王語聰，謝智鑫，李春雨，王宇晴，陳曉偉，韓建春,2,

(1.東北農(nóng)業(yè)大學(xué)食品學(xué)院，黑龍江哈爾濱 150030；2.黑龍江省綠色食品科學(xué)研究院，黑龍江哈爾濱 150028)

火麻仁又稱大麻仁，是大麻(Cannabis sativaL.)果實(shí)干燥成熟種子，為藥食同源物質(zhì)，其富含植物蛋白、膳食纖維及多元不飽和脂肪酸，因其含有豐富的碳水化合物，可為機(jī)體提供能量，被廣泛用作食品的輔料及動(dòng)物飼料[1]。藥典記載為潤腸通便藥材，有較好的潤燥通便效果[2]。火麻仁油作為火麻仁常見的加工產(chǎn)品之一，因其內(nèi)含有大量不飽和脂肪酸如油酸、亞油酸和α-亞麻酸等不飽和脂肪酸，因此具有降血脂[3]、抗氧化[4]和改善記憶[5]等功效，被大多數(shù)人作為典型的藥食同源物及養(yǎng)生食材、臨床用藥材。大麻二酚(cannabidiol，CBD)作為火麻仁油中的酚類物質(zhì)之一，在火麻仁油中約占5 mg/kg[6]。火麻仁油的營養(yǎng)特性與多不飽和脂肪酸含量有關(guān)，且主要與CBD的存在有關(guān)[7]。臨床研究表明，CBD可快速透過血腦屏障，可作為一種由壓力引起的神經(jīng)系統(tǒng)疾病治療藥物[8]，有效地治療關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥、慢性疼痛、精神分裂癥和癲癇，近年被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療[9-12]。Sartim等[13]通過小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，CBD能夠降低小鼠靜止不動(dòng)的時(shí)間，首次證實(shí)其可能具有抗抑郁作用。但是對(duì)于CBD來源物質(zhì)——火麻仁油能否減輕抑郁癥的方面未見有研究報(bào)道。

抑郁癥的形成原因十分復(fù)雜，研究證實(shí)抑郁癥與炎癥因子存在密切關(guān)系[14]。為了探尋作為食品的火麻仁油對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)的保護(hù)作用，本研究從火麻仁油中提取其有效成分CBD，以慢性不可預(yù)測(cè)的輕度應(yīng)激(Chronic unpredictable mild stress，CUMS)模型小鼠為受試對(duì)象，通過連續(xù)灌胃給予小鼠火麻仁油和CBD 8周，觀測(cè)小鼠的焦慮癥狀、學(xué)習(xí)和認(rèn)知行為，檢測(cè)小鼠海馬及皮層炎癥因子mRNA表達(dá)量及顯微觀察，探究火麻仁油和CBD能否緩解小鼠的抑郁行為和神經(jīng)系統(tǒng)炎癥反應(yīng)，旨在火麻仁油在藥食同源開發(fā)和利用提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料與儀器

3周齡C57BL/6雄性小鼠(合格證：No.110324 1911) 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心；火麻仁 黑龍江(孫吳)火麻產(chǎn)業(yè)園，產(chǎn)品安全及其質(zhì)量要求均符合國家相關(guān)規(guī)定，火麻仁油由傳統(tǒng)壓榨技術(shù)獲得；CBD 由實(shí)驗(yàn)室制取，采用柱料A:Seplite LX-100B，粒子尺寸0.4～1.2 mm、柱料B:Seplite LXBC02，粒子尺寸50～100 μm，通過APPS MV全自動(dòng)層析純化系統(tǒng)從火麻仁油中分離純化得到，純度99%以上；CBD標(biāo)準(zhǔn)品 美國SIGMA-ALDRICH公司；mRNA提取試劑盒、反轉(zhuǎn)錄試劑盒、RTPCR試劑盒 中國寶生物工程有限公司；DAB顯色 北京中山金橋生物技術(shù)有限公司；IBA-1抗體和二抗 美國Abcam公司。

離心機(jī) 賽默飛世爾科技(中國)有限公司；QuantStudio 3D型數(shù)字PCR儀 美國Life Technologies公司；光學(xué)顯微鏡 日本奧林巴斯公司；高架十字迷宮 上海欣軟信息科技有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及干預(yù) 將3周齡雄性C57BL/6小鼠于22±2 °C、濕度50%±10%下，自由采食和飲水，12 h光/暗周期進(jìn)行為期2周的適應(yīng)性喂養(yǎng)。所有的試驗(yàn)步驟遵循試驗(yàn)動(dòng)物護(hù)理以及動(dòng)物協(xié)議，由西安交通大學(xué)動(dòng)物倫理委員會(huì)批準(zhǔn)[15]。將全部喂食標(biāo)準(zhǔn)飲食(AIN-93M)并分成五組，每組10只。CBD低劑量組(濃度為15 mg/kg)、CBD高劑量組(濃度為30 mg/kg)、火麻仁油組(劑量3 mL/kg，液相色譜分析可知CBD的濃度為4.7 mg/kg)均溶解于橄欖油中，以10 mL/kg/d劑量進(jìn)行灌胃，并同時(shí)暴露于慢性不可預(yù)測(cè)的輕度應(yīng)激(Chronic unpredictable mild stress，CUMS)程序；模型組按照上述劑量灌胃等體積的橄欖油，并暴露于CUMS程序；空白組僅灌胃等體積的橄欖油。其中CBD劑量的選擇是根據(jù)Shoval等[16]探究CBD對(duì)于抑郁模型小鼠的享樂效用中效果較好的劑量濃度選取15、30 mg/kg?；鹇槿视蛣┝康囊罁?jù)是李根林等[17]探究火麻仁油對(duì)D-半乳糖衰老小鼠模型的研究中選取3 mL/kg以及魏月媛等[18]探究火麻仁油毒理學(xué)采用90 d大鼠亞慢性毒性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明在實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物一切正常無不良反應(yīng)，說明火麻仁油不具有亞慢性毒性。

在兩周適應(yīng)性喂養(yǎng)后，除空白組外，進(jìn)行CUMS程序[19]。其程序?yàn)椋好恐芙o予小鼠7種(S1～S7)不同刺激。S1：1 min懸尾(距尾尖1 cm)；S2：光照(24 h)；S3：傾斜籠子(30 °)；S4：禁食(24 h)；S5：禁水(24 h)；S6：濕墊料(200 mL純凈水)；S7：冷水游泳(4 ℃、5 min)。每周隨機(jī)且不重復(fù)選擇刺激方式的順序。

各分組小鼠于每日刺激前30 min進(jìn)行灌胃，直到8周后CUMS處理程序結(jié)束時(shí)為止，試驗(yàn)期間小鼠自由采食和飲水。在最后兩周進(jìn)行多種行為學(xué)測(cè)試，且測(cè)試在給藥后1 h進(jìn)行，以確定壓力模型成功建立。在行為測(cè)試后處死小鼠，并用氯水合物誘導(dǎo)麻醉，取眼球血和腦部組織，分離紋狀體、腦海馬、前額皮質(zhì)組織等，保存于-80 °C冰箱中，備用。所有手術(shù)均處于麻醉狀態(tài)，并盡一切努力使疼痛最小化。

1.2.2 小鼠抑郁行為測(cè)試

1.2.2.1 蔗糖偏好測(cè)試 蔗糖偏好測(cè)試反映小鼠的愉悅感。在建模成功后第1 d對(duì)小鼠進(jìn)行為期3 d蔗糖偏好適應(yīng)性訓(xùn)練，其中第1 d為兩瓶純凈水，第2 d將其中一瓶更換為1%的蔗糖水，第3 d進(jìn)行為期24 h禁食后蔗糖偏好實(shí)驗(yàn)，放置兩瓶分別為1%蔗糖溶液和純凈水的等量溶液，經(jīng)過24 h后記錄兩瓶溶液的消耗量并進(jìn)行計(jì)算，公式如下：

蔗糖偏愛程度(%)=糖水消耗量/(糖水消耗量+普通水消耗量)×100

1.2.2.2 強(qiáng)迫游泳測(cè)試 強(qiáng)迫游泳是根據(jù)小鼠的靜止時(shí)間從而反映小鼠的絕望程度[20]。在建模成功后第2 d進(jìn)行強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)，總時(shí)長為6 min，用攝像系統(tǒng)記錄動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)后的4 min內(nèi)保持不動(dòng)時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將小鼠吹干后放回籠中。

1.2.2.3 懸尾測(cè)試 懸尾測(cè)試是為了反映小鼠的焦慮程度[21]。在建模成功后第3 d進(jìn)行測(cè)試。在用固定貼紙將小鼠尾尖部2 cm處固定于懸尾箱頂部，將小鼠身體調(diào)整至倒立狀態(tài)，使其頭部距離箱底部50 cm左右，總時(shí)長為6 min，用攝像系統(tǒng)記錄動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)的后3 min內(nèi)保持不動(dòng)時(shí)間。為避免外環(huán)境所帶來的實(shí)驗(yàn)誤差，整個(gè)記錄過程需要小鼠一直處于觀察不到操作人員的狀態(tài)。

1.2.3 小鼠焦慮行為測(cè)試

1.2.3.1 曠場(chǎng)測(cè)試 曠場(chǎng)測(cè)試是為了反映小鼠在陌生環(huán)境中的自主性和探索能力[20]。在運(yùn)動(dòng)監(jiān)測(cè)籠中使用帶紅外傳感器的數(shù)字計(jì)數(shù)器測(cè)量小鼠的自發(fā)活動(dòng)。建模成功后第4 d進(jìn)行，將每只小鼠放置在設(shè)備的中心并允許自由探索5 min。整個(gè)過程都進(jìn)行了視頻記錄，稍后通過前面提到的計(jì)算機(jī)化視頻跟蹤系統(tǒng)分析總距離和線路交叉總數(shù)(運(yùn)動(dòng)活動(dòng))進(jìn)行分析。每只小鼠進(jìn)行測(cè)試后，清理排泄物并用酒精擦拭以便氣味帶來實(shí)驗(yàn)偏差。

1.2.3.2 高架十字迷宮測(cè)試 高架十字實(shí)驗(yàn)也是反映小鼠焦慮程度的一種測(cè)定方法[22]。建模成功后第5 d進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，小鼠在視頻監(jiān)控下自動(dòng)移動(dòng)，利用設(shè)備和相關(guān)軟件記錄數(shù)據(jù)，例如小鼠的移動(dòng)路線、速度、總距離和臂數(shù)。每只小鼠的測(cè)試時(shí)間為5 min，測(cè)試結(jié)果基于小鼠張開雙臂停留的時(shí)間和距離。

1.2.4 小鼠學(xué)習(xí)認(rèn)知行為測(cè)試

1.2.4.1 Y迷宮測(cè)試 Y迷宮主要是探索小鼠的記憶能力[23]。建模成功后第6 d進(jìn)行小鼠在視頻監(jiān)控下自動(dòng)移動(dòng)，利用設(shè)備和相關(guān)軟件記錄數(shù)據(jù)，例如其移動(dòng)路線、速度、總距離和臂數(shù)。每只小鼠的測(cè)試時(shí)間為5 min，計(jì)算結(jié)果為交替百分比：

交替百分比(%)=不重復(fù)進(jìn)入三個(gè)交叉臂的總次數(shù)/(進(jìn)臂總次數(shù)-1)×100

1.2.4.2 新物體識(shí)別測(cè)試 新物體識(shí)別是反映小鼠的學(xué)習(xí)認(rèn)知能力[24]。建模成功后第7 d將小鼠放在一個(gè)開放的立方體箱中央，該立方體箱長40 cm、寬40 cm、高50 cm。實(shí)驗(yàn)分為適應(yīng)期、訓(xùn)練期和測(cè)試期。小鼠在視頻監(jiān)控設(shè)備下自由移動(dòng)，記錄數(shù)據(jù)。在實(shí)驗(yàn)測(cè)試期間，酒精鼠標(biāo)盒和物體的氣味被用來防止實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)錯(cuò)誤。

1.2.5 腦部皮層和海馬mRNA提取和檢測(cè) 用Trizol抽提法[25]提取腦組織中總RNA并用逆轉(zhuǎn)錄酶PrimeScriptTM RT合成cDNA，然后進(jìn)行PCR擴(kuò)增。通過SYBR green PCR試劑盒測(cè)量mRNA表達(dá)，并使用CFX96TM系統(tǒng)進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)。兩步PCR擴(kuò)增的標(biāo)準(zhǔn)程序：95 ℃ 30 s，循環(huán)1次；95 °C 3 s；60 °C 30 s循環(huán)40次；進(jìn)入溶解曲線階段。小鼠源前后端引物示如表1。用GAPDH的mRNA作為內(nèi)參，2-ΔΔCt計(jì)算基因相對(duì)表達(dá)量。

表1 半定量RT-PCR引物序列Table 1 Primer sequences used for semi-quantitative RT-PCR analysis

1.2.6 海馬組織切片的病理學(xué)觀察 小鼠在處死后立即取出腦組織，取左腦并將其固定在4%(v/v)PBS固定劑中24 h，脫水后包埋于石蠟中進(jìn)行切片。將切片置于二甲苯中進(jìn)行脫蠟，然后用梯度乙醇水化，并用PBS洗滌5次，每次4 min。為防止特異性染色，通過添加含有3%的過氧化氫去離子水處理10 min，使內(nèi)源酶活性失活，然后與一抗孵育過夜。用PBS洗滌5次后，加入辣根酶標(biāo)記鏈霉卵蛋白素工作液孵育20 min，然后加入DAB工作液進(jìn)行顯色反應(yīng)10 min。切片用蘇木精復(fù)染。將切片在梯度乙醇中脫水后，在二甲苯中澄清，樹脂密封，并在光學(xué)顯微鏡觀察(200×)上觀察。

1.3 數(shù)據(jù)處理

Iamge J軟件處理圖像，Graphpad Prism8、IBM SPSS Statistics 20軟件分析相關(guān)數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差(Mean±SEM)，并且每個(gè)實(shí)驗(yàn)獨(dú)立重復(fù)至少3次，P<0.05為顯著，P<0.01為極顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 火麻仁油和CBD對(duì)模型小鼠抑郁行為學(xué)的影響

如表2所示，在懸尾實(shí)驗(yàn)中，與空白組相比，模型組靜止不動(dòng)時(shí)間顯著上升(P<0.05)，與模型組相比，CBD低、高劑量組分別極顯著(P<0.01)、顯著(P<0.05)低于模型組小鼠的靜止不動(dòng)時(shí)間，但火麻仁油劑量組無差異性顯著(P>0.05)。根據(jù)強(qiáng)迫游泳的數(shù)據(jù)分析，與空白組相比，模型組小鼠靜止不動(dòng)的時(shí)間顯著延長(P<0.05)；與模型組相比，CBD劑量組均極顯著低于模型組(P<0.01)，但火麻仁油劑量組無差異性顯著(P>0.05)。通過蔗糖偏好數(shù)據(jù)可知，與空白組相比，模型組小鼠喜愛蔗糖程度顯著降低(P<0.05)；與模型組相比，火麻仁油劑量組和CBD低劑量組顯著升高(P<0.05)，CBD高劑量組極顯著升高(P<0.01)。

表2 各組小鼠抑郁行為學(xué)指數(shù)Table 2 Behavioral index of mice in each group

抑郁癥的主要表現(xiàn)為情緒低落、興趣喪失、活動(dòng)減少、飲食和思維的改變等[26]。經(jīng)過八周建模，蔗糖偏好表明小鼠愉悅感的獲得和喪失程度，抑制小鼠糖水偏好度降低。懸尾實(shí)驗(yàn)和強(qiáng)迫游泳表明小鼠在緊張的環(huán)境下產(chǎn)生的抑郁與絕望狀態(tài)。通過實(shí)驗(yàn)可以看出，火麻仁油和CBD劑量組的小鼠均能夠增加小鼠對(duì)糖水的喜愛程度，且CBD劑量組能夠減少靜止不動(dòng)的時(shí)間，證明火麻仁油及CBD能夠改善CUMS模型小鼠抑郁行為。

2.2 火麻仁油和CBD對(duì)模型小鼠焦慮行為學(xué)的影響

根據(jù)高架十字迷宮開放臂與閉合臂時(shí)間比和路程比數(shù)據(jù)(表3)可得，與空白組相比，模型組極顯著下降(P<0.01)；與模型組相比，CBD劑量組均極顯著上升(P<0.01)，但火麻仁油組不存在顯著差異(P>0.05)。

表3 各組小鼠焦慮行為學(xué)指數(shù)Table 3 Behavioral index of mice in each group

高架十字迷宮是評(píng)價(jià)動(dòng)物焦慮反應(yīng)的一種行為學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，利用動(dòng)物對(duì)環(huán)境改變的特性探究和對(duì)高懸敞開臂的心理來形成小鼠的焦慮程度。曠場(chǎng)測(cè)試是為了增加小鼠自主神經(jīng)活動(dòng)和探索能力[27]。本實(shí)驗(yàn)可知，與模型組相比，CBD劑量組高架十字迷宮開放臂與閉合臂的時(shí)間比和路程比有極顯著的上升(P<0.01)；曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)跨格數(shù)沒有顯著差異(P>0.05)，與Zanelati等[28]探究CBD對(duì)小鼠的抗抑郁作用的結(jié)果相一致。因此，CBD能夠改善CUMS模型小鼠的焦慮行為，效果好于火麻仁油組。

2.3 火麻仁油和CBD對(duì)模型小鼠認(rèn)知學(xué)習(xí)能力的影響

在新物體識(shí)別分辨指數(shù)實(shí)驗(yàn)中(結(jié)果見表4)，與空白組相比，模型組顯著下降(P<0.05)；與模型組相比，火麻仁油組顯著升高(P<0.05)，CBD劑量組極顯著升高(P<0.01)。通過Y迷宮數(shù)據(jù)可知，與空白組相比，模型組顯著下降(P<0.05)；與模型組相比，火麻仁油組不存在顯著差異(P>0.05)，但CBD劑量組均顯著上升(P<0.05)。

表4 各組小鼠認(rèn)知學(xué)習(xí)能力指數(shù)Table 4 Behavioral index of mice in each group

抑郁癥作為重要神經(jīng)類疾病，其發(fā)病機(jī)制很復(fù)雜，慢性不可預(yù)測(cè)的輕度壓力模型常用于研究病理及生理機(jī)制和抗藥的作用機(jī)制[29]。新物體識(shí)別和Y迷宮表達(dá)了認(rèn)知行為和學(xué)習(xí)能力。在認(rèn)知和學(xué)習(xí)能力方面，CBD劑量組明顯優(yōu)于火麻仁油組。綜上，相比于火麻仁油可改善由抑郁癥帶來的認(rèn)知、焦慮及學(xué)習(xí)行為，CBD有更強(qiáng)的作用。

2.4 小鼠皮層炎癥因子含量變化

如圖1所示，與空白組相比，模型組腫瘤壞死因子(TNF-α)、白細(xì)胞介素-1(IL-1β)水平均極顯著上升(P<0.01)；誘導(dǎo)NOS(iNos)mRNA水平均顯著上升(P<0.05)。與模型組相比，CBD劑量組TNF-α、iNos和IL-1β均顯著降低(P<0.05)，火麻仁油組IL-1β水平顯著下降(P<0.05)，火麻仁油組TNF-α、iNos水平無顯著差異(P>0.05)。

圖1 各組小鼠皮層TNF-α、iNos、IL-1β的mRNA水平(n=10)Fig.1 The mRNA levels of TNF-α, iNos and IL-1β in the mouse cortex of each group (n=10)

炎癥因子在免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用，當(dāng)免疫系統(tǒng)被激活時(shí)，免疫細(xì)胞會(huì)分泌多種炎癥細(xì)胞因子，作為免疫應(yīng)答及炎癥效應(yīng)因子，誘導(dǎo)炎癥發(fā)生；IL-1β、TNF-α和iNos可以作為炎癥反應(yīng)調(diào)節(jié)因子，在炎癥中發(fā)揮中心作用，當(dāng)免疫細(xì)胞被激活時(shí)釋放，腦部中其含量增加，引起神經(jīng)細(xì)胞損傷[30]。研究表明，火麻仁油及CBD可以顯著降低巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的TNF，從而降低炎癥；李萃萃等[31]研究證實(shí)CBD能夠抑制脊髓損傷模型小鼠的炎癥反應(yīng)，進(jìn)而對(duì)脊髓神經(jīng)功能起到保護(hù)作用。本試驗(yàn)結(jié)果表明，小鼠皮層IL-1β、TNF-α及iNos的mRNA水平明顯降低，說明火麻仁油及CBD能夠改善小鼠腦神經(jīng)的炎癥狀態(tài)，與前人的研究結(jié)果相符。

2.5 小鼠海馬炎癥因子含量變化

如圖2所示，與空白組相比，模型組TNF-α、iNos和IL-1β均極顯著升高(P<0.01)；與模型組相比，CBD劑量組TNF-α、iNos和IL-1β均顯著降低(P<0.05；P<0.01)，火麻仁油組IL-1β顯著下降(P<0.05)，火麻仁油組TNF-α、iNos無顯著差異(P>0.05)。

圖2 各組小鼠海馬TNF-α、iNos、IL-1β的mRNA水平(n=10)Fig.2 The mRNA levels of TNF-α, iNos and IL-1β in the hippocampus of each group of mice (n=10)

炎癥因子與抑郁癥的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)，這些炎癥因子進(jìn)入大腦，影響與情緒情感調(diào)節(jié)有關(guān)的神經(jīng)遞質(zhì)，從而產(chǎn)生抑郁癥狀[32]。近年來，研究人員發(fā)現(xiàn)炎癥因子在抑郁癥的發(fā)病過程中發(fā)揮重要作用，促炎因子顯著上調(diào)。越來越多的證據(jù)表明，抗炎藥物治療后抑郁癥狀明顯改善，促炎因子水平明顯降低。Li等[33]研究表明通過LPS誘導(dǎo)小鼠使其產(chǎn)生抑郁樣行為，經(jīng)抗抑郁藥物氟西汀治療后，促炎因子IL-1β和TNF-α含量均有顯著降低。Shelton等[34]采用微陣列分析對(duì)未治療的抑郁患者死后腦組織進(jìn)行研究表明，患者前額葉腦組織中的促炎因子和抗炎因子的表達(dá)量均有增加。本試驗(yàn)結(jié)果表明，在小鼠腦部海馬部分，CBD劑量組中IL-1β、TNF-α及iNos的mRNA水平有著顯著降低(P<0.05)，同時(shí)抑郁小鼠的認(rèn)知功能得到改善，結(jié)合前人的研究結(jié)果，說明火麻仁油及CBD可能通過抑制神經(jīng)炎癥反應(yīng)，來改善其認(rèn)知功能。

2.6 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)

星形膠質(zhì)細(xì)胞是腦部中主要的炎癥細(xì)胞之一，其活化程度反映了大腦中炎癥反應(yīng)的狀態(tài)。如圖3所示，相對(duì)于空白組，模型組的小鼠海馬區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)增加；與模型組相比，火麻仁油和CBD劑量組星形膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)相對(duì)減少。由此可知，CBD抑制了小鼠海馬腦區(qū)星形膠質(zhì)細(xì)胞的活化。

圖3 各組小鼠海馬CA1、CA3、DG和Cortex區(qū)域IBA-1的形態(tài)變化Fig.3 The morphological changes of hippocampus CA1, CA3, DG and Cortex IBA-1 in each group of mice

小膠質(zhì)細(xì)胞的離子化的鈣結(jié)合銜接分子1(IBA-1)是一種保護(hù)膠質(zhì)細(xì)胞的鈣類結(jié)合蛋白[35-36]，在腦部主要起到調(diào)節(jié)細(xì)胞因子及炎癥的作用，參與神經(jīng)和免疫功能[37]。由圖3中可明顯看出，CBD和火麻仁劑量均能降低IBA-1表達(dá)量，但CBD的劑量效果比火麻仁更好，說明火麻仁及CBD均能有效緩解小鼠海馬炎癥狀態(tài)。

3 結(jié)論

火麻仁油能夠提高模型小鼠抑郁行為及認(rèn)知能力，并且降低小鼠皮層和海馬炎癥因子iNos mRNA水平；CBD能改善CUMS模型小鼠的抑郁和焦慮行為，提升其學(xué)習(xí)和認(rèn)知功能，抑制小鼠腦皮層和海馬的炎癥反應(yīng)。因此，本試驗(yàn)證明火麻仁油中的CBD具有改善抑郁癥狀的潛力。