張莉莉，王妍妍，朱輝，趙永新

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院 檢驗(yàn)科，河南 新鄉(xiāng) 453003)

血流感染是全身感染性疾病，指細(xì)菌、真菌等病原微生物入侵血流所致的一種全身感染性疾病。全球每年平均發(fā)生約3 100萬例血流感染[1]，我國每年約發(fā)生486萬例血流感染[2]。血培養(yǎng)是對血流感染進(jìn)行診斷的最重要的病原學(xué)方法[3]。臨床及時(shí)送檢血培養(yǎng)，及早發(fā)現(xiàn)血流感染接受適當(dāng)抗感染治療，不僅可以降低病死率，還可以縮短患者的住院時(shí)間，節(jié)省住院成本。本研究旨在分析新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院近2 a內(nèi)血培養(yǎng)陽性病原菌分布及耐藥情況，為臨床合理用藥提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料選擇2019年、2020年臨床送檢的血培養(yǎng)標(biāo)本5 348套，成人每套包括1瓶需氧瓶和1瓶厭氧瓶，兒童瓶1瓶為1套。如需氧、厭氧同時(shí)報(bào)陽且鑒定為同一病原菌的只計(jì)算1例陽性標(biāo)本，共分離408株病原菌。

1.2 試劑和儀器全自動血培養(yǎng)儀Bact/ALERT 3D60及其配套培養(yǎng)瓶購自法國生物梅里埃公司，自動微生物鑒定/藥敏分析儀PHOENIX100購自美國BD公司。M-H平板、血平板、嗜血型巧克力平板、麥康凱平板均購自鄭州博賽生物技術(shù)公司。所需藥敏紙片均為英國OXOD公司產(chǎn)品。質(zhì)控菌株大腸埃希菌 (ATCC25922)、銅綠假單胞菌(ATCC27853)、金黃色葡萄球菌 (ATCC25923)、金黃色葡萄球菌(ATCC29213)及糞腸球菌(ATCC29212)均購自國家衛(wèi)計(jì)委臨床檢驗(yàn)中心。

1.3 研究方法

1.3.1臨床標(biāo)本采集 臨床根據(jù)血培養(yǎng)采集指征嚴(yán)格遵循無菌操作技術(shù)，成人采集8～10 mL，兒童采集3～5 mL注入血瓶，混勻后及時(shí)送檢。

1.3.2細(xì)菌培養(yǎng)鑒定與藥物敏感試驗(yàn) 血培養(yǎng)瓶放入Bact/ ALERT 3D60全自動血培養(yǎng)儀培養(yǎng)，血瓶報(bào)陽后取出進(jìn)行涂片革蘭染色觀察并報(bào)臨床危急值，然后接種至血平板、巧克力平板、麥康凱平板上。采用美國BD公司 PHOENIX100自動微生物鑒定/藥敏分析儀對分離的病原菌進(jìn)行微生物鑒定及藥敏試驗(yàn)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法所有數(shù)據(jù)均來自WHONET 5.6 軟件。

2 結(jié)果

2.1 送檢血培養(yǎng)前5位科室及陽性率兒科送檢血培養(yǎng)最多，但陽性率較低僅為4.4%，其次為呼吸內(nèi)科、重癥醫(yī)學(xué)科、神經(jīng)外科、新生兒科，其中重癥醫(yī)學(xué)科的陽性率最高為18.8%。見表1。

表1 不同科室送檢血培養(yǎng)標(biāo)本量及陽性率

2.2 主要病原菌及其構(gòu)成比分析全院2 a內(nèi)共送血培養(yǎng)5 348套，報(bào)陽408套，陽性率為7.6%。其中革蘭陽性球菌181株，陰性桿菌222株，真菌5株。分離的病原菌前5位依次是大腸埃希菌占比24.3%、凝固酶陰性葡萄球菌19.6%、肺炎克雷伯菌14.0%、金黃色葡萄球菌9.3%、鮑曼不動桿菌3.4%。見表2。

表2 血培養(yǎng)陽性標(biāo)本病原菌分布

2.3 常見病原菌對不同種類抗菌藥物的耐藥性分析

2.3.1常見革蘭陰性桿菌耐藥情況 大腸埃希菌對氨芐西林、哌拉西林耐藥率較高，分別為81.8%、84.8%，對頭孢他啶、阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦耐藥率低，未發(fā)現(xiàn)耐碳青霉烯類抗菌藥物耐藥菌株；肺炎克雷伯菌對氨芐西林/舒巴坦耐藥率高達(dá)94.7%，但是對頭孢類抗菌藥物、阿莫西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦及喹諾酮類耐藥率低，對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥率為7.0%；非發(fā)酵菌細(xì)菌鮑曼不動桿菌對頭孢類抗菌藥物率高，對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥率為42.9%；銅綠假單胞菌對哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦耐藥率較高超過40.0%，但對阿米卡星、頭孢他啶、頭孢吡肟、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星耐藥率較低，對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥率為15.4%。見表3。

表3 革蘭陰性桿菌對抗菌藥物耐藥率

2.3.2常見革蘭陽性球菌耐藥情況 凝固酶陰性葡萄球菌對青霉素、紅霉素具有較高的耐藥性分別為87.0%和84.4%，耐苯唑西林的凝固酶陰性葡萄球菌檢出率為70.1%，對萬古霉素、利奈唑胺的敏感性為100%；金黃色葡萄球菌同樣對青霉素和紅霉素具有較高的耐藥率分別是94.1%、79.4%，耐苯唑西林的金黃色葡萄球菌檢出率為41.2%，未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素、利奈唑胺的金黃色葡萄球菌。見表4。

表4 革蘭陽性球菌對抗菌藥物耐藥率

3 討論

近年來隨著侵襲性操作不斷的增加及廣譜抗生素、皮質(zhì)激素的不合理應(yīng)用，血流感染的發(fā)生率及死亡率呈現(xiàn)逐年上升趨勢[4]。目前血培養(yǎng)仍是診斷血流感染的金標(biāo)準(zhǔn)。新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院2019—2020年共送檢血培養(yǎng)5 348套，送檢最多的科室為兒科，可能與兒科醫(yī)生重視血流感染有關(guān)，但陽性率不高僅4.4%；重癥醫(yī)學(xué)科陽性率最高18.8%，重癥醫(yī)學(xué)科患者病情嚴(yán)重，免疫功能差，自身免疫力低下，如機(jī)械通氣、中心靜脈插管、導(dǎo)尿管等侵襲性操作較多，病原菌可通過自身結(jié)構(gòu)如莢膜、菌毛等形成生物膜黏附在醫(yī)療器械表面進(jìn)入血流[5]。檢出病原菌中革蘭陰性桿菌高于革蘭陽性球菌，陰性菌位居前2位的分別是大腸埃細(xì)菌和肺炎克雷伯菌，陽性球菌檢出前兩位的是凝固酶陰性葡萄球菌和金黃色葡萄球菌，這與李軼等[6]研究報(bào)道一致。

對2 a間病原菌的耐藥數(shù)據(jù)分析后發(fā)現(xiàn)，腸桿菌科細(xì)菌大腸埃希菌對青霉素及頭孢類抗菌藥物表現(xiàn)較高的耐藥性，對喹諾酮類藥物的耐藥性超過50%，但是對酶抑制劑復(fù)合類藥物哌拉西林/他唑巴坦、阿莫西林/克拉維酸敏感性高。隨著碳青霉烯類抗菌藥物在臨床廣泛使用，碳青霉烯類抗菌藥物耐藥菌日益增多，未發(fā)現(xiàn)耐碳青霉烯類的大腸埃希菌菌株。肺炎克雷伯菌對氨芐西林/舒巴坦耐藥率高為45.6%，對碳青霉烯類抗生素的耐藥率為7.0%，較大腸埃希菌偏高。研究顯示，耐碳青霉烯類的肺炎克雷伯菌感染患者在同一病區(qū)時(shí)間≥1周是相互傳播的危險(xiǎn)因素[7]。非發(fā)酵細(xì)菌檢出率偏低，但是耐藥情況與腸桿菌科細(xì)菌明顯不同。鮑曼不動桿菌對頭孢噻肟的耐藥率較高(92.9%)，并且對碳青霉烯類藥物具有較高的耐藥性(42.9%)，除去對部分藥物天然耐藥外，鮑曼不動桿菌對阿米卡星及喹諾酮類抗菌藥物耐藥率低。銅綠假單胞菌對哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦耐藥率略高(超過40%)，但對阿米卡星及喹諾酮類有較高的敏感性，這提示抗非發(fā)酵菌可以選擇阿米卡星、環(huán)丙沙星以及左氧氟沙星。

在檢出的陽性球菌中，凝固酶陰性葡萄球菌位居首位，MRCNS檢出率為70.1%，其作為一種條件致病菌，因其可產(chǎn)生黏質(zhì)多糖附著于人體皮膚黏膜，操作不規(guī)范易導(dǎo)致污染，一定要結(jié)合臨床判斷是致病菌還是污染菌[8]。其次為金黃色葡萄球菌，其致病力相對確切，能產(chǎn)生多種毒素，甚至引起膿毒癥休克，MRSA檢出率為41.2%，與全國趨勢[9]一致。在該研究中發(fā)現(xiàn)，葡萄球菌對青霉素、紅霉素具有較高的耐藥性，但對利福平、環(huán)丙沙星、慶大霉素較敏感，可作為抗葡萄球菌血流感染的選擇。本研究未發(fā)現(xiàn)耐萬古霉素、利奈唑胺的葡萄球菌。

本研究意義在于總結(jié)新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院血培養(yǎng)陽性常見病原菌的分布及耐藥情況，通過研究發(fā)現(xiàn)不同種類病原菌耐藥差異很大，多重耐藥菌株檢出較多。本研究不僅可以指導(dǎo)臨床掌握常見病原菌耐藥規(guī)律，還可以為臨床及早合理選擇抗菌藥物提供理論依據(jù)，從而改善血流感染患者預(yù)后。