劉曉娟 馬瑞雪 張繁繁 王巧娟

摘 ? 要：在使用標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行檢測(cè)之前，實(shí)驗(yàn)室需證實(shí)能夠正確運(yùn)用標(biāo)準(zhǔn)方法以驗(yàn)證其技術(shù)能力是否達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定要求[1-2]。本試驗(yàn)參照《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鋅的測(cè)定》（GB 5009.14-2017）第一法：火焰原子吸收光譜法測(cè)定特殊醫(yī)學(xué)用途食品中的鋅含量，并對(duì)該方法的準(zhǔn)確度、精密度、檢出限、定量限等參數(shù)進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)分析評(píng)估[3]。

關(guān)鍵詞：鋅 ?方法驗(yàn)證 ?檢出限 ?定量限 ?火焰原子吸收光譜法

經(jīng)研究證明，鋅是微生物、植物和動(dòng)物所必需的微量元素之一，且其存在于人體所有組織、器官、體液及分泌物中。鋅在人體內(nèi)主要以酶的成分組成存在，有近百種酶的活性依賴于鋅的催化作用。盡管缺乏鋅元素會(huì)引起人體生長發(fā)育緩慢、皮膚傷口愈合不良、胃腸道疾病、免疫功能減退等癥狀，但也不能過量攝入鋅元素——會(huì)對(duì)身體產(chǎn)生不同程度的傷害。鋅中毒會(huì)引起腹痛、腹瀉、惡心、嘔吐等不良反應(yīng)[4]，由于鋅的正常和過量的范圍較寬，正常情況下不易發(fā)生鋅中毒，但并不意味著不會(huì)發(fā)生。本研究參照國家標(biāo)椎《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鋅的測(cè)定》（GB 5009.14-2017）第一法：火焰原子吸收光譜法對(duì)特殊醫(yī)學(xué)用途食品中鋅含量的測(cè)定進(jìn)行分析方法驗(yàn)證，證實(shí)該方法在實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的儀器設(shè)備、人員、環(huán)境等條件下能夠獲得滿意的結(jié)果。

1 材料與方法

1.1試劑

硝酸，優(yōu)級(jí)純。

1.2 儀器與設(shè)備

火焰原子吸收分光光度計(jì)（TAS-990），北京普析通用儀器有限公司;鋅空心陰極燈、馬弗爐（SX3-5-12），北京科偉永興儀器有限公司;電熱板（DB-4），國華電器有限公司;電子天平（SQP），賽多利斯科學(xué)儀器（北京）有限公司。

1.3 火焰原子吸收分光光度計(jì)試驗(yàn)條件

波長：213.9nm;狹縫：0.4nm;燈電流：3.0mA;燃燒頭高度：6mm;乙炔流量：1.2L/min;空氣壓力：0.23Mp。

1.4 試驗(yàn)方法

1.4.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液：1000μg/mL，來源于國家有色金屬及電子材料分析測(cè)試中心。

鋅標(biāo)準(zhǔn)中間液：10μg/mL：準(zhǔn)確吸取鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/mL）1.0mL，用5%硝酸溶液定容到100mL容量瓶中，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)系列工作液：分別準(zhǔn)確吸取鋅標(biāo)準(zhǔn)中間液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL置于100mL容量瓶中，并用5%硝酸溶液定容至刻度，混勻后獲得的溶液濃度依次為：0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL。

1.4.2 樣品處理方法

樣品預(yù)處理參照《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中鋅的測(cè)定》（GB 5009.14-2017）第一法：火焰原子吸收光譜法中的干法灰化處理。稱取樣品（精確至0.1mg）置于50mL坩堝中，在電熱板上微火炭化至不再冒煙，冷卻后移入550℃馬弗爐中灰化5小時(shí)成白色灰燼。冷卻至室溫后取出，加入5.0mL（50%）硝酸溶液，在電熱板上加熱使灰燼充分溶解，冷卻至室溫后取下。同時(shí)，處理空白試樣。

1.4.3 分析結(jié)果計(jì)算

式中：X為樣品中鋅的含量，mg/100g;V為樣品消化液的定容體積，mL;f為樣品消化液的稀釋倍數(shù);C為硝酸銀標(biāo)準(zhǔn)滴定液的濃度，μg/mL;m為樣品的稱樣質(zhì)量，g。

2 準(zhǔn)確度、檢出限、定量限、精密度分析

2.1 準(zhǔn)確度

2.1.1 樣品處理

稱取嬰幼兒配方乳粉（703IP08011）樣品按樣品處理方法進(jìn)行處理后移入小燒杯中，并用去二級(jí)水沖洗2～3次，一同轉(zhuǎn)移至50mL容量瓶中用二級(jí)水定容。從該試液中準(zhǔn)確吸取1.0mL置于10mL容量瓶中，用5%硝酸溶液定容——樣品定容體積為50mL，稀釋倍數(shù)為10。

2.1.2 準(zhǔn)確度計(jì)算結(jié)果

準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)曲線：將上述鋅標(biāo)準(zhǔn)系列工作液按質(zhì)量濃度由低到高依次上機(jī)測(cè)試，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)品濃度依次為：0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL;對(duì)應(yīng)的吸光度值分別為0.000、0.020、0.041、0.065、0.086、0.106;標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0.2149x-0.0007，r=0.99967。

將經(jīng)過上述處理的嬰幼兒配方乳粉（703IP08011）樣品按測(cè)定步驟依次上機(jī)測(cè)試，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。經(jīng)驗(yàn)證，該方法的測(cè)量值在質(zhì)控樣品的范圍內(nèi)。

2.2 檢出限、定量限、精密度

2.2.1 樣品處理

選擇不含鋅的樣品，分別稱取6份樣品置于50mL坩堝中，依次編號(hào)1?～6?。于1?～6?中分別加入0.5μg/mL的鋅標(biāo)準(zhǔn)液3.0mL，即每份樣品加入的鋅含量為1.5μg。再按照樣品處理方法進(jìn)行處理后移入小燒杯中，并用去二級(jí)水沖洗2～3次，一同轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中用二級(jí)水定容，即樣品定容體積為25mL、稀釋倍數(shù)為1。

2.2.2 檢出限、定量限、精密度計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)曲線：將上述鋅標(biāo)準(zhǔn)系列工作液按質(zhì)量濃度由低到高依次上機(jī)測(cè)試，以質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。標(biāo)品濃度依次為：0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5μg/mL;對(duì)應(yīng)的吸光度值分別為：0.000、0.032、0.074、0.109、0.138、0.172;標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0.3466x+0.0009，r=0.99877。

將上述加標(biāo)樣品按測(cè)定步驟依次上機(jī)測(cè)試，鋅檢出限、定量限及CV值（CV值越高，樣品的離散程度越大，精密度越低），結(jié)果見表2。

該實(shí)驗(yàn)中被測(cè)組分含量在1～10mg/kg之間，變異系數(shù)CV應(yīng)滿足CV≤7.5[5]，符合要求。

3 結(jié)論

當(dāng)樣品稱樣量為0.5g，定容體積為25mL時(shí)，方法檢出限為1mg/kg，定量限為3mg/kg，可見，試驗(yàn)準(zhǔn)確度、精密度滿足實(shí)驗(yàn)要求。因此，該方法在該實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的儀器設(shè)備、人員、環(huán)境等條件下能夠獲得滿意的結(jié)果。

參考文獻(xiàn)：

[1] 《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力認(rèn)可準(zhǔn)則》（CNAS-CL01：2018）[S].

[2] 《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要》（GB/T 27025-2019）[S].

[3] 李梅，王晴，李樹貴，等.淺談實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法的驗(yàn)證與確認(rèn)[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2018，9（23）：6305-6308.

[4] 葛可佑.中國營養(yǎng)科學(xué)全書上冊(cè)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2004.9.

[5] 《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)》（GB 27404-2008）[S].