馬聰

【摘要】目的：探討羊水細(xì)胞熒光原位雜交技術(shù)與核型檢測結(jié)果的分析。方法：選取2019年6月至2020年6月，運(yùn)用熒光原位雜交技術(shù)檢測的120例19-29周孕婦的未培養(yǎng)羊水細(xì)胞，并對其進(jìn)行核型檢測結(jié)果分析。結(jié)果：120例未培養(yǎng)羊水細(xì)胞運(yùn)用熒光原位雜交技術(shù)檢測成功119例，其中檢出正常106例，數(shù)目異常13例，與常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)核型分析結(jié)果一樣。此外3例正常變異，1例嵌合體，還有1例21三體沒有被該項技術(shù)檢測出來。結(jié)論：運(yùn)用熒光原位雜交技術(shù)檢測未培養(yǎng)羊水細(xì)胞染色體數(shù)目異常，不僅操作簡單快讀，而且所運(yùn)用的樣本數(shù)量也較少，其能有效補(bǔ)充羊水細(xì)胞染色體核型分析。因此熒光原位雜交技術(shù)聯(lián)合羊水細(xì)胞培養(yǎng)，能夠好地服務(wù)于產(chǎn)前診斷。

【關(guān)鍵詞】羊水細(xì)胞;熒光原位雜交技術(shù);核型檢測;結(jié)果

【中圖分類號】R714.15 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A 【DOI】10.12332/j.issn.2095-6525.2021.03.251

出生缺陷對人類的健康造成了非常嚴(yán)重的威脅，同時也為社會及患者的家庭到來了極大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因為遺傳原因致使出生缺陷占七成左右，而最為常見的遺傳因素就是染色體畸形[1]。因為染色體疾病沒有辦法治療，因此產(chǎn)前診斷染色體疾病，對于防止出生缺陷至關(guān)重要。經(jīng)過產(chǎn)前的有效篩查和診斷，降低該類新生兒出生的概率，能有效為社會及患兒家庭減輕一定的負(fù)擔(dān)[2]?；诖?，本院此次研究分析了羊水細(xì)胞熒光原位雜交技術(shù)與核型檢測結(jié)果，詳細(xì)報告如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料

本研究以2019年6月至2020年6月的120例人員將其作為研究對象?；颊咦钚∧挲g為19歲，最大年齡為39歲，平均年齡為（28.89±9.12）歲。孕周為19-29周。對所有患者同時做羊水細(xì)胞培養(yǎng)及熒光原位雜交技術(shù)。產(chǎn)前診斷指征包括：（1）孕中期母血清篩查高風(fēng)險50例;（2）孕婦年齡高于35歲的患者25例;（3）不良孕產(chǎn)史6例;（4）超聲產(chǎn)前篩查4例，其中有1例胎兒脖頸后透明帶變厚;（5）孕婦外周血無創(chuàng)胎兒DNA檢測存在高風(fēng)險的患兒2例;（6）其他原因?qū)е?0例?；颊呷恳押炇鹆水a(chǎn)前診斷知情同意書。

1.2方法

1.2.1常規(guī)羊水細(xì)胞培養(yǎng)，在B超的指引下，將淡黃色的清亮羊水抽取25毫升，將其分為兩份，運(yùn)用熒光原位雜交技術(shù)檢測的患者使用5毫升，運(yùn)用常規(guī)細(xì)胞染色體核型分析的患者使用20毫升，在培養(yǎng)8-10天以后添加秋水仙素，在5小時以后收獲，并制片，G顯帶以后，對其進(jìn)行染色體核型分析，計數(shù)為30個細(xì)胞，對5個核型進(jìn)行分析。

1.2.2熒光原位雜交技術(shù)檢測未培養(yǎng)羊水細(xì)胞染色體非整倍體，運(yùn)用國產(chǎn)的該技術(shù)探針。未培養(yǎng)羊水細(xì)胞對照公司提供的操作步驟處理之后進(jìn)行熒光原位雜交技術(shù)分析。對每組探針進(jìn)行有效觀察，隨機(jī)技術(shù)不能少于50個細(xì)胞。整倍體樣本熒光原位雜交技術(shù)檢測結(jié)果應(yīng)有大于90%的間期核計數(shù)為整倍體;不是整倍體樣本熒光原位雜交技術(shù)檢測必須不能少于60%的間期合計數(shù);如果計數(shù)結(jié)果接近10%，不能將嵌合體情況排除，所以必須添加計數(shù)到200個細(xì)胞核。

2 結(jié)果

2.1熒光原位雜交技術(shù)的檢測結(jié)果

120例羊水細(xì)胞成功股119例，有1例因為細(xì)胞太少沒有辦法進(jìn)行判讀。

2.2對比羊水培養(yǎng)染色體核型分析及熒光原位雜交技術(shù)結(jié)果

羊水培養(yǎng)一次成功119例，成功率高達(dá)99.17%。1例經(jīng)唐氏篩查21三體高風(fēng)險標(biāo)本，因孕期大于23周，導(dǎo)致羊水培養(yǎng)失敗，之后進(jìn)行了無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測，結(jié)果呈低風(fēng)險狀態(tài)，熒光原位雜交技術(shù)檢測結(jié)果正常。

培養(yǎng)成功的檢測出正常核型為101例，21三體9例，18三體2例，47，XXX1例，47XXY1例，45，X1例。還有1例21三體運(yùn)用熒光原位雜交技術(shù)沒有檢測出來，但羊水培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)其核型為46，XN，rob（21;21）（q10;q10）。有1例染色體嵌合體核型，并不在熒光原位雜交技術(shù)的檢測范圍里，經(jīng)B超檢查之后最終停止妊娠。

3 討論

綜上所述，當(dāng)前已經(jīng)有很多技術(shù)在產(chǎn)前診斷中被運(yùn)用，但是都有一定的局限性，并且價格昂貴，同時也沒有辦法確定多少基因拷貝數(shù)的變異能致使胎兒異常。但自從熒光原位雜交技術(shù)檢測出未培養(yǎng)羊水間期細(xì)胞染色體數(shù)目異常開始，該技術(shù)已經(jīng)逐漸成為產(chǎn)前診斷的主要方法[3]。其主要運(yùn)用熒光標(biāo)記探針對21三體、18三體、13三體及性染色體非整倍體等常見染色體畸形進(jìn)行快速檢測。其不僅技術(shù)診斷快速，而且具有較高的成功率，是傳統(tǒng)核型分析非常重要的一個補(bǔ)充。

在以往羊水細(xì)胞培養(yǎng)的模型分析中，最少要有20毫升羊水才能有效進(jìn)行雙培養(yǎng)體系[4]。此外，羊水細(xì)胞培養(yǎng)核型分析能不能成功與細(xì)胞培養(yǎng)過程中，克隆細(xì)胞、收獲細(xì)胞及分裂細(xì)胞等多少有非常直接的聯(lián)系，并且操作步驟較多，非常有可能導(dǎo)致失敗，而且等報告的時間也相對較長，一般要3周左右。而熒光原位雜交技術(shù)檢測，相對常規(guī)檢測而言，不僅需要的羊水樣本量少[5]，而且不需要對羊水細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，雜交信號簡單直觀，計數(shù)相對也比較容易，報告也能快速出來。一般48小時以內(nèi)就能出報告，操作步驟簡單，極易辨別結(jié)果。

但是熒光原位雜交技術(shù)在染色體數(shù)目及性染色異常的診斷過程中，可取代部分，但不能完全取代以往的染色體核型分析。伴隨著產(chǎn)前篩查及診斷的不斷發(fā)展，提供了更多的檢測技術(shù)。而熒光原位雜交技術(shù)已然成為非常重要的產(chǎn)前診斷方式之一，可與多種檢測手段相結(jié)合，進(jìn)而有效提升產(chǎn)前診斷的準(zhǔn)確率及效率，并更高效地滿足臨床需要。

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