王禹，廖明慶，王穎慧，鞏強(qiáng)，徐旺，王嫚，張亞楠，王江峰

1.蘇州大學(xué)法醫(yī)系，江蘇 蘇州 215000；2.中山市公安局，廣東 中山 510080；3.重慶市公安局刑事偵查總隊(duì)，重慶400070

法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)是運(yùn)用昆蟲(chóng)學(xué)及其他自然科學(xué)的理論與技術(shù)，研究并解決司法實(shí)踐中有關(guān)問(wèn)題的一門(mén)科學(xué)[1]。死亡時(shí)間是法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)解決的主要問(wèn)題，根據(jù)尸體上最老的幼期昆蟲(chóng)（卵、幼蟲(chóng)、蛹和蛹?xì)ぃ┑哪挲g所推斷出的時(shí)間稱為最短死亡時(shí)間（minimum post?mortem interval，PMImin）[2]。

目前，法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)已經(jīng)具備較為成熟的應(yīng)用方法，大量的應(yīng)用案例已證實(shí)嗜尸性昆蟲(chóng)用于死亡時(shí)間推斷的價(jià)值[3-7]。現(xiàn)階段，法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)者已經(jīng)可以利用嗜尸性昆蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律較為精確地推斷1～2 個(gè)月內(nèi)的死亡時(shí)間。而面對(duì)更長(zhǎng)死亡時(shí)間的尸體，利用嗜尸性昆蟲(chóng)的群落演替規(guī)律及個(gè)體生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律可推斷死亡時(shí)間范圍，或利用昆蟲(chóng)的季節(jié)分布特性以及其他生物學(xué)特性可推斷死亡時(shí)的月份或季節(jié)，但推斷的準(zhǔn)確性通常會(huì)有所降低[8]。

嗜尸性蠅類能夠在很短的時(shí)間內(nèi)發(fā)現(xiàn)尸體并在尸體上產(chǎn)下后代，其后代在尸體上的存在時(shí)間（年齡）間接反映了尸體的死亡時(shí)間[2]。此外，不同種類的雙翅目、鞘翅目及其他類群昆蟲(chóng)到達(dá)尸體時(shí)間不同，離開(kāi)尸體時(shí)間也不同，這些不同種類的昆蟲(chóng)在尸體上的出現(xiàn)、產(chǎn)卵、卵孵化、低齡長(zhǎng)成高齡、化蛹、羽化、消失等構(gòu)成錯(cuò)綜復(fù)雜的演替規(guī)律，亦能用于死亡時(shí)間推斷[1]。相比利用各種精密儀器及復(fù)雜化學(xué)或生化檢測(cè)的方法，法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)技術(shù)操作簡(jiǎn)單快捷，只要材料齊備，能夠在勘驗(yàn)現(xiàn)場(chǎng)后1～2 h 給出結(jié)果。但法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)也存在不足，對(duì)于昆蟲(chóng)種類的鑒定及影響因素的評(píng)估，需要法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)專業(yè)人員來(lái)實(shí)現(xiàn)，有時(shí)結(jié)果也難以做到準(zhǔn)確。

涉及昆蟲(chóng)證據(jù)的案件復(fù)雜多樣，現(xiàn)場(chǎng)可能位于陸地或水中，室內(nèi)或室外，尸體狀況也多有不同，裸露、被包裹或掩埋、完整或被肢解等。本研究篩選了2017—2021 年已有破案結(jié)果證實(shí)且昆蟲(chóng)證據(jù)比較完整的案件進(jìn)行分析，希望能引起對(duì)法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)研究與鑒定的重視。

1 材料與方法

1.1 案例來(lái)源

整理并篩選2017—2021 年發(fā)生的已有破案結(jié)果證實(shí)且昆蟲(chóng)證據(jù)比較完整的案件11 例。

1.2 昆蟲(chóng)樣本采集和處理

部分案件采用AMENDT 等[2]提出的法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范進(jìn)行昆蟲(chóng)證據(jù)采集。對(duì)于室外尸體，采集區(qū)域包括尸體上、尸體周?chē)?0 m 范圍的地面和地下。對(duì)于室內(nèi)尸體，除了采集尸體上發(fā)現(xiàn)的昆蟲(chóng)，也對(duì)尸體周?chē)募揖?、地毯以及雜物下方的昆蟲(chóng)證據(jù)進(jìn)行仔細(xì)搜尋和采集。采集到的蠅類成蟲(chóng)用裝有分析純的乙酸乙酯毒瓶處死后放置于75%乙醇溶液中保存。蠅類幼蟲(chóng)和蛹先在≥90 ℃的熱水中處理30 s，然后保存在75%乙醇溶液中。甲蟲(chóng)的幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)直接放置于75%乙醇溶液中處死及保存。部分案件限于條件，如現(xiàn)場(chǎng)勘驗(yàn)已經(jīng)完成或現(xiàn)場(chǎng)已經(jīng)清理，或者屬于積案，則由一線辦案人員提供包含清晰昆蟲(chóng)形態(tài)的現(xiàn)場(chǎng)照片進(jìn)行分析。

1.3 死亡時(shí)間推斷方法

將采集的昆蟲(chóng)證據(jù)帶回實(shí)驗(yàn)室，按照以下程序推斷死亡時(shí)間：（1）整理標(biāo)本。其中成蟲(chóng)做成針插標(biāo)本，幼期昆蟲(chóng)保存于75%乙醇溶液中，所有標(biāo)本做好標(biāo)簽并注明案件編號(hào)，標(biāo)本采用范滋德[9]、張生芳等[10]及王江峰[11]的方法進(jìn)行鑒定。（2）確定昆蟲(chóng)的發(fā)育狀態(tài)。確定昆蟲(chóng)處于卵、幼蟲(chóng)（一齡幼蟲(chóng)、二齡幼蟲(chóng)、三齡取食期或離食期）、蛹、空蛹?xì)さ哪膫€(gè)發(fā)育階段。如果樣本為幼蟲(chóng)則還需測(cè)量體長(zhǎng)，蛹則需剝開(kāi)蛹?xì)ご_定蛹內(nèi)的發(fā)育階段。（3）計(jì)算現(xiàn)場(chǎng)的平均溫度。推斷死亡時(shí)間的溫度數(shù)據(jù)均由離案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)最近的氣象站獲取。案例2 中死者在家中使用了取暖器，該案件我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬了取暖裝置對(duì)室內(nèi)溫度的影響，并通過(guò)線性回歸對(duì)現(xiàn)場(chǎng)溫度進(jìn)行了校正。其他案例均采用日平均溫度進(jìn)行PMImin推斷。（4）獲取應(yīng)用數(shù)據(jù)。根據(jù)前面的物種和蟲(chóng)態(tài)查閱相關(guān)應(yīng)用數(shù)據(jù)，推斷死亡時(shí)間所依據(jù)的數(shù)據(jù)來(lái)源于《實(shí)用法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)》[11]。（5）死亡時(shí)間推斷。根據(jù)昆蟲(chóng)證據(jù)的特征選取合適的指標(biāo)，推斷所依據(jù)的指標(biāo)包括發(fā)育歷期、發(fā)育積溫、體長(zhǎng)變化方程、等蟲(chóng)態(tài)線圖、等大線圖、蛹變化圖譜等。由于昆蟲(chóng)入侵尸體前所經(jīng)歷時(shí)間的不確定性，本研究納入的案件中推斷的死亡時(shí)間結(jié)果均為PMImin，即昆蟲(chóng)最早在尸體上產(chǎn)卵（幼）與尸體被發(fā)現(xiàn)時(shí)的時(shí)間間隔。如果尸體上同時(shí)發(fā)現(xiàn)了幾種昆蟲(chóng)的幼期蟲(chóng)態(tài)，則以生長(zhǎng)時(shí)間最長(zhǎng)的昆蟲(chóng)作為推斷該尸體PMImin的指標(biāo)，所采納的物種則被認(rèn)為是案件PMImin的指示物種。

1.4 推斷結(jié)果評(píng)價(jià)

由于大部分案件反饋的結(jié)果只是準(zhǔn)確到“天”，所以本研究以推斷結(jié)果與真實(shí)結(jié)果是否落在同一天作為判斷準(zhǔn)確的標(biāo)準(zhǔn)，如果不在同一天則以相差天數(shù)來(lái)顯示準(zhǔn)確程度。

2 結(jié)果

在11 例案件中（表1），所涉及的昆蟲(chóng)包括大頭金蠅Chrysomya megacephala（Fabricius）、緋顏裸金蠅Chrysomya rufifacies（Macquart）、烏足錫蠅Chrysomya nigripes（Aubertin）、絲光綠蠅Lucilia sericata（Meigen）、厚環(huán)黑蠅Ophyra spinigera（Stein）、廄腐蠅Muscina stabulans（Fallén）、麻蠅（未鑒定具體種類）、蛆癥異蚤蠅Megaselia scalaris（Loew）、黑水虻Hermetia illucens（Linnaeus）、麗腐閻甲Saprinus splendens、大隱翅甲Creophilus maxillosus（Linnaeus）、白腹皮蠹Dermestes maculatus（De Geer）和赤頸郭公甲Necrobia ruficollis（Fabricius）共13 種，幼蟲(chóng)、蛹及蛹?xì)じ飨x(chóng)態(tài)都有。

圖1 案件中發(fā)現(xiàn)的昆蟲(chóng)證據(jù)Fig.1 Insect evidence found at the death scene

由于PMImin推斷依據(jù)的是最老的昆蟲(chóng)，因此尸體上即使出現(xiàn)了多種昆蟲(chóng)，但指示物種通常只是一個(gè)物種的最老蟲(chóng)態(tài)。其中大頭金蠅在5 例案件中被用作指示昆蟲(chóng)，2 例案件的指示昆蟲(chóng)為緋顏裸金蠅，而廄腐蠅、絲光綠蠅、白腹皮蠹和黑水虻，均分別用于1 例案件的死亡時(shí)間推斷中。由于案例5 中的麻蠅并未作為指示昆蟲(chóng)，故沒(méi)有鑒定其種屬。

對(duì)比真實(shí)死亡時(shí)間和推斷結(jié)果可以看出，所有案件死亡時(shí)間均落在推斷的時(shí)間范圍內(nèi)，其中8例（72.73%）的案件推斷結(jié)果與實(shí)際結(jié)果在同一天，1 例推斷結(jié)果比實(shí)際結(jié)果短了2 d，1 例短了3 d，最長(zhǎng)的短了44 d。

3 討論

3.1 嗜尸性昆蟲(chóng)種類及其PMImin推斷范圍

本研究分析了11 例涉及用昆蟲(chóng)推斷死亡時(shí)間的案例，共發(fā)現(xiàn)了13 種嗜尸性昆蟲(chóng)，包含9 種雙翅目和4 種鞘翅目昆蟲(chóng)。雙翅目中的蠅類，特別是麗蠅科種類通常能夠在很短的時(shí)間內(nèi)到達(dá)尸體并產(chǎn)下后代，根據(jù)其生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律可以推斷出1 個(gè)月以內(nèi)的死亡時(shí)間[12-13]。本研究以蠅類作為指示物種的案件有9 例，其中涉及麗蠅科種類有8 例，其中大頭金蠅、緋顏裸金蠅和絲光綠蠅分別作為5 例、2 例和1 例案件的指示物種。廄腐蠅作為一種室內(nèi)環(huán)境的常見(jiàn)種類，在案例2 一門(mén)窗關(guān)閉的現(xiàn)場(chǎng)中被用作PMImin指示物種。對(duì)于超出蠅類一代死亡時(shí)間窗的案例，則需要根據(jù)到達(dá)尸體更晚且發(fā)育時(shí)間更長(zhǎng)的嗜尸性甲蟲(chóng)或者水虻類昆蟲(chóng)推斷死亡時(shí)間。在案例9 中，結(jié)合白腹皮蠹的演替和生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律準(zhǔn)確推斷出了長(zhǎng)達(dá)43 d 的死亡時(shí)間，顯示出嗜尸性甲蟲(chóng)在解決腐敗后期及白骨化尸體死亡時(shí)間的價(jià)值。若案件已經(jīng)超過(guò)昆蟲(chóng)學(xué)所能推斷范圍，則只能給出大致的時(shí)間范圍或發(fā)生的季節(jié)。案例11 中所有蠅類昆蟲(chóng)及黑水虻均已完成發(fā)育，只留下陳舊空蛹?xì)?，尸體環(huán)境無(wú)任何活蟲(chóng)，根據(jù)黑水虻判斷出的死亡時(shí)間不短于54 d，而真實(shí)的死亡時(shí)間卻長(zhǎng)達(dá)98 d。實(shí)踐中，此類案件很多，有的死亡時(shí)間長(zhǎng)達(dá)數(shù)年，這要求我們研究尋求新的方法，如蛹?xì)わL(fēng)化規(guī)律或法醫(yī)微生物學(xué)來(lái)解決此類案件的死亡時(shí)間推斷。

3.2 PMImin推斷指標(biāo)

在PMImin推斷中我們采用的指標(biāo)包括幼蟲(chóng)體長(zhǎng)、發(fā)育歷期和蛹形態(tài)變化指標(biāo)。案例2、案例3、案例8和案例10 采用了幼蟲(chóng)體長(zhǎng)進(jìn)行死亡時(shí)間推斷。在利用幼蟲(chóng)體長(zhǎng)進(jìn)行死亡時(shí)間推斷時(shí)，重點(diǎn)是需要確定幼蟲(chóng)樣本是否經(jīng)過(guò)開(kāi)水處理使其蟲(chóng)體伸展，若幼蟲(chóng)未經(jīng)過(guò)處理則需要對(duì)體長(zhǎng)進(jìn)行校正。在獲取到準(zhǔn)確的幼蟲(chóng)體長(zhǎng)數(shù)據(jù)后，就可結(jié)合溫度數(shù)據(jù)選擇合適的模型進(jìn)行PMImin推斷。以案例2 為例，案件中采集到的廄腐蠅幼蟲(chóng)體長(zhǎng)為13 mm，根據(jù)廄腐蠅幼蟲(chóng)體長(zhǎng)的等大線圖[11]，以y軸25 ℃為起點(diǎn)，作一條與x軸的平行線與“13”的等長(zhǎng)線相交，得到廄腐蠅孵化后時(shí)間為125 h，加上該溫度下廄腐蠅卵的孵化時(shí)間23.8 h，推斷出死者的死亡時(shí)間為148.8 h，即6.2 d。

案例1、案例4、案例9 和案例11 應(yīng)用了發(fā)育歷期推斷死亡時(shí)間。案例1 中，絕大多數(shù)蠅類處于幼蟲(chóng)期，只發(fā)現(xiàn)一只顏色淺紅色的大頭金蠅蛹，說(shuō)明該蛹剛形成不久，該案件中大頭金蠅從卵到蛹的發(fā)育時(shí)間即代表尸體所經(jīng)歷的PMImin。案例4 中，在尸體上發(fā)現(xiàn)了黑水虻陳舊的空蛹?xì)?，表明尸體的死亡時(shí)間必然不短于黑水虻從卵到成蟲(chóng)一世代的發(fā)育時(shí)間。案例9 和案例11 分別根據(jù)白腹皮蠹和絲光綠蠅從卵到蛹的發(fā)育歷期作為PMImin推斷的依據(jù)。

蠅類蛹期占整個(gè)幼期階段的一半，當(dāng)蛹?xì)ゎ伾兩睿踔猎谟細(xì)ゎ^胸交界處出現(xiàn)凹陷時(shí)，則說(shuō)明蛹已經(jīng)發(fā)育了一段時(shí)間。此時(shí)若單純依據(jù)從卵到蛹的發(fā)育歷期數(shù)據(jù)進(jìn)行推斷，精確度必然不佳。這種情況下若想獲得更精確的PMImin推斷結(jié)果則需解剖蛹?xì)?，根?jù)蛹內(nèi)的發(fā)育進(jìn)程進(jìn)一步推斷。案例5～7 采納了蛹內(nèi)形態(tài)變化的指標(biāo)。這種形態(tài)變化非常直觀，即使不是法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)研究的非專業(yè)人員也能辨認(rèn)，并判斷蛹所處階段。未來(lái)應(yīng)加強(qiáng)此方面研究，結(jié)合蛹期差異基因表達(dá)變化規(guī)律，以提升涉及蠅蛹案件死亡時(shí)間推斷的精確度[14-15]。

3.3 環(huán)境對(duì)死亡時(shí)間推斷的影響

對(duì)于室內(nèi)案件，現(xiàn)場(chǎng)的溫度測(cè)量通常很有必要，因?yàn)槭覂?nèi)空氣的流通性一般較差且屋內(nèi)使用的電器設(shè)備很可能會(huì)改變現(xiàn)場(chǎng)的溫度。如案例2 中的房間溫度被電暖器所改變，比環(huán)境溫度高約4 ℃。為解決該案件，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬了取暖裝置對(duì)室內(nèi)溫度的影響，并通過(guò)線性回歸對(duì)現(xiàn)場(chǎng)溫度進(jìn)行了校正，進(jìn)而準(zhǔn)確推斷出了死亡時(shí)間。對(duì)于室外現(xiàn)場(chǎng)，則一般只需要從案發(fā)現(xiàn)場(chǎng)最近的氣象站調(diào)取氣象溫度或從國(guó)家氣象科學(xué)中心調(diào)取離現(xiàn)場(chǎng)最近的氣象站的溫度。如果條件允許，對(duì)現(xiàn)場(chǎng)溫度用帶內(nèi)存的電子溫濕度儀測(cè)定一段時(shí)間以便溫度校正。

本研究中的所有案件均是依據(jù)昆蟲(chóng)的發(fā)育規(guī)律推斷出的PMImin結(jié)果。PMImin排除了昆蟲(chóng)入侵前期的不確定性，但推斷結(jié)果必然短于真實(shí)的死亡時(shí)間[2]。案例5 和案例11 均發(fā)生在冬季，蠅類在較低溫度下入侵尸體的時(shí)間會(huì)發(fā)生延遲，這可能是這兩例案件推斷結(jié)果比真實(shí)結(jié)果偏短的主要原因。有時(shí)為了減少偏差，在實(shí)際辦案中會(huì)根據(jù)尸體所處的具體環(huán)境進(jìn)行綜合分析。如在案例11 中，推斷出的PMImin是10.0 d，但考慮到低溫對(duì)蠅類活動(dòng)的影響，筆者在PMImin的基礎(chǔ)上加了2.0 d 的昆蟲(chóng)入侵前期時(shí)間，即12.0 d 作為參考意見(jiàn)，而真實(shí)的死亡時(shí)間就是12.0 d。

不同昆蟲(chóng)對(duì)外界環(huán)境的反應(yīng)不同，昆蟲(chóng)的生物學(xué)習(xí)性有時(shí)也可以作為死亡時(shí)間推斷的依據(jù)[16]。如昆蟲(chóng)的季節(jié)分布規(guī)律有時(shí)會(huì)被法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)研究人員用于刻畫(huà)死亡時(shí)間發(fā)生的范圍[17]。李學(xué)博等[18]根據(jù)肥軀金蠅和巨尾阿麗蠅的季節(jié)分布特性，推斷出2 種蠅類最早出現(xiàn)的時(shí)間，2 月底至3 月初為死者最可能的死亡時(shí)間，后經(jīng)偵查證實(shí)與真實(shí)結(jié)果一致。而HU 等[5]報(bào)道的案例中，在行李箱中發(fā)現(xiàn)1 具保存型尸體，其上有黑水虻和蛆癥異蚤蠅，但未發(fā)現(xiàn)麗蠅科種類。分析死者可能在寒冷的季節(jié)逐漸腐敗，當(dāng)天氣轉(zhuǎn)暖麗蠅開(kāi)始活動(dòng)時(shí)，尸體已經(jīng)高度腐敗，難以吸引以喜取食新鮮尸體的麗蠅，從而推斷出死亡時(shí)間始于冬季的開(kāi)始，結(jié)果與真實(shí)結(jié)果吻合。

4 展 望

雖然法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)已經(jīng)在命案現(xiàn)場(chǎng)死亡時(shí)間推斷中發(fā)揮作用，但遠(yuǎn)沒(méi)有達(dá)到普遍應(yīng)用的程度，仍需進(jìn)一步研究以提高法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)死亡時(shí)間推斷的精確度和適用范圍：（1）通過(guò)研究得到最精確的昆蟲(chóng)發(fā)育數(shù)據(jù)，進(jìn)一步拓展研究對(duì)象的范圍，加強(qiáng)基于差異基因表達(dá)和化學(xué)特征物的昆蟲(chóng)分子年齡推斷研究。（2）持續(xù)對(duì)昆蟲(chóng)演替規(guī)律進(jìn)行研究，開(kāi)展昆蟲(chóng)對(duì)尸體入侵機(jī)理的研究，解決昆蟲(chóng)入侵前期推斷死亡時(shí)間的難題。加強(qiáng)對(duì)尸體腐敗過(guò)程及昆蟲(chóng)演替規(guī)律的理解，形成不同昆蟲(chóng)在不同尸體腐敗階段到達(dá)順序的時(shí)間框架。明確不同物種的不同蟲(chóng)態(tài)會(huì)出現(xiàn)在尸體環(huán)境的位置，確保在真實(shí)案件標(biāo)本采集時(shí)更有針對(duì)性，提高調(diào)查效率。（3）加強(qiáng)學(xué)科交融，通過(guò)光譜學(xué)、組織RNA 降解、尸體微生物手段及昆蟲(chóng)學(xué)方法來(lái)共同鎖定更準(zhǔn)確的時(shí)間，利用電子計(jì)算機(jī)技術(shù)來(lái)簡(jiǎn)化法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)的應(yīng)用。相信隨著法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)基礎(chǔ)研究的不斷深入，法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)將得到更普遍的應(yīng)用。