王在竹
(廣東省知識產(chǎn)權保護中心,廣東廣州 510000)
毒品是危害人類健康的重大社會問題之一,常見的毒品類型包括嗎啡、海洛因、苯丙胺類、大麻類、氯胺酮、安非他明、甲基安非他明、可卡因等。毒品的分析檢驗技術為吸毒者的快速認定、打擊毒品違法犯罪行為提供了重要的保障。目前毒品的主要檢測方法包括化學分析法、光譜法、色譜法、色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法、毛細管電泳法、免疫學方法等[1]。免疫學分析法包括放射性免疫分析、酶聯(lián)免疫分析、熒光免疫分析和免疫層析檢測法等[2]。其中免疫層析檢測法是一種即時高效的檢測方法,適用于毒品的現(xiàn)場快速檢驗。本文對不同生物檢材中毒品的免疫層析檢測技術進行綜述。
毒品檢測常用的生物檢材包括尿液、唾液、血液、汗液和毛發(fā)等。其中尿液樣品采集方便,采用尿檢試紙或尿檢板進行檢測,操作簡單、速度快、成本低,是目前應用最廣泛的一種毒品檢測方法。但是該方法的檢測結果易受外界環(huán)境的影響,樣本采集過程中需避免漂白劑、清潔劑等化學物質(zhì)的影響,并控制采集時間。
唾液樣本的采集方便無創(chuàng),易于現(xiàn)場監(jiān)督防止樣本摻假,但是相比于血液和尿液樣本,唾液的采集量低,毒品及其代謝物質(zhì)在唾液中的含量少,需要更靈敏的檢測分析方法[3]。毒品血液檢測的時間范圍比較長,3年或5年內(nèi)均可檢測出來,但是血液樣品的采集具有一定的風險,且檢測需要專門的設備,在現(xiàn)場檢測中應用較少。汗液作為檢測樣本的優(yōu)點是不容易摻假,但是汗液的產(chǎn)生過程中的其他物質(zhì)會干擾檢測結果。毛發(fā)檢材具有易取材、易保存、不易作假、檢測時限長等優(yōu)點,可通過毛發(fā)分析大致推測過去一段時間內(nèi)吸食毒品的情況[4]。
免疫層析檢測法是根據(jù)抗原抗體的免疫反應及標記物的顯色反應進行檢測的方法,通常采用試紙條或檢測卡的形式,具有靈敏度高、特異性強、簡便、快速、穩(wěn)定等特點,特別適合在現(xiàn)場應用。
姜燕等[5]研制出了嗎啡—甲基安非他明二合一膠體金檢測卡,用于尿液中毒品的檢測和可疑人群的篩查。檢測尿中嗎啡最低濃度為300ng/ml,甲基安非他明最低濃度為1000ng/ml。曾立波等[6]建立了一種檢測尿液中苯丙胺的膠體金免疫層析技術,其檢測閾值為1000ng/ml,特異性為99.17%,準確性為99.54%。張戰(zhàn)平等[7]對尿吸毒(MOR/M-AMP)膠體金檢測法中的干擾因素進行了分析。萬林鈴[8]設計了一套對吸毒人員尿液進行檢測的快速毒品檢測儀,與免疫層析試紙條配合使用,可實現(xiàn)毒品的快速、準確檢測。
郭暢等[9]創(chuàng)建了毒品檢測的背景熒光猝滅—免疫層析法,其基于競爭法的膠體金免疫層析原理制備檢測安非他明(AMP)的金標試紙條,結合全自動干式熒光免疫分析儀進行檢測。采用該方法定量檢測唾液中的AMP,在0ng·ml-1~400ng·ml-1范圍內(nèi)與熒光猝滅信號呈良好的相關性,檢出限為0.9ng·ml-1,且與UPLC-MS/MS法檢測結果相關性良好。趙海鋒[10]應用膠體金免疫層析技術進行嗎啡(MOR)藥物濫用的尿液及唾液檢測研究,成功建立了尿液和唾液聯(lián)檢嗎啡的膠體金免疫層析方法。能在5min內(nèi)完成對嗎啡的檢測,尿樣和唾液的最小檢測限分別為300ng/ml、20ng/ml,適用于對嗎啡進行現(xiàn)場快速檢測。專利申請CN104634967A公開了采用膠體金免疫層析法快速檢測唾液中冰毒、可卡因、嗎啡、K粉四項毒品。靈敏度分別可達到1000ng/ml、300ng/ml、300ng/ml、1000ng/ml。CN208092059U、CN206892112U、CN-208092068U、CN208092064U分別公開了對唾液中甲基苯丙胺、嗎啡、氯胺酮和四氫大麻酚酸濃度進行定量檢測的上轉發(fā)光免疫層析試紙。
在進行免疫層析檢測之前,采集的毛發(fā)樣本需要進行前處理,前處理的一種方式是采用裂解液進行裂解,以析出毛發(fā)中所含的毒品及其代謝物。如專利申請CN110-987548A公開了一種檢測毛發(fā)中毒品用樣品前處理試劑,包括含有羥基的化合物,通過將毛發(fā)微粒中的二硫鍵打開,提高毛發(fā)中毒品分子釋放量,從而降低檢測限。CN110-208072A公開了一種用于痕量毒品檢測的人體毛發(fā)快速裂解液,通過裂解液的特定組成,充分快速地裂解角蛋白。
前處理的另一種方式是通過機械研磨的方式破碎毛發(fā),使其中的待測毒品釋放出來進行檢測。如CN108535-466A和CN109794327A公開了一種毛發(fā)中毒品現(xiàn)場檢測儀,其中采用研磨珠的高頻往復運動對角質(zhì)物進行研磨,然后采用膠體金板對研磨物進行檢測。CN112058411A公開了用于毒品檢測的人體毛發(fā)研磨裝置。
對于具體的檢測方法和產(chǎn)品,唐曉歡等[11]以液質(zhì)聯(lián)用法為標準,進行膠體金試紙法檢測頭發(fā)樣本中嗎啡(MOP)和甲基苯丙胺(MA)的準確性及可靠性研究,結果膠體金試紙法檢測頭發(fā)樣本中MOP的靈敏度為88.24%,特異度為100%,檢測MA的靈敏度為60.61%,特異度為100%。CN109061204A公開了一種熒光免疫檢測毛發(fā)痕量毒品的試劑盒,包括樣品裂解液和熒光免疫層析試紙條,其中試紙條采用量子點納米顆粒作為檢測標記物,能夠快速、準確、靈敏的對毛發(fā)中的毒品進行檢測。CN109490538A公開了一種熒光免疫痕量毛發(fā)毒品四合一檢測試劑盒,包括盒體和熒光免疫層析試紙條,可同時對四種毒品進行檢測,極大地提高了檢測效率。
免疫檢測技術的發(fā)展為毒品的快速現(xiàn)場檢測提供了便利,特別是毛發(fā)樣品的檢測,免疫層析檢測試紙配合各種毛發(fā)前處理試劑和破碎儀器的應用,能夠在無損傷的情況下,快速的檢測出毒品的含量,為公安機關打擊毒品違法犯罪行為提供了重要的保障。