孫盾 丁健洋 劉天宇 薛桂新

(延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林 延吉 133002)

黑果花楸果實(shí)具有營(yíng)養(yǎng)、藥用、生態(tài)等價(jià)值，黑果花楸果實(shí)和提取物具有抗氧化、消炎、抗癌、降血糖等功效，能明顯改善和預(yù)防心腦血管疾病。在歐美發(fā)達(dá)國(guó)家常將黑果花楸提取物作為醫(yī)藥和保健食品，對(duì)治療高血壓和心臟病具有良好的作用[1]。近幾年，遼寧、吉林、黑龍江、山東、新疆、內(nèi)蒙古等地黑果腺肋花楸栽培面積逐步增加，僅吉林省延邊地區(qū)栽培面積近666.67hm2[2]。果實(shí)成熟度受多種復(fù)雜因素的影響，不同地區(qū)不同果園，其土壤肥力、光照、溫度、土壤濕度、果樹(shù)密度等因素不同，果實(shí)的成熟度也不同，最適宜采收期也不同。國(guó)內(nèi)在果實(shí)適宜采收期方面研究較多，張群等[3]研究黃桃適宜采收期，比較黃桃品質(zhì)特征和微觀結(jié)構(gòu)變化；彭媛媛等[4]研究新疆白葡萄適宜采收期，分析葡萄理化指標(biāo)和果實(shí)采收期之間的關(guān)系；習(xí)建龍[6]等研究晚熟臍橙品質(zhì)變化和適宜采收期。但有關(guān)黑果花楸果實(shí)適宜采收期的研究至今少見(jiàn)報(bào)道。

本文通過(guò)對(duì)黑果花楸果實(shí)可溶性固形物、總糖、含水量、總酸、維生素C、多酚、黃酮、花青素、果膠9項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定，分析其變化趨勢(shì)，目的是找出黑果花楸果實(shí)的適宜采收期，為黑果花楸果實(shí)加工利用以及消費(fèi)者正確食用提供技術(shù)依據(jù)和數(shù)據(jù)參考。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

黑果花楸果實(shí)采自吉林省汪清縣百草溝鎮(zhèn)旺欽百果園。

1.2 藥品和試劑

硫酸、咔唑、乙醇、KCl、鹽酸、CH3CO2Na·3H2O、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉、福林酚試劑、碳酸鈉、草酸、EDTA、偏磷酸、醋酸、鉬酸銨、苯酚，以上試劑為分析純。半乳糖醛酸、蘆丁、沒(méi)食子酸、抗壞血酸、葡萄糖，以上標(biāo)準(zhǔn)品均購(gòu)自上海源葉生物科技有限公司，均為優(yōu)級(jí)純。

1.3 主要儀器設(shè)備

BSA124S-CW電子分析天平，北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司；TDZ5-WS高速離心機(jī)，湖南湘儀實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；HH.S型電熱恒溫水浴鍋，江蘇省醫(yī)療機(jī)械廠；WY-055手持式折光儀，長(zhǎng)春市第四光學(xué)儀器廠；PHS-3C型酸度計(jì)，上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司；UV1101紫外分光光度計(jì)，上海新茂儀器有限公司。

1.4 實(shí)驗(yàn)方法

果實(shí)含水量參考GB 5009.3-2016，采用直接干燥法測(cè)量；可溶性固形物參考GB/T12295-90，用手持式折光儀測(cè)定；總酸測(cè)定參考GB/T 12456-2008，采用電位滴定法測(cè)定。

總糖測(cè)定參考劉志明等[7]和菜紅梅等[8]方法，方法略有改變。取黑果花楸果實(shí)醇提溶液于3000r·min-1離心10min后稀釋一定比例，吸取樣液1mL，加入1mL 5%苯酚溶液，混勻，加入5mL濃硫酸振蕩，靜置30min，470nm下測(cè)定吸光度。使用葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算總糖含量。

維生素C測(cè)定參考楊金風(fēng)等[9]鉬藍(lán)比色法。稱取適當(dāng)樣品，加入草酸-EDTA溶液，搗碎后放入50mL容量瓶定容，過(guò)濾后吸取25mL溶液于50mL容量瓶中，加入1.0mL偏磷酸-醋酸溶液和5%的硫酸2.0mL，搖勻后，加入4.0mL鉬酸銨溶液，以蒸餾水定容至50mL，15min后測(cè)定吸光度，并利用標(biāo)準(zhǔn)曲線求其含量。

總多酚測(cè)定參考Folin-Ciocalteu法[10]，定量采用沒(méi)食子酸作為標(biāo)準(zhǔn)品。取適當(dāng)?shù)南♂屢?mL，加入5mL蒸餾水，加入1mL福林試劑，7.5%的碳酸鈉溶液3mL，避光顯色2h。于765nm波長(zhǎng)下測(cè)定其吸光度值，利用曲線計(jì)算其含量。

總黃酮測(cè)定參考王曉林等[11]方法，方法略有改變。取樣液1mL，加入0.5mL 5%亞硝酸鈉后搖勻，放置6min。加入0.5mL 10%硝酸鋁搖勻，放置6min，加入5mL 4%氫氧化鈉，以60%乙醇定至10mL，搖勻，放置15min，以3500r·min-1離心10min，取上清液在509nm下測(cè)定吸光度，利用標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算總黃酮含量。

花青素測(cè)定參照馬養(yǎng)民[12]的方法，經(jīng)單因素試驗(yàn)最終確定，以水為提取溶液，1∶25的料液比，在30℃的水浴中浸提0.5h，經(jīng)過(guò)濾用紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)在543nm下測(cè)定吸光值，并按公式計(jì)算黑果花楸果實(shí)的花青素含量。

果膠物質(zhì)的測(cè)定參考龐榮麗等[13]的方法，方法略有改動(dòng)。稱取樣品2g，加入50mL 95%乙醇，加熱回流30min，過(guò)濾除去糖分及雜質(zhì)，將沉淀物移入原三角瓶中，加蒸餾水40mL，在50℃水浴中加熱并保持30min，過(guò)濾、洗滌。濾液移入50mL容量瓶定容，此為可溶性果膠測(cè)定液。沉淀物加0.5mol·L-1硫酸100mL，90℃水浴加熱1h，冷卻，移入250mL容量瓶定容，此為原果膠測(cè)定液。吸取稀釋液1mL放入試管中，加入5mL濃硫酸，搖勻，在冷水中冷卻15min。在85℃水浴中加熱20min，冷卻15min。加入0.25mL 0.15%咔唑混勻，放置30min。在529nm處測(cè)吸光度。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)利用SPSS ver.25.0 package program進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期含水量的測(cè)定與分析

由圖1可知，8月27日采摘的黑果花楸果實(shí)含水量最高，10月25日含水量達(dá)到最低，5個(gè)采摘日期果實(shí)樣品水分含量之間均存在顯著性差異(p<0.05)。隨著采摘日期的延長(zhǎng),黑果花楸果實(shí)含水量呈現(xiàn)持續(xù)降低趨勢(shì)。

圖1 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期含水量比較

2.2 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期可溶性固形物與總糖含量的測(cè)定與分析

由圖2、圖3可知，5個(gè)采摘日期的樣品可溶性固形物均存在顯著性差異(p<0.05)；總糖除9月26日和10月11日不存在顯著性差異外，其它日期均存在顯著性差異(p<0.05)；可溶性固形物和總糖含量均在10月25日達(dá)到最高。隨著采摘日期的延長(zhǎng)，可溶性固形物和總糖呈現(xiàn)逐步遞增趨勢(shì)，采收時(shí)間越晚，可溶性固形物和總糖越多，這是因?yàn)殡S著采摘日期延長(zhǎng)，果實(shí)內(nèi)合成酶逐步減少，降解酶逐步增加，由淀粉轉(zhuǎn)化為糖[14]，可溶性固形物和總糖含量都增高。再結(jié)合圖1，5個(gè)采摘日期果實(shí)含水量呈現(xiàn)降低趨勢(shì)，相應(yīng)提高了果實(shí)總糖和可溶性固形物含量，使兩者逐步升高。采摘過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，10月11日后采摘的果實(shí)表皮已經(jīng)皺縮，商品化程度降低。從這個(gè)角度分析，黑果花楸宜在10月10日之前采收。

圖2 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期可溶性固形物比較

圖3 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期總糖含量比較

2.3 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期總酸含量的測(cè)定與分析

由圖4可知，5個(gè)采摘日期黑果花楸果實(shí)樣品的總酸含量之間均存在顯著性差異(p<0.05)。隨著采收期的延長(zhǎng)，總酸含量呈現(xiàn)先升高再降低的趨勢(shì)，8月27日—9月12日呈升高趨勢(shì)，9月12日最高，9月12日后呈降低趨勢(shì)，尤其9月26日后含酸量下降很快。這是因?yàn)殡S著果實(shí)的成熟，呼吸作用加強(qiáng)，部分總酸分解。不論是鮮食還是加工，果實(shí)含酸量都不宜太高，從這個(gè)角度分析，黑果花楸宜在9月26日后采收。

圖4 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期總酸含量對(duì)比

2.4 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期維生素C含量的測(cè)定與分析

由圖5可知，8月27日與9月12日2個(gè)采摘日期樣品的維生素C含量無(wú)顯著性差異，9月26日、10月11日、10月25日3個(gè)采摘日期維生素C含量之間均存在顯著性差異(p<0.05)，且都與8月27日或9月12日的樣品有顯著性差異。在5個(gè)采摘日期中，維生素C含量呈先升高后下降的趨勢(shì)。9月12—26日維生素C含量增加較快達(dá)到最高，9月26日—10月11日下降較慢。從維生素C含量角度分析，9月26日—10月10日為黑果花楸果實(shí)適宜的采收期。

圖5 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期維生素C含量對(duì)比

2.5 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期總果膠含量的測(cè)定與分析

由圖6可知，5個(gè)采摘日期的樣品果膠含量均存在顯著性差異(p<0.05)。黑果花楸果實(shí)樣品果膠含量呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì)。這是因?yàn)殡S著采收期的延長(zhǎng)，黑果花楸果實(shí)逐漸成熟，至9月26日果膠合成量達(dá)到最高，以后果膠酶活性逐漸升高，果膠分解含量開(kāi)始下降。從果膠的含量看，9月26日果膠含量最多，為適宜采收期。

圖6 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期果膠對(duì)比

2.6 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期多酚含量的測(cè)定與分析

由圖7可知，5個(gè)采摘日期樣品的多酚含量均存在顯著性差異(p<0.05)。8月27日—9月12日多酚含量呈增加趨勢(shì)，9月12日達(dá)到最高，之后呈穩(wěn)定下降趨勢(shì)，是因?yàn)殡S著采摘日期的延長(zhǎng)，黑果花楸果實(shí)內(nèi)部發(fā)生生理生化變化，多酚合成與分解處于動(dòng)態(tài)平衡，合成大于分解含量增加，分解大于合成含量下降。多酚具有較強(qiáng)的抗氧化性，對(duì)正常細(xì)胞具有保護(hù)作用，同時(shí)抑制癌細(xì)胞[15]。多酚含量太高口感苦澀，不論鮮食還是加工產(chǎn)品都不宜太高，結(jié)合圖1含水量指標(biāo)綜合分析，9月26日—10月10日為適宜采收期。

圖7 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期多酚含量對(duì)比

2.7 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期黃酮含量的測(cè)定與分析

由圖8可知，5個(gè)采摘日期樣品的黃酮含量均存在顯著性差異(p<0.05)。隨著采摘日期的延長(zhǎng)，黑果花楸果實(shí)樣品的黃酮含量呈現(xiàn)出低→高→低→高→低波動(dòng)式變化趨勢(shì)，其中10月11日達(dá)到最高。黃酮具有提高人體造血能力、提高人體免疫力、保護(hù)DNA預(yù)防基因突變等的功效[16]。黃酮含量高可作為保健食品的優(yōu)質(zhì)原料。從保健作用分析，綜合考慮前述各指標(biāo)，9月26日—10月11日為適宜采收期。

圖8 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期黃酮對(duì)比

2.8 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期花青素含量的測(cè)定與分析

由圖9可知，5個(gè)采摘日期的樣品花青素含量均存在顯著性差異(p<0.05)。隨著采摘日期的延長(zhǎng)，黑果花楸果實(shí)樣品花青素含量與黃酮一樣呈現(xiàn)出低→高→低→高→低波動(dòng)式變化趨勢(shì)，其中9月12日和10月11日各出現(xiàn)1個(gè)峰值，此期間為適宜的采收期?；ㄇ嗨鼐哂锌寡趸⒖寡装Y、抗癌、抗肥胖、降血糖等多種藥理作用[17]。

圖9 黑果花楸果實(shí)不同采摘日期花青素對(duì)比

3 討論

黑果花楸果實(shí)各成分指標(biāo)受栽培方式[18]、氣候、土壤水分[19]、土壤酸堿度[20]、光照、肥料等多方面影響，不同采摘年份、不同采摘地點(diǎn)，結(jié)果可能存在一定的差異，本實(shí)驗(yàn)樣品來(lái)自汪清縣百草溝鎮(zhèn)旺欽百果園，其它地區(qū)黑果花楸有待于以后繼續(xù)研究。本實(shí)驗(yàn)僅為2020年的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，其它年份的實(shí)驗(yàn)結(jié)果有待于以后繼續(xù)研究。

4 結(jié)論

本文對(duì)不同采摘日期黑果花楸果實(shí)9個(gè)指標(biāo)進(jìn)行了測(cè)定與分析。其中，可溶性固形物、總糖適宜10月10日前采收，總酸、果膠適宜9月26日左右采收，維生素C、多酚、黃酮適宜9月26日—10月10日期間采收，花青素適宜9月12日—10月10日采收。綜合考慮黑果花楸果實(shí)的營(yíng)養(yǎng)、保健和商品化價(jià)值，吉林省延邊地區(qū)9月26日—10月10日，即國(guó)慶節(jié)前后為黑果花楸果實(shí)適宜的采收期。