鄭碧瑩 張佳歡 陳斌輝 李陽春 石森林 吳素香

浙江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 浙江 杭州 311402

復(fù)方菊花處方由杭白菊、枸杞子、決明子等中藥組成，是長期用于眼科的臨床經(jīng)驗(yàn)方，用于肝腎陰虛之兩目干澀，內(nèi)障目昏等癥[1-3]。泡騰顆粒入水后能迅速泡騰溶化[4]，具有服用方便，口感好，起效快等特點(diǎn)。本文在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，通過Box-Behnken響應(yīng)面設(shè)計優(yōu)化處方，確定復(fù)方菊花泡騰顆粒的處方和工藝。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：DGG-9053A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司）；METTLER TOLEDO pH計（瑞士）；OHAUS CP-313電子分析天平（奧豪斯儀器上海有限公司）。

1.2 試藥：一水檸檬酸（濰坊英軒實(shí)業(yè)有限公司，20170227）；碳酸氫鈉（南京華飛口堿廠，20170719POT）；乳糖（阿拉丁，11227021）；D-甘露糖醇（青島明月海藻集團(tuán)有限公司，20170314）；PEG6000（上海源葉生物科技有限公司，H14N8A47794）。

2 方法與結(jié)果

2.1 泡騰顆粒的制備：采用先醇提后水提的工藝，提取復(fù)方菊花處方藥材，濃縮干燥得復(fù)方醇提浸膏粉和復(fù)方水提浸膏粉。取PEG 6000適量，加熱熔融后加入堿源，攪勻，冷卻，粉碎成細(xì)粉。再取醇提和水提浸膏粉、填充劑及泡騰崩解劑（酸源和聚乙二醇包裹的堿源）混勻，加適量潤濕劑濕法制粒，干燥，整粒，即得。

2.2 泡騰顆粒處方篩選單因素試驗(yàn)：分述如下。

2.2.1 填充劑的選擇：由于泡騰顆粒遇潮容易失去泡騰作用，故選用抗吸濕性強(qiáng)的D-甘露糖醇、乳糖以及兩者混合物為填充劑，固定其他輔料，以泡騰時間及澄清度為指標(biāo)進(jìn)行考察。結(jié)果發(fā)現(xiàn)用乳糖或乳糖和D-甘露糖醇的混合物時的澄清度均低于D-甘露糖醇，且泡騰時間也較長，故選擇D-甘露糖醇為填充劑進(jìn)行后續(xù)研究。

2.2.2 泡騰崩解劑的用量考察：固定酸堿比為1.5∶1，填充劑為D-甘露糖醇，潤濕劑為70%乙醇，考察泡騰崩解劑用量對泡騰時間、pH值及顆粒成型率的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)崩解劑用量越大，沉淀越少，泡騰越迅速。見表1。

表1 泡騰崩解劑用量的考察結(jié)果

2.2.3 酸堿比例的選擇：固定泡騰崩解劑用量為50%，填充劑為D-甘露糖醇，潤濕劑為70%乙醇，考察酸堿質(zhì)量比（堿源以PEG6000與碳酸氫鈉0.75∶1包裹）對泡騰時間、pH值的影響。由表2可知酸堿比例越大，其泡騰時間越短，其pH值也更接近中性。

表2 泡騰崩解劑酸堿比例的考察結(jié)果

2.2.4 潤濕劑濃度的選擇：浸膏黏性較大，故選用乙醇為潤濕劑。固定崩解劑用量為50%，酸堿比例為1.5：1，填充劑為D-甘露糖醇，考察潤濕劑乙醇溶液的濃度對泡騰時間和顆粒成型率的影響。結(jié)果見表3，其表明潤濕劑濃度越高，顆粒的成型率越高。

表3 潤濕劑濃度的考察結(jié)果

2.3 Box-Behnken設(shè)計-響應(yīng)面法優(yōu)化泡騰顆粒處方：具體如下。

2.3.1 Box-Behnken設(shè)計：在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，以泡騰崩解劑用量（A）、泡騰崩解劑酸堿比例（B）、潤濕劑乙醇濃度（C）為自變量，分別對各自變量的低、中、高水平進(jìn)行編碼（-1、0、1），進(jìn)行3因素3水平的設(shè)計，以泡騰時間，pH值和顆粒得率的綜合評分為響應(yīng)值，進(jìn)行試驗(yàn)分析。設(shè)計得17組試驗(yàn)，其中前面1～12組為析因設(shè)計試驗(yàn)，后面5組為中心重復(fù)試驗(yàn)，綜合評分=0.2X3-0.5X1-0.3X2，其中X1為泡騰時間，X2為pH值，X3為成型率。因素水平見表4，結(jié)果見表5。

表4 Box-Behnken試驗(yàn)因素水平表

表5 Box-Behnken試驗(yàn)設(shè)計及結(jié)果

2.3.2 模型擬合與數(shù)據(jù)分析：利用Design-Expert 12.0軟件對試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行二元多次回歸擬合，得方程：Y=-131.72273+0.911759A+19.05022B+2.67881C-0.077593AB+0.005656AC-0.425222BC-0.012112A2+5.06556B2-0.014472C2，R2=0.9514。模型R2接近1，說明通過二次回歸得到的模型與試驗(yàn)結(jié)果擬合較好。顯著性檢驗(yàn)結(jié)果見表6。根據(jù)方差分析結(jié)果可知，模型F=15.24，P＜0.05，表明該二次模型顯著。失擬項(xiàng)P＞0.05，不顯著，故此二次模型成立。

表6 綜合評價回歸模型系數(shù)顯著性檢驗(yàn)表

2.3.3 影響顆粒綜合評分的主要因素分析：方差分析結(jié)果表明，A、C、BC、A2、C2項(xiàng)達(dá)顯著水平（P＜0.05），3個因素對成型的影響排序?yàn)闈櫇駝舛菴＞崩解劑的用量A＞酸堿比例B。

2.3.4 驗(yàn)證試驗(yàn)：根據(jù)響應(yīng)面工藝優(yōu)化的結(jié)果得最佳成型處方為：崩解劑用量為53%，酸堿比例1.3∶1，潤濕劑濃度為84%。按照此處方制備3批顆粒進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果3批驗(yàn)證試驗(yàn)平均綜合評分為11.86，與模型預(yù)測值12.21接近，說明該模型有良好的預(yù)測性，模型優(yōu)化結(jié)果可信，可用于復(fù)方菊花泡騰顆粒的處方優(yōu)化。

3 討論

泡騰崩解劑堿源一般采用碳酸氫鈉，酸源常用枸櫞酸、檸檬酸以及酒石酸等。酸堿比例主要影響其pH值，酸的用量通常多于堿，偏酸性口感較好。崩解劑的用量對泡騰效果影響很大，由于酸堿直接接觸會發(fā)生反應(yīng)，一般制備泡騰顆粒時會選擇酸顆粒和堿顆粒分別制備，最后混合整粒。但預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)分別制粒的酸顆粒和堿顆粒色差較大，混合顆粒有色差，故選擇一起制粒。為了防止酸堿接觸發(fā)生反應(yīng)，采用PEG 6000將堿源包裹，再與藥物，酸源及其他輔料混合，制備的顆粒顏色均一。泡騰顆粒溶解后應(yīng)澄清，一般選擇水溶性的輔料。由于復(fù)方提取物浸膏吸濕嚴(yán)重，故所選輔料除了應(yīng)具有較好的水溶性，還應(yīng)有良好的抗吸濕性。選用乳糖制備的顆粒吸濕速度較低，但是顆粒溶解后澄清度較差，乳糖和D-甘露糖醇混合使用也存在澄清度的問題，故最終選擇D-甘露糖醇作為本制劑的填充劑。