常 青，楊藝煒，李英梅，張 鋒，陳志杰，張淑蓮

(陜西省生物農(nóng)業(yè)研究所, 陜西省植物線蟲(chóng)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西 西安 710043)

獼猴桃(Actinidiachinensis)營(yíng)養(yǎng)豐富、口味獨(dú)特，深受國(guó)內(nèi)外消費(fèi)者喜愛(ài)，市場(chǎng)需求旺盛，潛在經(jīng)濟(jì)效益巨大。近年來(lái)，隨著多個(gè)省份先后出臺(tái)了促進(jìn)產(chǎn)業(yè)發(fā)展的相關(guān)政策，我國(guó)獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅速。然而，由于獼猴桃人工馴化時(shí)間相對(duì)較短，在我國(guó)商業(yè)化栽培的時(shí)間僅有30余年，因此相關(guān)科學(xué)研究滯后于產(chǎn)業(yè)發(fā)展需求，特別是病蟲(chóng)害研究方面仍有待進(jìn)一步加強(qiáng)[1]。由根結(jié)線蟲(chóng)(Meloidogynespp.)引起的獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病就是一種發(fā)病隱蔽的獼猴桃根部病害[2～4]。根結(jié)線蟲(chóng)常年在地下活動(dòng)，可重復(fù)危害獼猴桃苗期及成株期的新生幼嫩根尖，導(dǎo)致整株植物表現(xiàn)出植株矮小，葉色發(fā)黃、葉緣卷曲，坐果少，果小畸形，生長(zhǎng)衰弱甚至死亡等現(xiàn)象[5, 6]。在個(gè)別發(fā)病嚴(yán)重的地區(qū)，獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病一度造成毀園毀樹(shù)的惡果，嚴(yán)重威脅獼猴桃生產(chǎn)安全。近年來(lái)，獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病在我國(guó)多個(gè)省區(qū)，如陜西、貴州、湖南、湖北、福建、河南等地普遍發(fā)生，特別是在陜西、貴州等地的部分苗圃中發(fā)生極為普遍，已經(jīng)成為嚴(yán)重制約我國(guó)獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要病害[6～9]。

作為一種重要的土傳病害，帶病種苗的調(diào)運(yùn)栽植是獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的主要傳播途徑[10]。獼猴桃?guī)Р》N苗的調(diào)運(yùn)栽植不僅會(huì)導(dǎo)致獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病發(fā)生面積不斷擴(kuò)大，同時(shí)，隨著種植年限的增長(zhǎng)，病原線蟲(chóng)數(shù)量不斷積累，病害發(fā)生程度還將不斷加重。盡管獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病發(fā)生范圍不斷擴(kuò)大，經(jīng)濟(jì)危害性巨大，但是目前生產(chǎn)中缺乏行之有效的獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病防控措施。大量早期文獻(xiàn)報(bào)道可以使用克線磷、甲基異柳磷、呋喃丹等藥劑防治獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病[5, 11, 12]，但是這些藥劑大多都屬于高毒高殘留化學(xué)農(nóng)藥，不僅會(huì)對(duì)環(huán)境，也會(huì)對(duì)農(nóng)產(chǎn)品造成嚴(yán)重污染，目前都已被禁止用于獼猴桃生產(chǎn)中。而獼猴桃作為多年生藤本果樹(shù)，無(wú)法使用輪作倒茬、土壤消毒處理等蔬菜根結(jié)線蟲(chóng)病常用防控措施。因此，本研究基于產(chǎn)業(yè)需要，從獼猴桃病苗處理與田間種植管理著手，開(kāi)展了獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病綠色防控技術(shù)研究，提出了根系修剪、溫湯浸泡、噴施氨基寡糖素、間作萬(wàn)壽菊(Tagete erecta)等多種綠色防治措施，為生產(chǎn)中對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病開(kāi)展綠色防治提供了重要技術(shù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本研究從陜西省某獼猴桃育苗基地，選取發(fā)病苗圃中的獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)帶病種苗于3月下旬移栽至陜西省西安市鄠邑區(qū)此前從未發(fā)生過(guò)根結(jié)線蟲(chóng)病的田塊中用于試驗(yàn)，至當(dāng)年11月生長(zhǎng)季結(jié)束后調(diào)查各獼猴桃植株的根結(jié)線蟲(chóng)病發(fā)生情況。本研究所用所有病苗初始病情指數(shù)均為1級(jí)，獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病輕發(fā)生。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 根系修剪 本研究根據(jù)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病主要發(fā)生在幼嫩新生根系的特征，對(duì)根系設(shè)置了3種不同程度的修剪處理：Ⅰ留毛根，即摘除根系中全部根結(jié)，Ⅱ留側(cè)根，即所有毛細(xì)根全部剪除，Ⅲ留主根，即將除主根外的所有根系全部剪除。對(duì)獼猴桃根系進(jìn)行不同程度修剪處理后，用2 000倍AB生根粉溶液蘸根30 s。以不進(jìn)行任何修剪，僅蘸生根粉的處理為對(duì)照。每處理20株，處理后按照30 cm株距栽植于試驗(yàn)田中，各處理四周設(shè)2米以上隔離區(qū)，待當(dāng)年生長(zhǎng)季結(jié)束后調(diào)查各處理植株存活率，完整挖出獼猴桃植株根系調(diào)查病情指數(shù)，并計(jì)算防治效果。

1.2.2 溫湯浸泡 試驗(yàn)共設(shè)計(jì)4種不同溫度，分別為40°C、45°C、50°C、55°C，在栽植前將獼猴桃病苗根系浸入對(duì)應(yīng)溫度的溫湯中浸泡30 min，以不對(duì)根系進(jìn)行任何處理的植株為對(duì)照組。每個(gè)處理20株，將處理后苗木按照30 cm株距栽植于試驗(yàn)田中，各處理四周設(shè)2 m以上隔離區(qū)，待生長(zhǎng)季結(jié)束后調(diào)查不同溫度處理后植株的存活率及病情指數(shù)，并計(jì)算防治效果。

1.2.3 噴施氨基寡糖素 將帶病獼猴桃苗木按照株行距30 cm×80 cm栽植于試驗(yàn)田中，試驗(yàn)區(qū)面積約100 m2。待獼猴桃病苗定殖后，一半將5%氨基寡糖素水劑稀釋800倍后均勻噴施于葉片正反面進(jìn)行氨基寡糖素處理，另一半以僅噴施等量水的處理為對(duì)照組。待生長(zhǎng)季結(jié)束后，以每個(gè)處理取20株苗木分別對(duì)氨基寡糖素處理組與對(duì)照組的病情指數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并計(jì)算病害防治效果。

1.2.4 間作萬(wàn)壽菊 將帶病獼猴桃苗木按照株行距30 cm×100 cm栽植于試驗(yàn)田中，試驗(yàn)區(qū)面積約100 m2，其中30 m2在獼猴桃植株行間人工種植萬(wàn)壽菊為間作萬(wàn)壽菊處理組，30 m2以田間自生草處理，其余田間徹底清耕作為對(duì)照組。待生長(zhǎng)季結(jié)束后，在每個(gè)小區(qū)內(nèi)調(diào)查20株獼猴桃苗木的發(fā)病情況，統(tǒng)計(jì)病情指數(shù)，并計(jì)算病害防治效果。

1.2.5 獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病防治效果調(diào)查 依據(jù)根系根結(jié)發(fā)生情況按照0～5級(jí)分級(jí)系統(tǒng)對(duì)各株病害發(fā)生程度進(jìn)行調(diào)查[13]。分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)為0級(jí)：健康，無(wú)根結(jié)；1級(jí)：0～10%的根系有根結(jié)，但根結(jié)互不相連；2級(jí)：11%～30%的根系有根結(jié)，少數(shù)根結(jié)相連；3級(jí)：31%～50%的根系有根結(jié)，且1/2以下根結(jié)相連，部分主側(cè)根畸形；4級(jí)：51%～75%的根系有根結(jié)，且1/2以上根結(jié)相連，部分主側(cè)根畸形；5級(jí)：75%以上的根系有根結(jié)，多數(shù)根結(jié)相連，多數(shù)主側(cè)根畸形。

苗木存活率(%)=存活植株數(shù)/處理植株數(shù)×100。

發(fā)病率(%)=發(fā)病株數(shù)/調(diào)查株數(shù)×100。

病情指數(shù)=[Σ( 各級(jí)病株數(shù)×相應(yīng)級(jí)數(shù)值) /調(diào)查總株數(shù)×5]×100。

相對(duì)防效(%)=[( 對(duì)照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)) /對(duì)照區(qū)病情指數(shù)]×100。

2 結(jié)果與分析

2.1 根系修剪對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的防治效果

研究發(fā)現(xiàn)對(duì)帶病獼猴桃種苗根系進(jìn)行不同程度的修剪基本不影響植株存活率，在被修剪至僅剩主根的情況下，獼猴桃種苗在當(dāng)年仍可從主根生長(zhǎng)出新的幼嫩根系，從而正常定植生長(zhǎng)，但對(duì)帶病獼猴桃種苗根系進(jìn)行修剪可以有效減輕獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的發(fā)生(表 1)。試驗(yàn)結(jié)果表明，與對(duì)照組相比，不同程度剪根處理防控效率在45.45%～90.91%。其中將所有毛細(xì)根及側(cè)根全部剪除，僅保留主根的修剪方式對(duì)病害防治效果最佳，發(fā)病率為10%，防效可達(dá)90.91%。

表1 根系修剪對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病防治效果

2.2 溫湯浸泡對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的防治效果

試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)使用55°C 溫湯浸泡帶病獼猴桃種苗根系后，供試獼猴桃種苗全部死亡，說(shuō)明該處理對(duì)獼猴桃種苗有致死作用(表2)。在50°C溫湯浸泡處理后，獼猴桃存活率為60%，但所有存活植株均不發(fā)病。在45 °C 與40°C處理后，獼猴桃存活率均為100%，防治效果分別為93.10%與75.86%，可以看出45 °C下30 min溫湯浸泡可以在保證苗木成活的前提下，有效控制獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的發(fā)生為害，能夠作為病苗處理的有效方法之一。

表2 溫湯浸泡對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病防治效果

2.3 氨基寡糖素對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的防治效果

研究表明通過(guò)向獼猴桃葉片噴施氨基寡糖素可以有效降低獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的發(fā)病率，對(duì)于降低獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的病情指數(shù)具有顯著作用，相對(duì)防效可達(dá)52%，可以作為提高植株抗性，減輕危害的輔助方法(表3)。

表3 氨基寡糖素對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病防治效果

2.4 間作萬(wàn)壽菊對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的防治效果

研究發(fā)現(xiàn)與清耕對(duì)照組相比，田間自生草對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的發(fā)病率無(wú)顯著影響，而間作萬(wàn)壽菊可以使獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病發(fā)病率下降(表4)。同時(shí)，田間自生草處理對(duì)于獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的病情指數(shù)無(wú)顯著影響，而間作萬(wàn)壽菊可以降低病情指數(shù)，相對(duì)防效達(dá)到36%，可以起到防治獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的效果。

表4 間作萬(wàn)壽菊對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病防治效果

3 結(jié)論與討論

健康優(yōu)質(zhì)獼猴桃苗木是獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展的基礎(chǔ)，而獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病作為一種嚴(yán)重制約獼猴桃產(chǎn)業(yè)發(fā)展的重要土傳病害，帶病種苗的調(diào)運(yùn)栽培是病害傳播的主要途徑。如本研究中各對(duì)照組試驗(yàn)結(jié)果所示，如果不對(duì)病苗進(jìn)行防治處理，隨著帶病種苗的定植生長(zhǎng)，根結(jié)線蟲(chóng)就自然得以傳播，且隨著生長(zhǎng)年限的延長(zhǎng)，病害發(fā)生程度還會(huì)逐漸加重，進(jìn)而造成更大的危害。因此，研發(fā)獼猴桃種苗根結(jié)線蟲(chóng)病防治技術(shù)對(duì)于促進(jìn)產(chǎn)業(yè)健康持續(xù)發(fā)展具有重要意義。本研究首次開(kāi)發(fā)了根系修剪與溫湯浸泡處理兩種生態(tài)環(huán)保型獼猴桃種苗根結(jié)線蟲(chóng)病防控措施。這兩種措施都具有很強(qiáng)的可操作性，并且對(duì)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病表現(xiàn)出了良好的防治效果。其中，在獼猴桃種苗根系修剪過(guò)程中將所有幼嫩根系全部剪除，僅保留主根的處理方式對(duì)病害防治效果最好，操作也相對(duì)簡(jiǎn)單，方法易于掌握，具有很強(qiáng)的推廣應(yīng)用價(jià)值。溫湯浸泡處理結(jié)果顯示，50°C溫湯浸泡30 min可徹底防控獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的發(fā)生，但是會(huì)對(duì)獼猴桃種苗造成損傷，導(dǎo)致存活率下降；降低溫湯處理的溫度可以保證獼猴桃植株的存活率，但是對(duì)病害的防治效率會(huì)有所下降。本研究中45 °C浸泡30min是最理想的溫湯浸泡處理模式，但后續(xù)仍可要通過(guò)進(jìn)一步豐富溫湯溫度與浸泡時(shí)間的組合，從而篩選出兼顧植株存活率與防治效果的溫湯處理模式，并在生產(chǎn)上進(jìn)行推廣應(yīng)用。

在獼猴桃生長(zhǎng)期內(nèi)，可用于根結(jié)線蟲(chóng)病防治的藥劑十分有限[13]，因此本研究著重研發(fā)獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的非化學(xué)防治技術(shù)。氨基寡糖素是一種新型綠色安全的植物免疫誘抗劑，能夠通過(guò)激活植物自身的免疫反應(yīng)使植物獲得系統(tǒng)性抗性，從而達(dá)到抗逆、抗病和增產(chǎn)的作用，符合我國(guó)綠色植保的發(fā)展要求[14]。本研究結(jié)果表明使用氨基寡糖素對(duì)于防治獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病具有一定作用，但由于本研究中僅在獼猴桃定殖后噴施過(guò)一次氨基寡糖素，因此防治效率僅為52%，后續(xù)仍需進(jìn)一步優(yōu)化氨基寡糖素的使用方式與使用時(shí)期從而提高病害防治效率。田間生草對(duì)于改善果園土壤質(zhì)量、調(diào)控果園小氣候、改善果實(shí)品質(zhì)等具有重要意義，目前已經(jīng)逐步被應(yīng)用于獼猴桃果園管理中[15～17]。但據(jù)作者調(diào)查，當(dāng)前獼猴桃果園田間生草主要用的是黑麥草與鼠茅草等，盡管這些植物不會(huì)被根結(jié)線蟲(chóng)寄生，為非寄主作物，但其本身對(duì)防治根結(jié)線蟲(chóng)也無(wú)任何作用。大量研究發(fā)現(xiàn)萬(wàn)壽菊具有抗線蟲(chóng)或殺線蟲(chóng)作用，與番茄、黃瓜、煙草等作物進(jìn)行間作或套作可以有效防控根結(jié)線蟲(chóng)病的發(fā)生[18～20]。本研究發(fā)現(xiàn)在獼猴桃果園內(nèi)間作萬(wàn)壽菊同樣可以起到防治根結(jié)線蟲(chóng)病的效果，并對(duì)獼猴桃植株生長(zhǎng)無(wú)明顯影響，因此在獼猴桃果園內(nèi)間作萬(wàn)壽菊也是獼猴桃根結(jié)線蟲(chóng)病的重要綠色防控措施。