牛顯 牛煜 索永錄

摘 要：從原位褐煤中篩選本源菌并分析其降解特性是探索原位微生物降解轉(zhuǎn)化煤炭的有效途徑。經(jīng)過原位取樣，富集培養(yǎng)，純化分離得到一株本源真菌，以形態(tài)學觀測和ITS測序，確定為鐮刀菌屬（F.spp.NF01）。通過本源菌F.spp.NF01生長曲線、pH-t曲線及褐煤的降（溶）解實驗研究了其生理學特性，并利用掃描電子顯微鏡、傅里葉紅外光譜、電子順磁共振分析了殘煤表面形貌、官能團及自由基。結(jié)果表明：在MM-SGC培養(yǎng)基中，本源菌F.spp.NF01生長液呈現(xiàn)堿性，菌液含煤時pH值達9.41，0.5 g褐煤可被生長6 d的氣生菌絲溶解，且褐煤的降（溶）解率隨pH值升高而增大;本源菌F.spp.NF01作用后的殘煤，表面離散顆粒更小，粗糙和裂隙度更大，芳環(huán)側(cè)鏈基團、醚鍵、芳香族CC、脂肪族—CH2—和—CH3—吸收峰強度減弱，自由基濃度Ng、朗德因子g值和線寬ΔH明顯增大。說明本源菌F.spp.NF01可以降（溶）解褐煤，使其形貌和結(jié)構(gòu)改變，產(chǎn)生的堿性物質(zhì)參與了褐煤的降（溶）解。該研究為本源菌降解褐煤的微觀結(jié)構(gòu)研究起到積極地促進作用。關(guān)鍵詞：褐煤;生物降解;表面形貌;官能團;自由基;本源菌;鐮刀菌中圖分類號：TD 989

文獻標志碼：A

文章編號：1672-9315（2021）05-0836-09

DOI：10.13800/j.cnki.xakjdxxb.2021.0510開放科學（資源服務）標識碼（OSID）：

Research on biological characteristics and microstructure

of lignite degradation by indigenous microorganism

NIU Xian1，2，NIU Yu3，SUO Yonglu1

（1.College of Energy Science and Engineering，Xian University of Science and Technology，Xian 710054，China;

2.School of Mining and Technology，Inner Mongolia University of Technology，Hohhot 010051，China;

3.School of Electric Power，Civil Engineering and Architecture，Shanxi University，Taiyuan 030006，China）

Abstract：Screening indigenous microorganism to explore lignite degrading capacity is an efficient way to examine in-situ biotransformation of lignite.An indigenous fungus was obtained by means of? in-situ sampling，enrichment culture，purification and isolation，which was identified as Fusarium（F.spp.NF01）from? morphological observation and ITS sequencing.The biological characteristics of indigenous F.spp.NF01 were studied based on strain growth curves，pH-t curves and degradation/dissolution experiment of lignite，and scanning electron microscopy，fourier transform infrared spectroscopy and electron paramagnetic resonance were used to analyze the surface morphology，functional groups and free radicals of the residual coal.The results showed that in MM-SGC medium，the growth solution of indigenous F.spp.NF01 was alkaline，and the pH value was up to 9.41 with the growth liquid containing lignite.0.5 g lignite was dissolved by aerial hyphae grown for 6 days，and the degradation/dissolution rate of lignite promoted with the increase of pH value.With indigenous F.spp.NF01 acted on the pretreatment lignite sample，the surface discrete particles of the residual coal

became smaller，accompanied by greater roughness and crack structures，the intensity of the aromatic ring side chain groups，ether bonds，aromatic CC，aliphatic —CH2— and —CH3— absorption peak? was weakened，and the concentration of free radical Ng，Landé g-factor and line width ΔH were significantly increased.This indicates that indigenous F.spp.NF01 can degrade/dissolve the lignite to change its morphology and structure.Alkaline substances secreted by F.spp.NF01 are? involved in lignite degradation/dissolution.

The research will provide a guidance for the study of the microstructure of lignite degradation by indigenous microorganism.

Key words：lignite;biodegradation;surface morphology;functional groups;free radicals;indigenous microorganism;Fusarium

0 引 言

褐煤占中國煤炭總儲量的13%以上，已探明可采儲量約1 300億t[1]。然而，環(huán)境污染大和應用價值低的現(xiàn)狀嚴重制約了褐煤產(chǎn)業(yè)的發(fā)展[2-3]。褐煤的微生物降解轉(zhuǎn)化技術(shù)以其環(huán)境友好、反應溫和、成本低廉、產(chǎn)物用途廣等優(yōu)勢[4]，已成為當前研究熱點。自20世紀80年代以來，德國FAKOUSSA和美國COHEN分別報道了真菌可以在煤上生長并將其轉(zhuǎn)化為黑色水溶物[5-6]。此后，大量學者集中于煤種、菌種、機理和產(chǎn)物等4個方面的研究。在煤種方面，SCOTT等指出煤種和煤樣的氧化預處理會影響真菌類對其的溶解性，氧化程度高的煤易被降解[7];也有學者利用光-氧氧化、過氧化氫、硝酸、氫氧化鈉和紫外光照等氧化預處理方法，都不同程度的使煤炭的生物降（溶）解率得到了提高[8-12]。在菌種和機理方面，STRANDBERG等報道了外源放線菌能夠產(chǎn)生胞外堿性物質(zhì)溶解煤炭，生成黑色液體，而且溶解度隨pH值的升高而增大[13]。QUIGLEY等評價了9種外源微生物對煤炭的降解情況，并發(fā)現(xiàn)胞外堿性產(chǎn)物是煤樣降解的原因[14];RALPH等系統(tǒng)的研究了外源真菌黃孢原毛平革菌，證實了其分泌的氧化酶（木質(zhì)素過氧化酶、錳過氧化酶、漆酶）能夠降解煤中部分大分子[15];COHEN等研究外源擔子菌云芝的溶煤活性，發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生草酸能夠螯合煤中多價金屬離子[16];袁紅莉等發(fā)現(xiàn)了具有降解褐煤的外源斜臥青霉菌，并證實了分泌的酯酶對褐煤有解聚作用[17-18]。在產(chǎn)物方面，主要研究了產(chǎn)物組成、產(chǎn)物結(jié)構(gòu)、溶解度、分子量、酸沉淀性質(zhì)、吸光度、蛋白質(zhì)含量、發(fā)熱量以及產(chǎn)物應用領(lǐng)域等[19-21]。以上研究中學者們更多地關(guān)注于外源菌，忽略了外源菌很難適應原位復雜的煤層環(huán)境而存活，其高效的降解性無法實現(xiàn)的問題。以原位褐煤中篩選本源菌為切入點，研究了本源菌F.spp.NF01生長曲線、pH-t曲線和固液態(tài)降（溶）解褐煤的生理學特性，表征了菌株降解后殘煤的形貌、官能團、自由基，旨在補充原位煤層中本源菌降（溶）解褐煤方面的數(shù)據(jù)，為推進本源菌對褐煤降解特性研究發(fā)展起到積極作用。

1 材料與方法

1.1 煤樣篩選本源菌株的褐煤煤樣采集于內(nèi)蒙古自治區(qū)赤峰市元寶山煤田的6家煤礦西二采區(qū)北三段6-8工作面。先用滅菌取樣鏟鏟去工作面已裸露煤炭，然后利用滅菌取樣器（1 000 mm×25 mm）快速插入新揭露的煤壁取樣，裝入無菌袋密封，4 ℃保溫箱運輸，如圖1所示。其中，取樣器常被用做土壤和糧食取樣。原煤樣采集于地面煤場不同方位的褐煤，用編織袋密封保存。利用顎式破碎機和密封式制樣粉碎機逐步粉碎，并用SDNS 200a標準振篩機篩分成粒徑200目（0.074 mm）顆粒。預處理煤樣是按1 g煤與10 mL 1 mol/L NaOH的比例混合，48 h后抽濾洗滌至中性，烘干，牛皮紙包好備用。

1.2 真菌的分離與鑒定方法

1.2.1 真菌的分離方法基本培養(yǎng)基MM：3 g/L KH2PO4，1.5 g/L MgSO4·7H2O，1 g/L（NH）2SO4，0.1 mg/L FeSO4·7H2O，0.2 mg/L CuSO4·5H2O，0.68 mg/L ZnSO4，pH調(diào)至中性，配固體培養(yǎng)基加1.5% Agar。G為10 g/L葡萄糖;M為10 g/L麥芽糖;SGC為10 g/L葡萄糖酸鈉。在超凈工作臺中，將篩選本源菌的褐煤煤樣加入滅菌的100 mL MM-GM（基本培養(yǎng)基加入G和M的碳源）培養(yǎng)液中，28 ℃150 rpm，富集培養(yǎng)3 d。將富集菌液1 mL轉(zhuǎn)接到100 mL MM-GM培養(yǎng)液且加有1 g滅菌的原煤樣中，篩選7 d，再經(jīng)多次富集培養(yǎng)和平板分離，得到一株真菌NF01，并用20%甘油-70 ℃保存。

1.2.2 真菌的鑒定方法 真菌NF01通過平板培養(yǎng)和掃描電鏡的形態(tài)學觀測，結(jié)合ITS測序，完成菌種的鑒定。其中，掃描電鏡樣品的制備如下

1）滅菌蓋玻片45°插入固體培養(yǎng)基，讓菌株爬片生長;

2）取長有菌絲的蓋玻片，2.5%戊二醛4 ℃固定48 h;

3）磷酸緩沖液（pBS）漂洗3次，以30%，50%，70%，80%，90%，100%Ⅰ，100%Ⅱ濃度的乙醇梯度脫水，15 min/次;

4）75%叔丁醇，100%叔丁醇各15 min;置冰箱冷凍室固化，抽真空干燥，噴金觀察。測序步驟如下1）刮取培養(yǎng)7 d的平板上菌絲50 mg，液氮研磨后轉(zhuǎn)移至EP管中，利用試劑盒SK8259對真菌基因組DNA抽提;2）凝膠電泳檢測抽提DNA是否成功;3）采用通用引物ITS1和ITS4對菌株的DNA進行PCR擴增，反應條件為95 ℃預變性5 min，95 ℃變性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸40 s，擴增35個循環(huán)，最后72 ℃延伸10 min;

4）取PCR擴增產(chǎn)物5 μL用2%瓊脂糖凝膠電泳檢測，判斷擴增是否成功;5）將菌株ITS序列通過NCBI數(shù)據(jù)庫的BLAST進行同源性序列比對，得到相關(guān)的同源性菌株信息。

1.3 真菌NF01的特性分析

1.3.1 真菌NF01的生長曲線? 在超凈工作臺中，將1 mL真菌NF01的菌液量分別轉(zhuǎn)接到24瓶裝有滅菌的100 mL MM-SGC培養(yǎng)液燒瓶中，28 ℃150 rpm搖床培育8 d。每24 h，取出3個燒瓶，離心，洗滌，收集菌絲，烘干，稱取菌絲干重。

1.3.2 真菌NF01生長液的pH值? 在超凈工作臺中，將1 mL真菌NF01的菌液量分別轉(zhuǎn)接到3瓶MM-SGC（100 mL）培養(yǎng)液中，28 ℃150 rpm搖床培養(yǎng)8 d。空白組MM-SGC（100 mL/瓶，共3瓶）為不接真菌。每天分別取3 mL菌液，離心，吸取上清液置于試管，用賽多利斯PB-10檢測儀測pH值。

1.3.3 真菌NF01降（溶）解褐煤? 在超凈工作臺中，將真菌NF01接種到MM-SGC固體培養(yǎng)基上，28 ℃恒溫避光培養(yǎng)3 d。3 d后，將滅菌的原煤樣（0.5±0.000 5 g，200目）和預處理煤樣（0.5±0.000 5 g，200目）置于固體培養(yǎng)基菌絲上，觀察褐煤的溶解情況。

1.3.4 真菌NF01的褐煤降（溶）解率? 配置100 mL MM-SGC培養(yǎng)液18瓶，9瓶/組，共2組。第1組接種1 mL真菌NF01的菌液和添加預處理褐煤，第2組不接種菌液僅添加預處理褐煤，28 ℃150 rpm搖床培育。每組在第3天、第5天、第7天分別取出3瓶，測pH值，離心，多次洗滌，收集褐煤，烘干，稱取干重，利用如下公式計算褐煤降（溶）解率。

Lbr=M0-M1M0×100%

式中

Lbr為褐煤生物降（溶）解率，%;M0為降（溶）解前褐煤質(zhì)量，m;m1為降（溶）解后的褐煤質(zhì)量，m。

1.4 真菌NF01降解褐煤的表征配置100 mL MM-SGC培養(yǎng)液6瓶，3瓶/組，共2組。第1組中分別接種真菌NF01且加入1.0±0.000 5 g滅菌的預處理褐煤，記“Ⅰ-殘煤”代表;第2組中不接種真菌NF01，但分別加入1.0±0.000 5 g滅菌的預處理褐煤，記“Ⅱ-殘煤”代表。在28 ℃150 rpm搖床中，培養(yǎng)7 d，離心，洗滌3次，收集殘煤，烘干備測。

1.4.1 褐煤的形貌? 用掃描電鏡JSM-7900F對原煤樣、Ⅰ-殘煤和Ⅱ-殘煤進行測試，分析煤樣降解前后形貌變化特征。樣品先干燥30 min，然后用導電膠粘附樣品在檢測臺上，噴金10 s，放大10倍-500 000倍，加速電壓0.01～30 kV。

1.4.2 褐煤的紅外光譜? 利用紅外光譜Nicolet iS50對原煤樣、Ⅰ-殘煤和Ⅱ-殘煤煤樣官能團進行測定分析。先將測試樣品和溴化鉀真空干燥，分別取煤樣各1 mg與100 mg純KBr研細混合，研磨到粒度小于2 μm，HY-12型粉末壓片機壓成透明薄片。光譜儀分

辨率4 cm-1，掃描32次，測定范圍4 000～400 cm-1。

1.4.3 褐煤的自由基? 用電子順磁共振EMXPLUS10/12對原煤樣、Ⅰ-殘煤和Ⅱ-殘煤煤樣進行自由基測定，分析自由基濃度Ng、朗德因子g值和線寬ΔH參數(shù)。微波頻率分別為9 839，9 837和9 843 MHz，微波功率0.2 mW，中心磁場351 mT，掃描寬度10 mT，調(diào)制頻率100 kHz，調(diào)制振幅0.1 mT，時間常數(shù)0.01 ms，掃描60 s。

2 結(jié)果與討論

2.1 真菌鑒定從圖2可以看出，真菌NF01培養(yǎng)3 d后，菌落直徑2.5～3.1 cm，氣生菌絲為白色絮狀、無隔透明、質(zhì)密突起。小型分生孢子為單生，無隔，數(shù)量多，形態(tài)多為卵形、橢圓形，大小2.67-7.55×0.89-1.83 μm;大型分生孢子散生于氣生菌絲上，數(shù)量少，無隔，形狀多為長筒形，大小8.33-12.5×1.66-2.5 μm;產(chǎn)孢細胞類型為簡單瓶梗。

真菌NF01測定的ITS序列519 bq已錄入NCBI GenBank數(shù)據(jù)庫，登錄號MN822700。通過BLAST進行相似性比對，發(fā)現(xiàn)Fusarium proliferatum（MK226301.1，MK226291.1，MK020694.1）、Fusarium sp（MK250069.1，MH050788.1，MH511574.1）、Fusarium fujikuroi（MK166052.1，MH911404.1，MH282573.1）和Fusarium verticillioides（MF882928.1）相似度均為100%，鑒定屬于鐮刀菌屬。

根據(jù)菌株形態(tài)學特征，檢索《真菌鑒定手冊》《中國大型真菌》中描述各種真菌的形態(tài)，結(jié)合測序鑒定結(jié)果，菌株NF01屬于鐮刀菌屬（Fusarium spp NF01）。鐮刀菌環(huán)境適應能力很強，嚴寒的北極和炎熱的沙漠中都有發(fā)現(xiàn)，并且據(jù)已有研究，其具有降（溶）解褐煤[22]和去除揮發(fā)性有機化合物及多環(huán)芳烴的能力[23]。在原位煤層中發(fā)現(xiàn)鐮刀菌，說明其具備適應原位復雜煤層環(huán)境的優(yōu)勢，為褐煤的本源菌降解研究起到重要意義。

2.2

F.spp.NF01生長曲線、pH-t曲線及降（溶）解褐煤實驗從圖3可以看出，在生長曲線中，前3天的真菌F.spp.NF01生長為對數(shù)生長期，第3天的菌體干重達到了0.142 g峰值，從第4天開始，菌株生長進入相對平穩(wěn)期。在pH-t曲線（有菌）中，隨著真菌F.spp.NF01生長，pH值逐漸增大，菌液呈現(xiàn)出堿性。第3天菌液pH值相對于最初pH值，增長率達到了25.1%，從第4天開始，pH值增幅相對平緩，最大pH值為第7天的9.28;而pH-t曲線（無菌）的空白組，pH均值為6.92，變化不大，菌液仍顯中性。這說明生長于MM-SGC培養(yǎng)液的真菌F.spp.NF01能夠分泌堿性物質(zhì)，使菌液呈現(xiàn)出堿性環(huán)境。

從圖4可知，煤粉在放置菌絲上培養(yǎng)3 d后，左側(cè)預處理煤粉出現(xiàn)了黑色液滴，0.5 g煤粉完全被降（溶）解，而右側(cè)原煤粉沒發(fā)現(xiàn)黑色液滴，未被降（溶）解。這說明6家煤礦褐煤可以通過預處理實現(xiàn)F.spp.NF01菌絲的降（溶）解，預處理破壞了褐煤結(jié)構(gòu)使菌株更容易降（溶）解褐煤。

從表1可知，第1組中，第3天含煤菌液的pH值7.2增至7.87，褐煤的降（溶）解率是7.46%，第5天，隨著pH值逐漸增大，褐煤降（溶）解率也逐漸增大，達到18.14%，第7天，pH值達到9.41，較最初pH值7.2，增幅30.7%，降（溶）解率也增至27.9%。第2組中，pH值沒有變化，呈現(xiàn)中性，褐煤只有少量減少。相對于無煤的生長液pH值，有煤菌液前3天pH值增幅不大，但第7天pH值則有較高增幅。說明在菌株生長前期，褐煤的存在對菌液pH值增加有抑制，生長后期，有促進作用。經(jīng)數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，真菌F.spp.NF01生長在含褐煤的MM-SGC培養(yǎng)液中能夠使菌液呈現(xiàn)堿性環(huán)境，伴隨著菌液pH值的升高，褐煤降（溶）解率也逐漸增大，褐煤降（溶）解率與菌液pH值存在正

相關(guān)性。堿性的生長液使褐煤表面的酸性基團離子化，如褐煤中含有可溶于堿液內(nèi)的腐殖酸[13-14]，從而改變褐煤的親水性，提高降（溶）解率。因此，菌株產(chǎn)生的堿性物質(zhì)參與了褐煤的降（溶）解。

2.3 褐煤的表面形貌

從圖5（a）和圖5（b）可知，原煤樣表面形貌相對平整，經(jīng)無菌培養(yǎng)液搖床7 d后的NaOH預處理煤樣（Ⅱ-殘煤）表面離散顆粒增多，且變得起伏粗糙。而有菌株作用的煤樣（Ⅰ-殘煤）表面顆粒變得更小，起伏更大，且出現(xiàn)了較多的裂隙結(jié)構(gòu)，如圖5（c）所示。這說明相對于原煤樣和無菌株作用的預處理煤樣，有菌株作用的預處理煤樣表面形貌變化更大，煤樣表面形貌的改變與真菌F.spp.NF01的參與有關(guān)。

2.4 褐煤的紅外光譜從圖6可以看出，虛垂線標記的11處原煤樣、Ⅰ-殘煤和Ⅱ-殘煤煤樣紅外光譜的吸收峰強度和峰形有明顯的差異。褐煤官能團的紅外吸收峰頻率特征，見表2。

其中，波數(shù)3 441.4 cm-1是羥基—OH的伸縮振動，相對于原煤樣，Ⅰ-殘煤和Ⅱ-殘煤煤樣吸收峰強度要更大，這可能與NaOH預處理后，締合的羥基（醇羥基和酚羥基）增多有關(guān)。波數(shù)2 922.7，2 851.7 cm-1為脂肪族—CH2—，—CH3，伸縮振動，相比于原煤樣和Ⅱ-殘煤，Ⅰ-殘煤吸收峰強度更弱，這說明是菌株作用褐煤過程中，使其亞甲基和甲基官能團減少。波數(shù)1 620.9，1 447.3，1 109.3 cm-1分別是芳香族CC骨架振動、苯環(huán)骨架的振動和醚、酯、醇鍵的伸縮振動，相比于其它，Ⅰ-殘煤特征峰峰距更小，強度更低。振動的減弱說明菌株F.spp.NF01作用于褐煤解聚，使波數(shù)處的官能團減少。相比其它煤樣，Ⅰ-殘煤791.6，702 cm-1波數(shù)處的芳環(huán)C—C和C—H鍵面外伸縮振動強度明顯減弱，說明Ⅰ-殘煤煤樣中芳環(huán)側(cè)鏈基團減少，該菌株作用使芳環(huán)的側(cè)鏈斷裂，生成了簡單的芳香族化合物。還有Ⅰ-殘煤540，473 cm-1處波數(shù)的減弱，說明該菌株作用于褐煤過程中，解聚了高嶺石、蒙脫石、伊利石等官能團。

2.5 褐煤的自由基從圖7（a）和圖7（b）所知，Ⅱ-殘煤、原煤樣和Ⅰ-殘煤的EPR波譜對稱性峰和自由基濃度依次增大。相比于原煤樣，Ⅱ-殘煤自由基濃度減少，說明預處理過程中自由基活性位點逐漸減少。在紅外光譜中，Ⅱ-殘煤羥基官能團的增多，可能與自由基位點被含氧官能團消耗有關(guān)。而對于原煤樣和Ⅱ-殘煤，菌株作用后的Ⅰ-殘煤，自由基濃度增大，說明菌株作用過程中發(fā)生了褐煤結(jié)構(gòu)的改變，使其結(jié)構(gòu)中的弱鍵斷裂并張開，以及芳香族結(jié)構(gòu)單元間橋鍵和側(cè)鏈的斷裂，使小分子自由基含量逐漸增加，自由基濃度升高。從圖7（c）可以看出，相比于原煤樣，Ⅱ-殘煤朗德因子g值增大可能與煤中含有的自由基種類、雜原子等有關(guān)。而對于原煤樣和Ⅱ-殘煤，Ⅰ-殘煤自由基g值的增大可能是產(chǎn)生較多小分子自由基中的雜質(zhì)成分有關(guān)，如氮、硫和一些金屬自由基。因為g值是表征分子內(nèi)部結(jié)構(gòu)特征的量，代表著不同的自由基種類。已有研究可知，碳原子為中心的自由基g值較小，過氧化、含硫類及金屬離子絡(luò)合物自由基g值偏大[30-31]。PETRAKIS研究了自由基g值，并總結(jié)出含氮自由基g為2.003 1，含硫自由基g為

2.008 0～2.008 1，這些雜原子自由基對g值有影響[32]。這與高階煤（無煙煤）含雜原子少，g值偏小的結(jié)果相一致。從圖7（d）可知，Ⅰ-殘煤煤樣譜線寬明顯偏大，相對于Ⅱ-殘煤和原煤樣。這說明該菌株作用褐煤過程中，形成了大量小分子自由基，電子自旋減弱，弛豫時間縮短，導致譜線寬度逐漸增大。

3 結(jié) 論

1）原位煤層中分離得到一株真菌，通過形態(tài)學特征和ITS測序鑒定，菌株為鐮刀菌屬。菌株F.spp.NF01分離與鑒定進一步豐富了降解褐煤的本源菌庫，為褐煤的生物降解研究提供了有價值的菌屬信息。2）F.spp.NF01生長于MM-SGC培養(yǎng)液中呈現(xiàn)堿性，pH值最高達9.41，生長6 d的菌絲可完全降（溶）解0.5 g預處理褐煤，且預處理褐煤的降（溶）解率，隨著含煤菌液pH值的升高而增大。菌株產(chǎn)生的堿性物質(zhì)參與了褐煤的降（溶）解。分析得到的生物學特征結(jié)果是剖析堿作用機理的重要數(shù)據(jù)，將為揭示堿作用機理研究起到積極作用。

3）褐煤的表征說明了F.spp.NF01可以降解預處理褐煤，使其表面形貌、官能團和自由基發(fā)生改變。在形貌上，表面變得更加粗糙，結(jié)構(gòu)增多。在官能團上，芳環(huán)側(cè)鏈基團、醚鍵、碳碳雙鍵、脂肪族甲基和亞甲基等官能團吸收峰強度減弱。在自由基上，自由基濃度、朗德因子g值和線寬ΔH增大。殘煤微觀結(jié)構(gòu)表征豐富了褐煤生物降解產(chǎn)物的研究，推進了降解產(chǎn)物的增值研究工作。

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