王 磊，劉海霞，王艷曉

(1.天津市農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測與農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量檢測中心，天津 300402；2.天津瑞普生物技術(shù)股份有限公司，天津 300402)

0 引言

畜禽疫病是制約我國養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的因素之一。近年來，在我國流行的禽流感、新城疫、口蹄疫等疫病屢見報道，給畜牧業(yè)和養(yǎng)殖戶帶來了很大的損失。因此預(yù)防重大畜禽疫病的大規(guī)模暴發(fā)成為我國動物防疫工作的重中之重。

免疫抗體檢測技術(shù)是依據(jù)畜禽疫病病原體為抗原的特異性免疫識別的抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)的檢測技術(shù)。目前，在國內(nèi)重大畜禽疫病預(yù)防中，AIAD提供了較好的技術(shù)支撐，發(fā)揮了不可替代的作用。本文總結(jié)AIAD在預(yù)防重大畜禽疫病中的重要作用，以期為更好地應(yīng)用該項技術(shù)，促進畜牧業(yè)持續(xù)健康發(fā)展提供有益建議。

1 動物免疫抗體檢測技術(shù)對預(yù)防重大畜禽疫病的作用

1.1 對畜禽疫病的診斷確認(rèn)

由于流行疫病的突變性和不可控性，需要采用科學(xué)的手段進行檢測，才能對疫病進行確診。利用動物免疫抗體檢測技術(shù)可以對畜禽是否患有疫病進行生物學(xué)檢測，對采集的畜禽血清、分泌物等樣本，采用血清學(xué)檢測法、酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)檢測法、免疫層析檢測法等進行測定分析，可以檢測出采集樣本中是否含有疫病病原體，而且可以定量分析出樣本中所含有的抗體數(shù)量，從而確定患病畜禽感染的嚴(yán)重程度。如對某養(yǎng)雞場死亡的50日齡肉雞解剖后，排除細菌感染，取雞胚囊素液進行雞新城疫病毒(NDV)抗體檢測。結(jié)果顯示，30只雞抗體水平異常偏高，結(jié)合臨床表現(xiàn)，即可診斷為雞新城疫強毒感染。

1.2 對畜禽接種疫苗效果評估

對于高風(fēng)險、高致病性的畜禽疫病，可采用接種疫苗進行預(yù)防。我國畜牧業(yè)監(jiān)管部門對于常見多發(fā)疫病都有免疫密度和免疫抗體合格率的具體要求。免疫抗體檢測技術(shù)可用于檢驗畜禽接種疫苗的免疫程度，通過多克隆抗體檢測技術(shù)、單克隆抗體檢測技術(shù)等研究免疫效果，為疫苗接種效果提供評價依據(jù)。通過免疫抗體檢測技術(shù)對某一地區(qū)的禽流感和家畜口蹄疫抗體水平進行檢測，可以準(zhǔn)確直觀地反映該地區(qū)的畜禽重大疫病疫苗的免疫情況，對接種疫苗的效果進行評價[2]。運用免疫抗體檢測技術(shù)對動物免疫抗體進行監(jiān)測，可為免疫質(zhì)量的評估提供重要依據(jù)，從而推動重大動物疫病防疫工作的防控效果。在大面積集中免疫后，通過對動物免疫抗體的監(jiān)測，可以評估該群體的免疫合格率。在監(jiān)測過程中，加強對動物群體抗體動態(tài)變化的監(jiān)控，同時還可以評估抗體的持續(xù)時間，為疫苗的接種周期提供科學(xué)依據(jù)。在監(jiān)測過程中，可采用隨機抽樣和重點抽樣相結(jié)合的方式進行檢測，以保證檢測結(jié)果的代表性。

1.3 疫苗生產(chǎn)和疫苗質(zhì)量檢測的基礎(chǔ)

在重大畜禽動物疫病防控中，最重要的方法是通過接種動物疫苗進行預(yù)防，做好動物疫病的預(yù)防工作比做好動物疫病的診治工作具有更重要的意義。做好畜禽重大疫病預(yù)防工作與畜禽疫苗的質(zhì)量有著直接的關(guān)系。畜禽疫苗的研究和生產(chǎn)主要通過免疫抗體檢測技術(shù)實現(xiàn)。有研究報道，豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)中應(yīng)用了血清抗體ELISA檢測和各種類型的RT-PCR檢測方法，以及由此開發(fā)出的活疫苗、滅活苗、亞單位疫苗、DNA疫苗以及載體疫苗等不同類型的單苗以及聯(lián)苗。在實際接種過程中，接種疫苗的質(zhì)量受很多因素的影響，主要包括接種時間、接種劑量及接種程序等，對于不同動物機體的免疫應(yīng)答能力不一樣，接種效果也不一樣。所以，當(dāng)接種疫苗后，還應(yīng)對疫苗的接種質(zhì)量進行監(jiān)測，這同樣離不開抗體檢測技術(shù)的應(yīng)用。

1.4 為重大畜禽疫病的流行提供預(yù)警監(jiān)測

預(yù)警機制是指事件發(fā)生前預(yù)先發(fā)出警示的機制。建立重大畜禽疫病流行預(yù)警機制對于預(yù)防疫病的流行十分重要?？茖W(xué)合理地建立預(yù)警機制離不開對疫病檢測技術(shù)的成熟運用。應(yīng)當(dāng)完善重大畜禽疫病監(jiān)測體系，充分掌握動物免疫抗體檢測技術(shù)，使其在監(jiān)測疫病過程中發(fā)揮準(zhǔn)確高效的警示作用，從而為建立重大畜禽疫病預(yù)警系統(tǒng)提供科學(xué)依據(jù)。

動物疫病一般在春季和秋季容易集中發(fā)生，因此應(yīng)在春季和秋季進行集中監(jiān)測，并對養(yǎng)殖場、屠宰場及交易市場等，做好采樣監(jiān)測工作，對免疫效果進行準(zhǔn)確評估。集中監(jiān)測就是做好重大動物疫病的集中免疫工作。定點監(jiān)測就是根據(jù)當(dāng)?shù)氐膭游镆卟×餍刑攸c，在區(qū)域內(nèi)設(shè)立固定的監(jiān)測點，并進行持續(xù)監(jiān)測。應(yīng)急監(jiān)測則是針對突發(fā)的動物疫病及時組織監(jiān)測，并評估動物的免疫保護水平和疫病范圍，從而組織疫病的防治工作[6]。

2 存在的主要問題

2.1 動物免疫抗體檢測技術(shù)需要進一步完善

目前免疫抗體檢測技術(shù)，如膠體金免疫層析法、單克隆抗體技術(shù)等由于敏感性好、特異性強、可重復(fù)使用、結(jié)果便于長期保存等優(yōu)點，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于動物疫病的預(yù)防、疫苗的研究和疫情的診斷等實際工作中[7]。但是免疫抗體檢測方法中用到的抗原或抗體制備、篩選過程比較復(fù)雜，要求純度比較高，疫病的病原體變異快，特異性位點不易確定，同時存在單克隆抗體細胞株不穩(wěn)定，酶結(jié)合物的特異性、陽性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)的確定等一系列問題。因此，在應(yīng)用過程中還需要進一步探索其發(fā)展規(guī)律，揚長避短。

2.2 動物免疫抗體檢測技術(shù)研究力量需提升

近年來，伴隨經(jīng)濟不斷發(fā)展，科學(xué)技術(shù)水平逐漸提升，我國獸醫(yī)檢驗用動物免疫抗體檢測技術(shù)一直在不斷進步與發(fā)展。但是，上述免疫檢測技術(shù)力量多集中在較發(fā)達的城市，對于畜禽養(yǎng)殖一線及其附近邊遠城市，獸醫(yī)實驗室設(shè)備落后，診斷疫情不及時，對重大動物疫病防控工作影響較大。

2.3 研究人員專業(yè)水平不高

動物免疫抗體檢測技術(shù)對獸醫(yī)實驗室人員的專業(yè)要求很高。而獸醫(yī)研究人員的培養(yǎng)一直以來都是一件非常困難的事情，在進行日常免疫預(yù)防、免疫監(jiān)測等工作的技術(shù)人員往往不具備高精尖的技術(shù)水平，導(dǎo)致疫病確診率及監(jiān)測數(shù)據(jù)采集可能不準(zhǔn)確。目前，獸醫(yī)實驗室人員專業(yè)素養(yǎng)不高的問題，短時間內(nèi)還沒有辦法得到根治，這不僅是獸醫(yī)專業(yè)技術(shù)研究發(fā)展的瓶頸，更給重大動物疫病的防控帶來很大的難度。

3 建議及對策

3.1 積極運用新的AIAD解決現(xiàn)有問題

目前，面對現(xiàn)有AIAD存在的問題，研究人員已利用其規(guī)律發(fā)現(xiàn)了新的AIAD，如免疫傳感器、蛋白質(zhì)芯片技術(shù)等，隨著新技術(shù)的不斷涌現(xiàn)，可以逐步突破原有技術(shù)的瓶頸。在分子生物學(xué)技術(shù)高速發(fā)展下，還可以應(yīng)用RT-PCR、基因芯片、RNA指紋圖譜等技術(shù)，對突變病原基因或突變位點進行精準(zhǔn)定位，從而解決抗原單一且易突變等一系列問題，可極大提高我國畜禽疫病預(yù)防工作的成效。

3.2 建立完善的動物疫病監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)

動物免疫抗體監(jiān)測是預(yù)防重大動物疫病的重要工作，要提升免疫抗體監(jiān)測的質(zhì)量和效果，就要建立完善的動物疫病監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)。動物疫病監(jiān)測網(wǎng)絡(luò)布局要根據(jù)監(jiān)測目標(biāo)制訂明確的管理規(guī)范應(yīng)以區(qū)域監(jiān)控為主，覆蓋全部監(jiān)測區(qū)域。。在動物疫病監(jiān)測過程中，要做好集中監(jiān)測、常規(guī)監(jiān)測、定點監(jiān)測和應(yīng)急監(jiān)測。

3.3 加強檢測實驗室建設(shè)，提高人才隊伍專業(yè)技術(shù)水平

加強動物抗體監(jiān)測就要進一步完善養(yǎng)殖一線地區(qū)實驗室的建設(shè)，重視專業(yè)人才隊伍的建設(shè)，不斷提升免疫監(jiān)測水平。在一些一線地區(qū)及邊遠城市，須擴大經(jīng)濟投入，因地制宜建立獸醫(yī)實驗室，配備相關(guān)儀器設(shè)備，建設(shè)專業(yè)人才隊伍，建立完善的檢測程序和數(shù)據(jù)錄入系統(tǒng)，滿足養(yǎng)殖業(yè)一線的檢測需求。應(yīng)更新老舊實驗室及老舊設(shè)備，以提高檢測的精準(zhǔn)性，同時注重相關(guān)人員的培訓(xùn)，不斷提升實驗室檢驗人員的業(yè)務(wù)水平和檢驗水平。

4 結(jié)語

動物免疫抗體技術(shù)在預(yù)防和控制畜禽動物疫病發(fā)生過程中發(fā)揮著十分重要的作用，也是預(yù)防動物疫情發(fā)生最關(guān)鍵的工作。在應(yīng)用動物免疫抗體技術(shù)預(yù)防畜禽重大疫病過程中，必須將動物免疫接種抗體監(jiān)測工作落到實處，保證免疫時間和免疫程序科學(xué)、有效，并選擇高質(zhì)量的疫苗，按照標(biāo)準(zhǔn)進行免疫接種，提高免疫質(zhì)量，最大程度控制和減少畜禽重大動物疫病的發(fā)生。