對象相互獨立進(jìn)行的實驗條件。

(4)重復(fù)性限，用r表示，是指一個數(shù)值在重復(fù)性條件下，兩個測試結(jié)果的絕對差以95%的概率小于或等于此數(shù)。

(5)再現(xiàn)性條件[3]不同的操作員，使用不同的測試設(shè)備，依據(jù)相同的測試方法，對同一測試對象相互獨立進(jìn)行的測試條件。

(6)再現(xiàn)性限，用R表示，是指一個數(shù)值在再現(xiàn)性條件下，兩個測試結(jié)果的絕對差以95%的概率小于或等于此數(shù)。

(7)限的確定

根據(jù)GB/T 6379.6—2009中4.1.2的規(guī)定，對正態(tài)分布95%的概率水平下，?=1.96，將? 2修約為2.8。

在重復(fù)性條件下或再現(xiàn)性條件下得到的兩個單一測試結(jié)果進(jìn)行檢驗時，應(yīng)與重復(fù)性限r(nóng)=2.8σr或再現(xiàn)性限R=2.8σR進(jìn)行比較。

2 實驗部分

2.1 實驗原理

游離態(tài)的氨或銨離子形式存在的氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成淡紅棕色絡(luò)合物，在波長420 nm處測量絡(luò)合物吸光度，其光度與水中氨氮含量成正比。

2.2 實驗主要儀器和試劑

紫外可見分光光度計：T6新世紀(jì)；納氏試劑[4]：二氯化汞-碘化鉀-氫氧化鉀溶液；酒石酸鈉溶液：500 g/L；氨氮標(biāo)準(zhǔn)溶液：GSB05-1145-2000/500 mg/mL。

2.3 實驗過程

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備

氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作液(10 mg/L)：取5.00 mL氨氮標(biāo)準(zhǔn)溶液于250 mL容量瓶中，用純水定容至刻度，搖勻。

2.3.2 精密度試驗用標(biāo)準(zhǔn)溶液

氨氮濃度為1.21 mg/L和1.47 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液：分別量取12.1 mL和14.7 mL氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作液(2.3.1)于100 mL容量瓶中，用純水定容至刻度，搖勻。

備注：最好買到有證的標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控樣品，如果買不到，則自行配置。

2.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

納氏試劑法標(biāo)準(zhǔn)曲線[5-6]：分別量取0、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00 mL氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作液于8個50 mL比色管中，加純水定容至刻度。加入1.0 mL酒石酸鉀鈉溶液，混合均勻，然后再加入納氏試劑1.5 mL，混合均勻，靜置10 min后，在波長420 nm下，用10 mm比色管，以純水作參比測定吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

2.3.4 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制

納氏試劑法氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作曲線如圖1所示。

圖1 納氏試劑法氨氮標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

2.4 精密度試驗的驗證

試驗方法：分別量取5.0 mL氨氮濃度為1.21 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液和氨氮濃度為1.47 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液于50 mL比色管中，加純水定容至刻度。加入1.0 mL酒石酸鉀鈉溶液，混合均勻，再加入納氏試劑1.5 mL，混合均勻，靜置10 min后，在波長420 nm下，用10 mm比色管，以純水作參比，測量吸光度。分別對兩種濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行兩組測定[3]，測試結(jié)果數(shù)為3次，求出3次測試的算術(shù)平均值。

對1.21 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，其臨界差[7]計算如下：

表1 精密度試驗吸光度結(jié)果

表2 精密度試驗結(jié)果

根據(jù)實際工作情況，我們只做了一個實驗室測試結(jié)果的驗證試驗，所以在此只用重復(fù)性限進(jìn)行比較。

3 結(jié)語

HJ 535—2009《水質(zhì)氨氮的測定納氏試劑分光光度法》標(biāo)準(zhǔn)中給出了重復(fù)性限和再現(xiàn)性限兩個術(shù)語，那么重復(fù)性限和再現(xiàn)性限的實際應(yīng)用也是實驗室內(nèi)部質(zhì)量控制方法之一。

在進(jìn)行精密度試驗驗證過程中，盡量進(jìn)行多次平行測定。如果測試結(jié)果的算術(shù)平均值差的絕對值大于標(biāo)準(zhǔn)中的重復(fù)性限或再現(xiàn)性限，建議查找原因，對實驗試劑、實驗儀器、環(huán)境條件以及操作步驟進(jìn)行全面查找，然后再進(jìn)行新試驗，之前的數(shù)據(jù)應(yīng)棄之不用。