崔 錦，劉升輝，朱寬佑，徐秋良

(河南牧業(yè)經(jīng)濟學院，河南 鄭州 450046)

畜牧生產(chǎn)中對抗生素的使用要求日益嚴格，無抗養(yǎng)殖受到空前關(guān)注，畜牧研究者越來越重視抗生素替代品的研發(fā)。微生態(tài)制劑作為一類綠色安全、無副作用的飼料添加劑，被認為是抗生素的最佳替代品。丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌能形成內(nèi)生芽孢，具有較好的耐胃酸、耐膽鹽和耐高溫等抗逆性，成為目前主要的外源微生態(tài)制劑[1，2]。釀酒酵母培養(yǎng)物能夠促進動物生長。本試驗探究丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌和釀酒酵母發(fā)酵物對斷奶仔豬生長性能、血清生化指標和腸道發(fā)育的影響，為斷奶仔豬無抗日糧的研發(fā)提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 試驗動物 本試驗所用長×大二元雜交仔豬來自河南省正陽種豬場繁育三場。

1.1.2 飼料添加劑 本試驗所用的丁酸梭菌(3×109CFU/g)、凝結(jié)芽孢桿菌(5×109CFU/g)、釀酒酵母發(fā)酵物等添加劑均由校企合作企業(yè)惠贈。釀酒酵母發(fā)酵物的底物是玉米、豆粕、玉米蛋白粉等，發(fā)酵產(chǎn)物主要成分：粗蛋白≥20%、粗灰分≤7%、水分≤12%、甘露聚糖≥0.1%。

1.2 試驗設(shè)計

本試驗一共選取了80頭斷奶仔豬，分成Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組，每組20頭豬，公母各半。Ⅰ組(對照組)飼喂基礎(chǔ)日糧，Ⅱ組 (丁酸梭菌組)在基礎(chǔ)日糧中添加丁酸梭菌20 g/t，Ⅲ組(凝結(jié)芽孢桿菌組)在基礎(chǔ)日糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌50 g/t，Ⅳ組(釀酒酵母發(fā)酵物組)在基礎(chǔ)日糧中添加釀酒酵母發(fā)酵物5000 g/t。試驗共35天，7天預(yù)飼期，28天試驗期。試驗在同一棟保育舍內(nèi)進行，仔豬的飼養(yǎng)管理按照豬場原有的程序進行。自由采食與飲水，每天7∶00、12∶00、17∶00、20∶00喂料。

1.3 試驗相關(guān)指標

1.3.1 生長性能指標 日增重：試驗開始時稱量每頭豬的體質(zhì)量，試驗結(jié)束后再稱量每頭豬的體質(zhì)量，計算平均日增重。飼料轉(zhuǎn)化率：豬體質(zhì)量增加量除以飼料消耗量。

1.3.2 血清生化指標 屠宰前一天中午投完料后不再投料，充足飲水，第二日上午屠宰。屠宰當天每組選取3頭體質(zhì)量接近平均體質(zhì)量的仔豬進行屠宰，采取頸動脈放血的屠宰方式。屠宰后立刻采集血樣，并用生物冰袋盒保存。采集回腸、空腸中段腸管約3 cm，立刻放入液氮罐保存。委托鄭州頤和醫(yī)院測定血清總蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素和葡萄糖等生化指標。

1.3.3 腸道結(jié)構(gòu) 取空腸、回腸約1 cm，在 0.9% NaCl溶液中輕輕漂洗，去除腸道內(nèi)容物后置于4%多聚甲醛中固定，用蘇木精-伊紅染色，參照組織病理切片的制作流程制作切片。顯微鏡觀察，刻盤，最后用麥克奧迪數(shù)字切片管理系統(tǒng)拍照，借助Motic Images Plus測量絨毛高度和隱窩深度。

1.3.4 試驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)先用Excel 2010初步整理，整理后用SAS 9.3.1統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析。P<0.01表示差異極顯著，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 三種添加劑對斷奶仔豬生長性能的影響

由表1可知，與對照組相比，日糧添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物不影響公豬的日增重(P>0.05)，各試驗組公豬的日增重也無差別(P>0.05)。與對照組相比，日糧添加凝結(jié)芽孢桿菌提高母豬的日增重(P<0.05)。與對照組相比，日糧添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物不影響豬的飼料轉(zhuǎn)化率(P>0.05)，各試驗組的飼料轉(zhuǎn)化率也無差別(P>0.05)。

表1 丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物對斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 三種添加劑對斷奶仔豬血清生化指標的影響

由表2可知，與對照組相比，日糧添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物不影響斷奶仔豬血清白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)和總蛋白(TP)的含量(P>0.05)，各試驗組斷奶仔豬血清白蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)和總蛋白(TP)的含量也無差別(P>0.05)。與對照組相比，日糧添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物極顯著提高斷奶仔豬血清尿素(UREA)的含量(P<0.01)，但各試驗組斷奶仔豬血清尿素(UREA)的含量無差別(P>0.05)。與對照組相比，日糧添加釀酒酵母發(fā)酵物顯著提高斷奶仔豬血清葡萄糖(GLU)的含量(P<0.05)。

表2 飼料添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌和釀酒酵母發(fā)酵物對斷奶仔豬血清生化指標的影響

2.3 三種添加劑對斷奶仔豬腸道發(fā)育的影響

由表3可知，與對照組相比，日糧添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物顯著提高空腸絨毛高度(P<0.05)，而且丁酸梭菌組、凝結(jié)芽孢桿菌組空腸絨毛高度顯著高于釀酒酵母發(fā)酵物組(P<0.05)。與對照組相比，日糧添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物不影響空腸隱窩深度(P>0.05)。與對照組相比，丁酸梭菌組、凝結(jié)芽孢桿菌組的絨毛高度/隱窩深度無變化(P>0.05)，但釀酒酵母發(fā)酵物組的絨毛高度/隱窩深度顯著高于對照組、丁酸梭菌組和凝結(jié)芽孢桿菌組(P<0.05)。

與對照組相比，日糧添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物顯著提高回腸絨毛高度(P<0.05)，但各試驗組的回腸絨毛高度無差異(P>0.05)。與對照組相比，日糧添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物不影響回腸隱窩深度和絨毛高度/隱窩深度(P>0.05)，各試驗組回腸隱窩深度和絨毛高度/隱窩深度亦無差異(P>0.05)。

表3 飼料添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物對斷奶仔豬腸道結(jié)構(gòu)的影響

3 討論

3.1 三種添加劑對斷奶仔豬生長性能的影響

動物的日增重是表示其生長性能的重要指標，也是其經(jīng)濟價值的重要體現(xiàn)。Shaona等[1]發(fā)現(xiàn)在日糧中添加適量的丁酸梭菌顯著提高斷奶仔豬的日增重和飼料轉(zhuǎn)化率。余冬友等[2]發(fā)現(xiàn)在日糧中添加適量的凝結(jié)芽孢桿菌顯著提高斷奶仔豬的采食量和生長速度。王斌星等[3]發(fā)現(xiàn)在日糧中添加釀酒酵母發(fā)酵液能提高仔豬的采食量和日增重，并顯著地降低料重比。本研究表明在日糧中添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌或釀酒酵母發(fā)酵物均未提高斷奶仔豬的飼料轉(zhuǎn)化率和斷奶公仔豬的日增重。與前人試驗結(jié)果的差異可能是由于飼料形態(tài)不一致造成的，以前試驗中斷奶仔豬用顆粒料，而本試驗飼喂的是粉料。

3.2 三種添加劑對斷奶仔豬血清生化指標的影響

血液生化指標是反映機體代謝、營養(yǎng)物質(zhì)吸收利用及組織機能狀態(tài)的重要指標。血清總蛋白、白蛋白可反映機體的營養(yǎng)狀況及蛋白質(zhì)代謝水平，蛋白質(zhì)代謝旺盛時血清白蛋白、總蛋白水平增高，有利于畜禽飼料的利用和提高機體營養(yǎng)物質(zhì)的吸收，降低飼料消耗。血糖水平降低在一定程度上反映機體合成代謝加強。

在日糧中添加丁酸梭菌顯著降低動物血液尿素的含量并提高血液白蛋白、球蛋白和總蛋白的含量[4,5]。王向榮等[6]發(fā)現(xiàn)在日糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌提高了斷奶仔豬血液白蛋白、總蛋白和葡萄糖的含量并降低血液尿素含量。在本試驗中，日糧添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌或釀酒酵母發(fā)酵物極顯著提高斷奶仔豬血清尿素的含量(P<0.01)，但不影響斷奶仔豬血清白蛋白、球蛋白和總蛋白的含量(P>0.05)，日糧中添加釀酒酵母發(fā)酵物顯著提高血清葡萄糖的含量(P<0.05)。

3.3 三種添加劑對斷奶仔豬腸道發(fā)育的影響

小腸絨毛高度和隱窩深度可以反映出小腸細胞的增殖能力和對營養(yǎng)物質(zhì)的主動吸收能力。劉婷婷等[7]發(fā)現(xiàn)在日糧中添加丁酸梭菌顯著提高斷奶仔豬的空腸絨毛高度和回腸絨毛高度，降低空腸隱窩深度和回腸隱窩深度。張越等[8]發(fā)現(xiàn)在日糧中添加凝結(jié)芽孢桿菌顯著提高仔豬的回腸絨毛高度和空腸絨毛高度/隱窩深度，降低空腸隱窩深度。王斌星等[3]發(fā)現(xiàn)在日糧中添加釀酒酵母發(fā)酵液能提高斷奶仔豬的空腸絨毛高度和回腸絨毛高度，降低空腸和回腸的隱窩深度。結(jié)合本試驗結(jié)果可知，在日糧中添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物可以提高斷奶仔豬空腸絨毛高度、回腸絨毛高度和空腸絨毛高度/隱窩深度，說明在日糧中添加丁酸梭菌、凝結(jié)芽孢桿菌、釀酒酵母發(fā)酵物可能促進斷奶仔豬腸細胞的成熟，提升腸道吸收營養(yǎng)物質(zhì)的能力。