李金龍,宋 欣,陳 薇
術(shù)中快速冷凍病理技術(shù)是病理科常規(guī)技術(shù)操作之一,因其診斷快速、準(zhǔn)確而頗受臨床醫(yī)師的認(rèn)可。北方地區(qū)冬季干燥,大部分醫(yī)院病理科技師在切片過程中產(chǎn)生靜電,切片后進(jìn)行貼片時(shí),組織切片在靜電作用下吸附在玻片上,造成貼片后組織出現(xiàn)皺縮、粘連甚至斷裂現(xiàn)象,影響制片效果及病理診斷的準(zhǔn)確性。本科室對(duì)術(shù)中快速冷凍的全流程進(jìn)行探討和實(shí)踐,發(fā)現(xiàn)一種減少術(shù)中冷凍貼片過程中玻片靜電的方法,現(xiàn)介紹如下。
1.1 材料日本櫻花Tissue-Tek Polar冷凍切片機(jī),載玻片,AAF固定液(95%乙醇85 mL+40%濃甲醛10 mL+冰醋酸5 mL),毛筆,染色缸,顯微鏡。
1.2 方法用冷凍切片機(jī)切取組織后,將已標(biāo)記病理號(hào)的載玻片末端微貼進(jìn)固定液液面下(圖1),再用載玻片貼片已經(jīng)切好的組織薄片。
圖1 將已標(biāo)記病理號(hào)的載玻片末端微貼進(jìn)固定液液面下
實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),在貼片過程中幾乎無靜電作用的發(fā)生,貼片位置一般位于載玻片中央位置,不會(huì)觸及微浸入固定液面下的部分載玻片,組織切片不會(huì)因靜電作用主動(dòng)吸附在準(zhǔn)備貼片的載玻片上,鏡下無因靜電作用而引起的褶皺、粘連甚至斷裂現(xiàn)象(圖2),效果良好。
圖2 A.貼片過程中因靜電作用導(dǎo)致切片染色后鏡下出現(xiàn)裂隙、褶皺;B.貼片過程中消除靜電作用,切片染色后鏡下未見裂隙、褶皺
術(shù)中快速冷凍制片技術(shù)在病理科中的應(yīng)用十分重要,掌握并熟練使用術(shù)中快速冷凍制片技術(shù),可以在短時(shí)間內(nèi)快速、準(zhǔn)確的得到一張近乎于常規(guī)的染色切片,對(duì)疾病的診斷方向判斷,手術(shù)方式的選擇等方面均有極大的幫助,因此,在日常工作中極受臨床醫(yī)師的認(rèn)可,但同時(shí)也對(duì)病理醫(yī)師和技師提出了更高的要求,優(yōu)秀的病理醫(yī)師做出準(zhǔn)確的病理診斷依賴于優(yōu)質(zhì)的病理切片,而一張優(yōu)質(zhì)的術(shù)中快速冷凍病理切片應(yīng)該在制片染色效果上無限接近于常規(guī)病理切片的染色效果。北方冬季氣候寒冷干燥,當(dāng)濕度低于40%時(shí),切片常因靜電現(xiàn)象,導(dǎo)致切片困難和切片的組織薄片粘連或出現(xiàn)裂隙、褶皺、顫痕和切片速度慢等問題[1-2],影響制片質(zhì)量從而影響病理醫(yī)師診斷的準(zhǔn)確性。
在常規(guī)制片過程中,大部分北方醫(yī)院的病理科實(shí)驗(yàn)室常常采用配備的加濕器或購買廠家自帶的加濕設(shè)備來減少或消除常規(guī)制片過程中所產(chǎn)生的靜電問題,使用效果良好,但在術(shù)中冷凍切片機(jī)中由于制片環(huán)境局限及其他細(xì)節(jié)因素的影響,無法使用加濕設(shè)備,有實(shí)驗(yàn)者[3]曾采用摘掉手套用人體導(dǎo)電的方法來減少或消除冷凍切片機(jī)的靜電問題,存在較大的衛(wèi)生安全問題,且不符合操作技術(shù)規(guī)范要求,因此筆者并不提倡使用該方法,考慮到導(dǎo)電問題,采用載玻片先浸入固定液導(dǎo)電再貼片組織的方法來消除或減少靜電,一方面原本載玻片貼片組織后就需要放入固定液中固定不會(huì)對(duì)載玻片和組織造成污染,另一方面可以利用固定液中液體的導(dǎo)電性消除或減少部分靜電問題,一舉兩得,簡單易行,效果良好,值得推廣。