馮曉衛(wèi) 胡 琦

淋巴瘤是原發(fā)于淋巴結(jié)、結(jié)外淋巴組織或器官的免疫系統(tǒng)惡性腫瘤，在我國惡性腫瘤病死率中排名第10位[1]。分為霍奇金病(Hodgkin′s disease，HD)和非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin′s lymphoma，NHL)兩類，NHL約占90%，臨床以淋巴結(jié)腫大、淋巴結(jié)外器官受累，或伴發(fā)熱、盜汗、瘙癢、消瘦等全身癥狀為主要表現(xiàn)，現(xiàn)代醫(yī)學主要采用化療、放療、手術(shù)、移植、生物免疫和靶向治療等為主的綜合治療方案。約10%～60%患者一線化療無效或治療緩解后復發(fā)，還有部分患者因高齡或全身合并癥而不適合、不耐受此類治療。中藥復方辨治淋巴瘤，具有能延長生存時間、提高生存質(zhì)量、不良反應少等優(yōu)勢，挖掘中藥復方治療淋巴瘤的臨床價值意義重大。

淋巴瘤在中醫(yī)對應病名有“惡核”、“石疽”等，最主要的病理因素為痰、毒、瘀、虛，主要證型有痰熱蘊結(jié)、氣血兩虛、肝腎陰虛、氣郁痰結(jié)、脾虛痰濕等，治以清熱解毒、化痰散結(jié)、滋補肝腎、健脾益氣，軟堅散結(jié)等法?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)，中藥存在多成分多靶點的特性，可能通過多條信號通路達到較好的治療效果，改善預后情況。本文擬通過整理近十年中藥在調(diào)控淋巴瘤相關(guān)信號通路分子的研究展開綜述，對淋巴瘤細胞增殖、分化、凋亡等相關(guān)的通路及關(guān)鍵分子，如PD-1/PD-L1信號通路、PI3K-Akt-mTOR信號通路、p38-MAPK信號通路、JAK-STAT信號通路、經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路、NF-κB信號通路等6條信號通路，以期為闡明中醫(yī)藥治療淋巴瘤的作用靶點，探索中西藥物協(xié)同機制，提高淋巴瘤的療效提供幫助。

一、PD-1與 PD-L1通路

程序性死亡受體-1(programmed cell death-1，PD-1)為Ⅰ型跨膜糖蛋白，是重要的免疫共抑制受體，PD-L1(programmed cell death ligand 1)是PD-1的配體之一，當PD-1與PD-L1通路激活時，通過PD-L1介導的抗凋亡信號促進腫瘤細胞存活，抑制識別腫瘤抗原的T細胞活化和增殖，最終導致效應T細胞和記憶細胞生成減少，進而誘導T細胞耗竭，從而實現(xiàn)腫瘤的免疫耐受[2]。PD-L1在血液系統(tǒng)惡性腫瘤及各種實體瘤中上調(diào)并表達，使用免疫組織化學(IHC)可以檢測細胞表面上的PD-1和PD-L1表達[3]。PD-1及PD-L1的單克隆抗體可阻斷PD-1及PD-L1在淋巴瘤中的高表達情況，具有抑制腫瘤細胞惡性增殖，改善T淋巴細胞功能等作用，在經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤(classical Hodgkin lymphoma,CHL)、彌漫大B細胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)和濾泡性淋巴瘤(follicular lymphoma,FL)中表現(xiàn)出較好的療效[4]。

消瘰丸出自《醫(yī)學心悟》，由玄參、牡蠣、貝母組成，具有軟堅散結(jié)、清潤化痰的功效，其散結(jié)之力較強，在現(xiàn)代藥理學上對于治療體表腫塊、腫瘤、瘰疬、淋巴結(jié)腫大等病運用較多。劉群英等[5]用消瘰丸與PD-L1阻斷劑對淋巴瘤患者T細胞進行干預，發(fā)現(xiàn)消瘰丸聯(lián)合PD-L1阻斷劑組對T細胞的抑制作用高于PD-L1阻斷劑組，表明消瘰丸可以增強CD8+T細胞的活性，促進PD-1陽性表達。

人參皂苷Rg3是人參皂苷中的一種，屬于人參中的活性成分，現(xiàn)代藥理學研究發(fā)現(xiàn)它可以提高機體免疫力，還具有一定的抗腫瘤作用。郭奕維等[6]用人參皂苷Rg3與PD-1抑制劑合用，發(fā)現(xiàn)人參皂苷Rg3可促進PD-1抑制劑恢復T細胞的增殖作用，減少T細胞凋亡，增加細胞因子IL-2和IFN-γ的分泌，增強PD-1抑制劑對彌漫大B細胞淋巴瘤的抗腫瘤作用。

二、PI3K-AKT-mTOR信號通路

磷脂酰肌醇3-激酶 (phosphatidylin-ositol-3-kinase，PI3K)-蛋白激酶 B(protein kinase B，PKB，又稱 AKT)-雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin ，mTOR)，此信號通路通過Ser/Thr蛋白激酶轉(zhuǎn)導，與細胞的增殖、凋亡等過程關(guān)系密切，在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中扮演著重要角色，廣泛存在于淋巴瘤、肺癌、乳腺癌等惡性腫瘤中[7～9]。馬濤等[10]研究發(fā)現(xiàn)，此信號通路與細胞生長、蛋白質(zhì)翻譯、細胞周期及血管生成等密切相關(guān)，與DLBCL、套細胞淋巴瘤(mantle cell lymphoma,MCL)的發(fā)病密切相關(guān)。

益氣除痰方以黨參、白術(shù)、云苓補氣健脾，半夏、枳實、瓜蔞皮化痰消積，魚腥草、露蜂房解毒散結(jié)，張江召等[11]用益氣除痰方干預小鼠，制備含藥血清，用不同分數(shù)的含藥血清處理NK-T淋巴瘤細胞SNK-6后，下調(diào)了p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白的表達，表明益氣除痰方對NK-T細胞淋巴瘤具有抑制生長的機制與PI3K-AKT-mTOR信號通路有關(guān)。

夏枯草有散結(jié)消腫、清熱瀉火、明目之功效，現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，其散結(jié)消腫之功在治療淋巴結(jié)腫大、乳腺增生、甲狀腺腫大等時效果較好。劉新奎等[12]研究發(fā)現(xiàn)，夏枯草具有較好的體外抗淋巴瘤增殖和誘導淋巴瘤細胞凋亡的作用，這種抑制作用可能是通過激活JNK信號轉(zhuǎn)導通路，抑制AKT通路激活實現(xiàn)的。

白花蛇舌草具有清熱解毒、清利濕熱、消癰等功效，現(xiàn)代在消炎、提高免疫力、抗腫瘤等方面具有良好特性。李華等[13]研究發(fā)現(xiàn)，白花蛇舌草與PI3K通路抑制劑LY294002對人淋巴瘤Raji細胞增殖的抑制效果相似，而聯(lián)合LY294002對人淋巴瘤Raji細胞處理時，比單用LY294002對Raji細胞的增殖抑制效果更顯著，PI3K-AKT信號通路中p-PI3K、p-AKT蛋白含量降低更明顯，提示其作用機制可能與抑制此信號通路活化相關(guān)。

三、p38-MAPK信號通路

絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase, MAPK)是細胞內(nèi)的一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，參與細胞增殖、凋亡及基因表達調(diào)控，在多種受體信號傳遞途徑中起著關(guān)鍵作用。p38-MAPK信號通路為MAPK家族的重要成員, 最早因與氧化應激相關(guān)而被關(guān)注，不僅在炎癥、應激反應中具有重要作用，近年研究發(fā)現(xiàn)它在淋巴瘤、胃癌、白血病等多種腫瘤細胞中，與凋亡的啟動、細胞周期等密切相關(guān)[14～16]。

謝會霞等[17]研究發(fā)現(xiàn)，雷公藤內(nèi)酯醇可以誘導皮膚T細胞淋巴瘤Hut102細胞凋亡，在加入p38MAPK特異性抑制劑SB203580后淋巴瘤細胞的凋亡作用顯著減弱，提示雷公藤內(nèi)酯醇誘導淋巴瘤Hut102細胞凋亡可能與激活p38MAPK信號通路有關(guān)。

傅士龍[18]研究發(fā)現(xiàn)，木蝴蝶苷B通過誘導MKK3表達升高來激活p38-MAPK 這條信號通路，進而激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激的重要抑瘤基因DNA損傷誘導轉(zhuǎn)錄因子DDIT3，從而導致淋巴瘤細胞脹亡和凋亡。并且在小鼠體內(nèi)實驗結(jié)果顯示木蝴蝶苷B能有效地抑制淋巴瘤生長，并且其毒性和不良反應都相對較小。

四、JAK-STAT信號通路

Janus激酶/信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活因子(the janus kinase/signal transducer and activator of transcriptions，JAK/STAT)信號通路是眾多細胞因子信號轉(zhuǎn)導的共同途徑，參與細胞增殖、分化、凋亡以及炎癥等過程，酪氨酸激酶相關(guān)受體、酪氨酸激酶JAK和轉(zhuǎn)錄因子STAT是其通路的主要3個成分，此信號通常產(chǎn)生于細胞膜表面的受體，然后傳輸至細胞核內(nèi)，STAT在細胞核內(nèi)與特異性的DNA啟動子結(jié)合，在多種腫瘤細胞和組織中都有激活，如NHL、乳腺癌和白血病等各種腫瘤中[19～21]。

芪貞歸脾湯為歸脾湯的加減方，張影等[22]通過高通量組學基因芯片技術(shù)探究芪貞歸脾湯對淋巴瘤細胞的可能作用靶點，研究發(fā)現(xiàn)，芪貞歸脾湯在基因水平上顯著抑制JAK-STAT、PI3K-AKT這兩條信號通路，且實時熒光定量PCR驗證與基因芯片結(jié)果一致，通過這兩條信號通路抑制淋巴瘤細胞的增殖，促進其凋亡，并抑制遷移和侵襲。

夏枯草提取物可以抑制漸變性淋巴瘤Karpas299細胞增殖，并誘導淋巴瘤Karpas299細胞發(fā)生早期凋亡，李偉明[23]采用TMT定量蛋白質(zhì)組學技術(shù)探索夏枯草提取物對淋巴瘤細胞蛋白表達變化，經(jīng)質(zhì)譜鑒定上調(diào)164個蛋白和下調(diào)244個蛋白的表達,并用免疫組化和Western blot法驗證，結(jié)果顯示其作用機制主要是下調(diào)p-JAK3、p-STAT3、p-JAK3、p-AKT、Bcl-2、cyclinD3、mTOR蛋白的表達，上調(diào)TNF-α、Bax、caspase-3蛋白的表達，通過JAK-STAT、PI3K-AKT、JNK-cJun這3條信號通路發(fā)揮抗腫瘤效果。

白藜蘆醇是一種非黃酮類多酚有機化合物，具有抗氧化、抗腫瘤、抗炎等作用。姬穎華等[24]研究發(fā)現(xiàn)，白藜蘆醇(resveratrol, RES)在伯基特淋巴瘤細胞株中,對IL-6/JAK2/STAT3信號通路的抑制作用可能通過下調(diào)由IL-6引起的p-JAK2、p-STAT3的表達，提高促凋亡因子的表達，降低抗凋亡因子的表達，促進腫瘤細胞的凋亡，發(fā)揮抗腫瘤的作用。

五、經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路

經(jīng)典Wnt (canonical Wnt/β-catenin pathway, Wnt/β-catenin)信號通路在正常成熟細胞中呈關(guān)閉狀態(tài)，其異常持續(xù)性激活與很多腫瘤的發(fā)病有關(guān)。Wnt蛋白與細胞表面受體復合物跨膜蛋白結(jié)合后，破壞蛋白酶體復合物形成，使胞質(zhì)中β-catenin逃脫降解，并轉(zhuǎn)位細胞核與T細胞因子(TCF)結(jié)合形成復合物，再和其他轉(zhuǎn)錄輔助因子如CREB結(jié)合蛋白(CBP)共同啟動下游靶基因的活化包括c-myc、cyclinD1、PPAR、COX2、CD44和MMP7等。張文迪等[25]研究發(fā)現(xiàn)，Wnt/β-catenin信號通路的激活能夠促進MCL細胞的增殖及侵襲性生長。在淋巴瘤的形成和耐藥上，Wnt/β-catenin信號通路在T細胞、B 細胞淋巴瘤上都具有調(diào)節(jié)作用[26]。

Kawahara等[27]研究發(fā)現(xiàn)，含黃酮類中藥化合物具有抑制淋巴瘤細胞增殖、調(diào)控細胞周期，并有效阻斷經(jīng)典Wnt信號通路的作用，經(jīng)典Wnt信號通路可能是導致NHL的分子作用機制之一。

六、NF-κB信號通路

核因子κB(nuclear factor kappa-B，NF-κB)信號通路是一種廣泛存在于真核細胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子，它參與機體的炎性反應、免疫應答、腫瘤的發(fā)生及發(fā)展、調(diào)節(jié)細胞凋亡、氧化應激反應等。NF-κB首先在B淋巴細胞中發(fā)現(xiàn)，是一種能與B淋巴細胞免疫球蛋白κ輕鏈基因的增強子κB序列特異性相結(jié)合的蛋白，在腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程中起重要作用。

胡施煒等[28]研究發(fā)現(xiàn)，大黃酸可以抑制彌漫大B細胞OCI-LY8 細胞增殖和誘導其凋亡，其作用機制主要下調(diào)Rip2表達后，減弱IκBα磷酸化和IKK復合體的形成，使IκBα降解量減少，最終也相應的減少了游離入核的p65/p52二聚體數(shù)量，抑制了NF-κB信號通路的持續(xù)性活化。

毛萼乙素能顯著抑制淋巴瘤細胞的增殖，降低增殖蛋白的表達，上調(diào)凋亡蛋白的表達。使磷酸化NF-κB和激活因子IκB激酶表達減少，抑制NF-κB信號通路的轉(zhuǎn)導[29]。漢黃芩素是唇形科植物黃芩的主要活性成分之一，在多種疾病和實體瘤中表現(xiàn)出高效低毒的抗腫瘤效果。研究發(fā)現(xiàn)，漢黃芩可以通過下調(diào)NF-κB的表達來抑制淋巴瘤Raji細胞的生長，通過LMP1/NF-κB/miR-155/PU.1途徑誘導淋巴瘤細胞Raji細胞的凋亡[30]。

七、展 望

本文闡述了近年來包括PD-1/PD-L1信號通路、PI3K-AKT-mTOR信號通路、p38-MAPK信號通路、JAK-STAT信號通路、經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路、NF-κB信號通路等6條淋巴瘤信號通路及中藥干預的相關(guān)研究進展，中藥單體及復方制劑對于淋巴瘤的作用機制及實驗研究取得了很大的進展。但是，中藥復方目前還缺乏可靠的RCT支撐，如果能利用網(wǎng)絡大數(shù)據(jù)(網(wǎng)絡藥理學)、系統(tǒng)生物學基因測序、蛋白組學和代謝組學等研究方法對淋巴瘤多信號轉(zhuǎn)導體系的上下游調(diào)控基因以及靶點蛋白進行更系統(tǒng)深入的研究，探索與開發(fā)針對不同信號通路的有效藥物，更全面揭示中醫(yī)藥治療淋巴瘤的作用機制并優(yōu)化組方、提高臨床療效。與此同時，將中藥復方的實驗研究與臨床實踐中相融合，可以充分展現(xiàn)中醫(yī)藥的可靠性和科學性，對推動中醫(yī)藥走向世界具有積極意義，對淋巴瘤的發(fā)病機制有更多的發(fā)現(xiàn)，引導探索與開發(fā)針對不同信號通路淋巴瘤治療的有效藥物。