梁文英，李永濤，于曉靜，王 麗

(1.洛陽(yáng)市婦幼保健院新生兒科，河南 洛陽(yáng) 471000；2.洛陽(yáng)市婦幼保健院兒科，河南 洛陽(yáng) 471000)

新生兒聽力障礙是臨床常見的先天性缺陷，主要指感音、傳音等聽力系統(tǒng)綜合分析功能和神經(jīng)中樞功能障礙及器質(zhì)性病變導(dǎo)致的新生兒聽力損傷或減退[1]。新生兒聽力障礙不僅可造成耳聾，還嚴(yán)重影響患兒語(yǔ)言系統(tǒng)并導(dǎo)致新生兒性格向惡性方向發(fā)展，故需要及早診斷和干預(yù)。新生兒聽力篩查(universal newborn hearing screening，UNHS)是臨床早期發(fā)現(xiàn)新生兒聽力障礙的主要方法，但針對(duì)初篩未通過的新生兒需要延遲至3個(gè)月后再進(jìn)行復(fù)篩，并經(jīng)過聽力學(xué)診斷才可確診，診斷周期需要3～6個(gè)月[2]。另外，針對(duì)大前庭水管綜合征和藥物敏感的新生兒，常規(guī)的聽力篩查無(wú)法有效檢出，需要結(jié)合其他方法明確患兒是否存在聽力障礙。有研究顯示，基因篩查對(duì)判斷新生兒聽力障礙具有較高的提示作用，亦可用于大前庭水管綜合征和藥物敏感的新生兒，是常規(guī)聽力檢查的良好補(bǔ)充[3]。因此，本研究旨在探討遺傳性耳聾基因篩查在新生兒聽力篩查中的應(yīng)用價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2018年10月至2019年10月在洛陽(yáng)市婦幼保健院新生兒科出生的新生兒為研究對(duì)象。新生兒納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)均進(jìn)行聽力篩查和遺傳性耳聾基因篩查；(2)父母民族均為漢族；(3)單胎妊娠；(4)新生兒監(jiān)護(hù)人知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有明顯先天性耳部畸形；(2)中途失訪。本研究共納入新生兒3 887例，男2 011例，女1 876例；胎齡34～40(38.20±2.18)周，出生體質(zhì)量2 320～4 680(3 150.55±510.03)g；剖宮產(chǎn)1 522例，自然分娩2 365例。本研究通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。

1.2 聽力篩查新生兒出生3～5 d時(shí)進(jìn)行聽力初篩，聽力初篩于噪音低于45 dB的相對(duì)安靜環(huán)境進(jìn)行。使用耳聲發(fā)射儀(丹麥AccuScreen公司)進(jìn)行耳聲發(fā)射檢查，使用全自動(dòng)聽性腦干反應(yīng)測(cè)試儀(德國(guó)Maico公司)進(jìn)行自動(dòng)聽性腦干反應(yīng)(auto auditory brainstem response,AABR)檢查；初篩患兒進(jìn)行隨訪，于出生28～42 d進(jìn)行復(fù)查；出生3個(gè)月內(nèi)進(jìn)行腦干聽覺誘發(fā)電位測(cè)試[4]。

1.3 基因篩查新生兒出生72 h后取足跟血，將血液滴在基因篩查專用濾紙片，濾紙片晾干后提取基因組；將提取的DNA溶于生理鹽水，按照耳聾基因篩查試劑盒(上海億康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所)說(shuō)明書進(jìn)行操作，檢測(cè)GJB2、SLC26A4及12SrRNA等3個(gè)基因的突變位點(diǎn)，使用耳聾基因分析系統(tǒng)進(jìn)行基因判斷[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS 22.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析，計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 耳聾基因篩查結(jié)果結(jié)果見表1。3 887例新生兒中，篩查出耳聾基因突變者201例，耳聾基因突變率為5.17%(201/3 887)；其中235delC位點(diǎn)雜合突變占40.30%，IVS7-2A>G位點(diǎn)雜合突變占25.87%，2168A>G位點(diǎn)雜合突變占12.44%，299-300delAT位點(diǎn)雜合突變占11.44%，其余位點(diǎn)突變率均低于10.00%。

表1 201例新生兒耳聾基因突變情況

2.2 不同性別、胎齡、出生體質(zhì)量及分娩方式新生兒耳聾基因突變率比較結(jié)果見表2。不同性別、胎齡、出生體質(zhì)量及分娩方式新生兒耳聾基因突變率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表2 不同性別、胎齡、出生體質(zhì)量及分娩方式新生兒耳聾基因突變率比較

2.3 聽力障礙發(fā)生情況結(jié)果見表3。3 887例新生兒中，經(jīng)聽力學(xué)評(píng)估最終確診聽力障礙28例，聽力障礙發(fā)生率為0.72%(28/3 887)；不同性別、胎齡、出生體質(zhì)量及分娩方式新生兒聽力障礙發(fā)生率比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

表3 不同性別、胎齡、出生體質(zhì)量及分娩方式新生兒聽力障礙發(fā)生率比較

2.4 耳聾基因突變與無(wú)基因突變新生兒聽力障礙發(fā)生率比較201例耳聾基因突變新生兒發(fā)生聽力障礙7例，聽力障礙發(fā)生率為3.48%(7/201)；3 686例無(wú)耳聾基因突變新生兒聽力障礙21例，聽力障礙發(fā)生率為0.57%(21/3 686)；耳聾基因突變新生兒聽力障礙發(fā)生率顯著高于無(wú)耳聾基因突變新生兒，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=18.724，P<0.05)。

3 討論

聽力檢查是診斷新生兒聽力障礙的主要方法，但是該方法尚存在一定的技術(shù)缺陷，例如對(duì)于藥物敏感性耳聾及大前庭水管綜合征不敏感，漏診率較高[6-7]。另外，在大量的遲發(fā)性聽力下降患兒中，亦有患者因自身基因缺陷致病，或由于基因缺陷和基因多態(tài)性造成對(duì)致聾環(huán)境因素易感性增加而致病[8-10]。

遺傳學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，人類基因中有200余個(gè)基因與耳聾有關(guān)，耳聾基因診斷可以篩選基因突變的個(gè)體攜帶者，在缺少有關(guān)耳聾家族史的情況下能對(duì)耳聾個(gè)體及其親屬做出相應(yīng)智能基因的診斷，從而指導(dǎo)優(yōu)生優(yōu)育，盡可能避免同類耳聾的繼續(xù)發(fā)生[9，11]。目前已公認(rèn)Cx-26基因是耳聾較多見的致病基因，且其中75%～85%的遺傳方式為常染色體隱性遺傳，在此基礎(chǔ)上可以運(yùn)用適當(dāng)?shù)幕蚝Y查方法和序列分析進(jìn)行產(chǎn)前基因診斷，如胎兒確為此致病基因的攜帶者，可以規(guī)勸孕婦終止妊娠[11-14]。因此，遺傳性耳聾的基因?qū)W診斷對(duì)于彌補(bǔ)常規(guī)聽力檢查的不足、提高診斷準(zhǔn)確率及指導(dǎo)優(yōu)生優(yōu)育有重要意義。

本研究結(jié)果顯示，3 887例新生兒中，篩查出耳聾基因突變者201例，耳聾基因突變率為5.17%；其中235delC位點(diǎn)雜合突變占40.30%，IVS7-2A>G位點(diǎn)雜合突變占25.87%，2168A>G位點(diǎn)雜合突變占12.44%，299-300delAT位點(diǎn)雜合突變占11.44%，其余位點(diǎn)突變率均低于10.00%；該結(jié)果提示耳聾基因突變具有一定的發(fā)生率，其中以235delC位點(diǎn)雜合突變和IVS7-2A>G位點(diǎn)雜合突變多見。235delC位點(diǎn)雜合突變屬于GJB2基因。GJB2基因?qū)儆陔[性基因，攜帶者并不發(fā)病，但與同樣為攜帶者生育的后代聽力障礙的發(fā)生率高達(dá)25.00%，因此，GJB2基因突變攜帶者需要定期檢查和隨訪，并進(jìn)行基因篩查，這對(duì)優(yōu)婚優(yōu)育具有一定的指導(dǎo)意義[15-17]。IVS7-2A>G位點(diǎn)雜合突變屬于SLC26A4 基因突變，其中大前庭水管綜合征屬于SLC26A4 基因突變，正常條件下SLC26A4 基因突變患兒可能不發(fā)病，但如果出現(xiàn)感冒或頭部撞擊等極易導(dǎo)致聽力損傷，因此，對(duì)于SLC26A4 基因突變的患兒需要提前加強(qiáng)護(hù)理和干預(yù)[18-19]。

本研究進(jìn)一步對(duì)有耳聾基因突變與無(wú)耳聾基因突變新生兒聽力障礙發(fā)生率進(jìn)行了比較，發(fā)現(xiàn)耳聾基因突變新生兒聽力障礙發(fā)生率為3.48%，無(wú)耳聾基因突變新生兒聽力障礙發(fā)生率為0.57%，有耳聾基因突變新生兒聽力障礙發(fā)生率顯著高于無(wú)耳聾基因突變新生兒；該結(jié)果提示遺傳性耳聾基因篩查有助于發(fā)現(xiàn)新生兒聽力損傷并及時(shí)制定干預(yù)方案。常規(guī)的聽力檢查不僅需要相對(duì)安靜的隔音室和配套的專業(yè)醫(yī)療設(shè)備，其檢查結(jié)果也僅針對(duì)現(xiàn)階段的聽覺功能狀態(tài)進(jìn)行分析，對(duì)于未來(lái)可能出現(xiàn)的聽力變化的新生兒篩查尚存在不足和局限性，因而結(jié)合基因篩查結(jié)果并采取有效的干預(yù)措施有助于患兒聽力的保護(hù)和各種功能的正常發(fā)育[20]。針對(duì)已經(jīng)確認(rèn)存在聽力障礙和耳聾的新生兒，在基因突變類型指導(dǎo)下進(jìn)行針對(duì)性的功能訓(xùn)練有助于新生兒的健康成長(zhǎng)。但是，由于耳聾致病因素復(fù)雜多樣，基因篩查也可能存在一定的漏診率，因此，臨床需要結(jié)合聽力篩查和遺傳性耳聾基因篩查，提高診斷準(zhǔn)確率。

綜上所述，遺傳性耳聾基因篩查有助于早期發(fā)現(xiàn)新生兒聽力損傷，通過遺傳性耳聾基因篩查能夠篩查耳聾基因突變，依靠醫(yī)學(xué)干預(yù)預(yù)防耳聾；第一時(shí)間篩查聽力異?；純海l(fā)現(xiàn)遲發(fā)性和藥物性耳聾，有助于提高新生兒聽力篩查的檢出率；還可通過分子生物學(xué)水平對(duì)耳聾進(jìn)行診斷，及早制定干預(yù)措施。