張美玉，郝曉亮，方志剛

（遼寧科技大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院，遼寧 鞍山 114000）

鴉膽子是中國藥典中的一味中藥，具有祛毒、消炎等功效，已廣泛應(yīng)用于中醫(yī)治療之中[1-2]。多糖是一類對人體有益的功能型化合物，廣泛存在于中草藥中。目前文獻已報道，多糖類在抗衰老、抗病毒、腫瘤治療、糖尿病治療等方面有良好的應(yīng)用前景[3-4]。目前以中藥為原料進行多糖提取的研究文獻并不多見，本研究希望通過對鴉膽子多糖進行提取，為中藥多糖的提取提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 材料

鴉膽子購于市售；無水甲醇、濃硫酸、苯酚等均為分析純，由遼寧科技大學(xué)生物實驗室提供。

1.2 儀器與設(shè)備

儀器與設(shè)備主要有KQ-250B型超聲波清洗機（昆山市超聲儀器有限公司生產(chǎn)）；HH-2型恒溫水浴鍋（金壇市城東新瑞儀器廠生產(chǎn)）；UV-2000型紫外可見分光光度計（上海分析儀器總廠生產(chǎn)）；JM-A1003電子天平（諸暨市超澤衡器設(shè)備有限公司生產(chǎn)）。

1.3 多糖提取率測定

多糖含量測定采用苯酚—硫酸法[5]，在490 nm波長處，以濃度（mg/mL）為橫坐標，吸光值為縱坐標，作直線回歸，結(jié)果如圖1所示。

圖1 葡萄糖溶液標準曲線Fig.1 The standard curve of glucosesolution

多糖提取率計算公式

式中：C——由葡萄糖標準曲線計算得到的多糖含量，g/mL；V——提取液定容體積，mL。

1.4 正交設(shè)計試驗

依據(jù)單因素試驗篩選出的最優(yōu)條件，采用正交法對料液比、甲醇濃度、超聲提取時間3個因素進行分析，設(shè)計3因素3水平（見表1）的試驗。

表1 最佳因素水平Tab.1 The table of best factor levels

2 試驗結(jié)果討論與分析

2.1 單因素試驗結(jié)果

2.1.1 提取時間的確定

如圖2所示，當超聲提取時間60 min時，鴉膽子多糖的提取率最高。當提取時間繼續(xù)增加時，由于超聲儀器的升溫，可能使多糖物質(zhì)發(fā)生分解，引起提取率下降，超聲提取時間60 min為提取鴉膽子多糖最佳提取時間。

圖2 提取時間對多糖提取率的影響Fig.2 Theeffect of extraction time

2.1.2 料液比的確定

如圖3所示，隨著料液比的增大，鴉膽子提取率迅速增大，當料液比≥1∶40時，維持相對平衡。故1∶40為提取鴉膽子多糖所需最佳料液比。

圖3 料液比對多糖提取率的影響Fig.3 The effect of material-liquid ratio

2.1.3 甲醇濃度的確定

如圖4所示，多糖提取率隨著甲醇濃度的增加呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢，甲醇濃度80%時提取率達到最高，故甲醇濃度80%為提取鴉膽子多糖所需最佳濃度。

圖4 甲醇濃度對多糖提取率的影響Fig.4 Theeffect of methanol concentration

2.2 正交設(shè)計試驗

由表2分析可知：影響試驗結(jié)果的最大因素是料液比，其次是超聲時間和甲醇濃度。提取率最大的方案為A3B2C1，即超聲時間為80 min，料液比為1∶40 g/mL，甲醇濃度為70%。進行驗證試驗，此時得到的提取率為16.35%，與正交試驗結(jié)果得到的數(shù)據(jù)誤差小于1%，證明了正交試驗所得的最佳方案可行。

表2 正交結(jié)果Tab.2 The orthogonal results

3 結(jié)語

本研究針對鴉膽子多糖提取的最優(yōu)工藝進行了研究，通過單因素試驗與正交設(shè)計試驗確定了在超聲時間為80 min，料液比為1∶40 g/mL，甲醇濃度為70%時，鴉膽子多糖提取最佳條件。