惠娜娜，李繼平，王 立 ，鄭 果，李培玲，郭子坤

(1.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 植物保護(hù)研究所，蘭州 730070；2.農(nóng)業(yè)部天水作物有害生物科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，甘肅天水 741200)

馬鈴薯 [SolanumtuberosumL.]是僅次于水稻、玉米和小麥的世界第四大重要糧食作物。中國(guó)是全球馬鈴薯的最大生產(chǎn)國(guó)，甘肅省是中國(guó)重要的馬鈴薯脫毒種薯繁育、商品薯生產(chǎn)及加工的重要基地[1]。甘肅地處中國(guó)西北干旱冷涼區(qū)，得天獨(dú)厚的地理環(huán)境造就當(dāng)?shù)伛R鈴薯淀粉含量高、食用風(fēng)味佳、口味獨(dú)特的優(yōu)良品質(zhì)，現(xiàn)已形成定西市、蘭州市為核心的中部高淀粉及菜用型區(qū)域，張掖市為核心的河西灌區(qū)與以臨夏州、白銀市為核心的沿黃灌區(qū)全粉、薯?xiàng)l(薯片)加工型馬鈴薯區(qū)域，隴南市西北部、天水南部為核心的早熟菜用型馬鈴薯區(qū)域和高海拔脫毒種薯生產(chǎn)區(qū)域[2]，優(yōu)勢(shì)產(chǎn)區(qū)占到70%以上。馬鈴薯產(chǎn)業(yè)已成為當(dāng)?shù)貛?dòng)經(jīng)濟(jì)發(fā)展、促進(jìn)農(nóng)業(yè)增效、農(nóng)民增收、保障糧食安全的特色支柱產(chǎn)業(yè)[3]。隨著產(chǎn)業(yè)升級(jí)及種植結(jié)構(gòu)的調(diào)整，馬鈴薯種植面積不斷擴(kuò)大，加之氣候條件和防治手段落后使得馬鈴薯病害在局部地區(qū)個(gè)別年份爆發(fā)危害，嚴(yán)重影響馬鈴薯產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。2017-2018年筆者對(duì)甘肅省不同生態(tài)區(qū)馬鈴薯病害發(fā)生情況進(jìn)行調(diào)查，發(fā)現(xiàn)河西地區(qū)前期馬鈴薯主要真菌病害有黑痣病、早疫病，后期主要有黑痣病、晚疫病、枯萎病和黃萎病，其中早疫病、黑痣病、晚疫病發(fā)生較重。中東部地區(qū)前期主要有黑痣病、早疫病、后期為晚疫病和黑痣病。

目前，馬鈴薯病害主要依靠化學(xué)防治，單一藥劑的頻繁使用易產(chǎn)生抗藥性，降低防治效果。在實(shí)際生產(chǎn)應(yīng)用中，通過(guò)限制使用頻次、使用復(fù)配產(chǎn)品，以及與不同作用機(jī)理的殺菌劑交替使用，以延緩抗性的產(chǎn)生和發(fā)展，其中復(fù)配是用于規(guī)避風(fēng)險(xiǎn)的主要措施[4]。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和人們對(duì)食品安全的日益重視，利用生物殺菌劑防治植物病害等綠色防控手段越來(lái)越受到業(yè)界的關(guān)注[5]。因此，在本試驗(yàn)中選用100萬(wàn)孢子/g寡雄腐霉WP、0.3%四霉素AS和3%中生菌素WG3種生物農(nóng)藥及50%錳鋅·氟嗎啉WP、20%烯肟·戊唑醇SC 和30%苯甲·嘧菌酯SC3種復(fù)配劑針對(duì)馬鈴薯晚疫病、早疫病和黑痣病病原菌開(kāi)展室內(nèi)毒力試驗(yàn)，旨在篩選出適宜甘肅省馬鈴薯病害的理想防治藥劑，為該省馬鈴薯病害綜合治理提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材 料

供試菌株：馬鈴薯晚疫病菌(Phytophthorainfestans)、馬鈴薯早疫病菌(Alternariasolani)、馬鈴薯黑痣病菌(Rhizoctoniasolani)，甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所經(jīng)濟(jì)作物病害研究室保存。

培養(yǎng)基：馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。

供試藥劑：100萬(wàn)孢子/g寡雄腐霉WP，捷克生物制劑有限公司；0.3%四霉素AS，遼寧微科生物工程股份有限公司；3%中生菌素WG，福建凱立生物制品有限公司；50%錳鋅·氟嗎啉WP，沈陽(yáng)科創(chuàng)化學(xué)品有限公司；20%烯肟·戊唑醇SC，拜耳作物科學(xué)(中國(guó))有限公司；30%苯 甲·嘧菌酯SC，世科姆化學(xué)貿(mào)易(上海)有限公司。

1.2 室內(nèi)毒力測(cè)定方法

采用生長(zhǎng)速率法測(cè)定。在超凈工作臺(tái)中，用直徑為4.0 mm的打孔器從活化5 d的菌落邊緣打取菌餅，分別移接到含有藥劑5個(gè)梯度濃度 (0.05、0.25、1.25、6.25、31.25 μg/mL)的培養(yǎng)基平板上，置25 ℃恒溫培養(yǎng)箱黑暗培養(yǎng)7 d，用游標(biāo)卡尺十字方向測(cè)定菌落直徑，求平均值，減去4.0 mm菌餅直徑，即為菌落增長(zhǎng)直徑，計(jì)算相對(duì)抑制率。

菌絲抑制生長(zhǎng)率=(對(duì)照菌落生長(zhǎng)直徑-處理菌落生長(zhǎng)直徑)/對(duì)照菌落生長(zhǎng)直徑×100%。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2007及DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)軟件進(jìn)行分析，計(jì)算各藥劑對(duì)菌株的有效抑制中濃度(EC50)、95%置信區(qū)間、卡方測(cè)驗(yàn)(χ2)、相關(guān)系數(shù)(r)及毒力回歸方程。

2 結(jié)果與分析

對(duì)馬鈴薯晚疫病菌室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明(表1)，6種殺菌劑對(duì)晚疫病菌均有一定的毒力，回歸方程的相關(guān)系數(shù)為0.883 4～0.991 7，相關(guān)性良好，其中生物農(nóng)藥0.3%四霉素AS和100萬(wàn)孢子/g寡雄腐霉WP對(duì)馬鈴薯晚疫病菌具有較好的毒力，EC50分別為0.009 3 μg/mL和 0.041 2 μg/mL，其次為20%烯肟·戊唑醇SC和50%錳鋅·氟嗎啉WP，EC50分別為0.435 9 μg/mL和1.216 2 μg/mL，3%中生菌素WG EC50為7.494 1 μg/mL，30%苯甲·嘧菌酯SC對(duì)晚疫病菌毒力較弱，EC50為11.270 1 μg/mL。

對(duì)馬鈴薯早疫病菌室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明(表1)，生物農(nóng)藥100萬(wàn)孢子/g寡雄腐霉WP對(duì)馬鈴薯早疫病菌絲生長(zhǎng)抑制作用最好，毒力最強(qiáng)，EC50為0.000 1 μg/mL；其次為20%烯肟·戊唑醇SC，EC50為0.003 9 μg/mL；50%錳鋅·氟嗎啉WP、0.3%四霉素AS和30%苯甲·嘧菌酯SC EC50分別為0.192 5 μg/mL、0.208 4 μg/mL和 0.227 8 μg/mL；3%中生菌素WG EC50為 2.035 6 μg/mL。

表1 不同殺菌劑對(duì)3種馬鈴薯病害病原菌的毒力Table 1 Indoor toxicity of fungicides to three pathogens of potato

對(duì)馬鈴薯黑痣病菌室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果表明(表1)，100萬(wàn)孢子/g寡雄腐霉WP對(duì)馬鈴薯黑痣病菌毒力最強(qiáng)，其EC50為 0.052 0 μg/mL，其次為0.3%四霉素AS EC50分別為0.265 9 μg/mL，20%烯肟·戊唑醇SC EC50為1.114 0 μg/mL，30%苯甲·嘧菌酯SC和50%錳鋅·氟嗎啉WP對(duì)馬鈴薯黑痣病菌有一定的毒力，3%中生菌素WG對(duì)黑痣病菌毒力較弱，EC50為 20.266 6 μg/mL。

3 結(jié)論與討論

20%烯肟·戊唑醇SC是廣譜內(nèi)吸性三唑類(lèi)殺菌劑戊唑醇與新一代甲氧基丙烯酸類(lèi)殺菌劑烯肟菌胺的復(fù)配劑，具有低毒、光譜、高效、傳導(dǎo)的特性，具有預(yù)防和治療作用并可調(diào)節(jié)作物生長(zhǎng)，對(duì)水稻、小麥、果蔬病害有較好的作用。30%苯甲·嘧菌酯SC是由苯醚甲環(huán)唑和嘧菌酯復(fù)配而成的內(nèi)吸性殺菌劑，不僅能有效鏟除病害，還能增強(qiáng)植株的抗病能力。50%錳鋅·氟嗎啉WP是由代森錳鋅和氟嗎啉復(fù)配而成，具有預(yù)防、治療和鏟除的作用，對(duì)霜霉病、疫霉病作用好[4-7]。本試驗(yàn)結(jié)果表明3種復(fù)配劑對(duì)馬鈴薯晚疫病、早疫病和黑痣病均有一定的毒力，其中20%烯肟·戊唑醇SC表現(xiàn)較好。

生物農(nóng)藥因其低毒、易分解、無(wú)污染、安全環(huán)保、不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)在當(dāng)前推進(jìn)農(nóng)藥減量控害中備受青睞。100萬(wàn)孢子/g寡雄腐霉WP是一種重要的微生物農(nóng)藥，可以抵抗多種病原菌對(duì)植物的侵害，具有廣譜、高效、促生和增產(chǎn)等特點(diǎn)，具有極大的應(yīng)用潛力和價(jià)值[8-9]，該殺菌劑對(duì)作物、環(huán)境安全，可作用于作物各個(gè)生育期，不產(chǎn)生抗性[10]，對(duì)辣椒疫霉病、葡萄霜霉病有較好的防治效果[11-12]。0.3%四霉素AS具有內(nèi)吸抑菌活性，阻止病菌侵入和擴(kuò)展，適用各種作物的多種真菌、細(xì)菌病害的防治。中生霉素是由淡紫灰鏈霉菌海南變種產(chǎn)生的抗生素，可使真菌菌絲變形，抑制孢子萌發(fā)并直接殺死孢子，對(duì)農(nóng)作物細(xì)菌性病害和部分真菌性病害有很好的防治效果，具有高效、低毒、安全等特性，不污染環(huán)境，并能夠誘導(dǎo)植物產(chǎn)生抗性，促進(jìn)植物生長(zhǎng)等特點(diǎn)。喬廣行等[13]研究表明，生物制劑100萬(wàn)孢子/g寡雄腐霉WP對(duì)馬鈴薯黑痣病病菌有較好的抑制作用。本試驗(yàn)結(jié)果表明，100萬(wàn)孢子/g寡雄腐霉WP和 0.3%四霉素AS對(duì)馬鈴薯早疫病、晚疫病、黑痣病菌絲生長(zhǎng)有較好的抑制作用，3%中生菌素WG對(duì)3種病原菌毒力較弱。寡雄腐霉的促生、防病作用與其孢子的萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)密切相關(guān)，田間自然環(huán)境對(duì)孢子的萌發(fā)和生長(zhǎng)有一定的影響[7]；因此，田間防治效果有待進(jìn)一步驗(yàn)證。

室內(nèi)毒力結(jié)果表明，生物菌劑100萬(wàn)孢子/g寡雄腐霉WP和0.3%四霉素AS和復(fù)配劑20%烯肟·戊唑醇SC對(duì)馬鈴薯晚疫病菌、早疫病菌和黑痣病菌有較好的毒力。本試驗(yàn)結(jié)果限于室內(nèi)毒力測(cè)定，未進(jìn)行盆栽試驗(yàn)和田間試驗(yàn)，皿內(nèi)抑菌效果不能等同于田間防治效果，在田間還受到環(huán)境條件、寄主抗性等多種因素的影響，各藥劑田間防治效果有待進(jìn)一步研究。