楊士杰 黃六仟

摘要 本文以戊唑醇為試劑，設(shè)置濃度為0.01 μg/ml、0.1 μg/ml、1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg /ml，采用菌絲生長(zhǎng)速率法，分別將供試向日葵菌核病菌和佛手瓜綿腐病菌單孢菌株在含藥平板上進(jìn)行敏感性測(cè)定。結(jié)果表明：佛手瓜綿腐病菌對(duì)戊唑醇的EC50為0.210 5 μg/ml，小于參考值0.46 μg/ml，對(duì)戊唑醇比較敏感;向日葵菌核病菌的EC50為2.704 μg/ml，大于參考值0.91μ g/ml，介于0.91～3.644 μg/ml之間，對(duì)戊唑醇表現(xiàn)為中抗。戊唑醇對(duì)佛手瓜綿腐病的抑菌效果要優(yōu)于向日葵菌核病。且隨著濃度的增大，抑菌效果也不斷增強(qiáng)。而戊唑醇對(duì)向日葵菌核病菌抑制效果比較差。以上結(jié)果可為農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中合理選用藥劑防治佛手瓜綿腐病和向日葵菌核病提供參考。

關(guān)鍵詞 戊唑醇;敏感性測(cè)定;向日葵菌核病菌;佛手瓜綿腐病菌

中圖分類號(hào)：P437 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2095–3305（2021）08–0005–02

Study on Indoor Bacter-iostasis of Tebuconazole Against Sclerotinia Solani and Cotton Rot of Bergamot Melon

YANG Shi-jie et al（College of life science， resources and environment， Yichun Univ-ersity， Yichun， Jiangxi 336000）

Abstract Tebuconazole was used as reag-ent and the concentration was set as 0.01 μg/ml、0.1 μg/ml、1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml， using mycelial growth rate method， the sensitivity of the tested single spore strains of Sunflower Sclerotinia and bergamot cotton rot were determined on the drug containing plate. The results showed that the EC50 of citronella sponge rot to tebuconazole was 0.2105 μg/ml is less than the reference value of 0.46 μg/ml， sensitive to tebuconazole; The EC50 of Sclerotinia solani was 2.704 μg/ml is greater than the reference value of 0.91 μg/ml， between 0.91～3.644 μg/ml， showed moderate resistance to tebuconazole. The antibacterial effect of Tebuconazole on cotton rot of bergamot melon was better than that of Sunflower Sclerotinia. And with the increase of concentration， the antibacterial effect is also increasing. The inhibitory effect of Tebuconazole on Sunflower Sclerotinia is relatively poor. The above results can provide a reference for the rational selection of chemicals to control Bergamot cotton rot and Sunflower Sclerotinia in agricultural production.

Key words Tebuconazole; Sensitivity determination; Sclerotinia solani; Cotton rot of bergamot melon

向日葵又被稱為向陽(yáng)花、朝陽(yáng)花等，屬于一年生草本植物，它用途廣泛，具有工業(yè)價(jià)值、藥用價(jià)值和食用價(jià)值[1-2]。佛手瓜也被稱為合手瓜、千金瓜、豐收瓜等，屬于多年生宿根草質(zhì)藤本植物，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值豐富，深受人們喜愛。隨著種植結(jié)構(gòu)的改變，向日葵和佛手瓜這兩種作物的種植面積也在不斷擴(kuò)大。但對(duì)種植戶來說，向日葵菌核病和佛手瓜綿腐病的防護(hù)與治理仍是較為棘手的問題。向日葵菌核病和佛手瓜綿腐病會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)量和質(zhì)量大幅度下降，給種植戶造成較大的損失。隨著多年來對(duì)藥劑的使用，向日葵菌核病和佛手瓜綿腐病已對(duì)不少藥劑產(chǎn)生了不同程度的抗藥性，導(dǎo)致防效逐年下降。為了找到更有效的替代藥劑，本文選擇新型廣譜性藥劑戊唑醇對(duì)向日葵菌核病菌和佛手瓜綿腐病菌進(jìn)行室內(nèi)抑菌試驗(yàn)，為種植戶合理選用藥劑防治向日葵菌核病和佛手瓜綿腐病提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試藥劑和培養(yǎng)基 98%戊唑醇原藥由湖北玖豐隆化工有限公司生產(chǎn)，原藥用丙酮溶解配制成1×104 μg/ml的母液，放置于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

戊唑醇對(duì)佛手瓜綿腐病菌以及向日葵菌核病抑菌效果測(cè)定中使用。

1.1.2 試驗(yàn)材料 從宜春市城北郊區(qū)種植的佛手瓜和向日葵病株上取得佛手瓜綿腐病菌和向日葵菌核病菌樣品，在室內(nèi)進(jìn)行單孢分離純化，得到向日葵菌核病菌單孢菌株和佛手瓜綿腐病菌單孢菌株。以上菌株通過斜面（4℃）和濾紙片法低溫（-20℃）保存在江西省宜春學(xué)院植物保護(hù)實(shí)驗(yàn)室。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)器材 BBS-SDC超凈工作臺(tái)（濟(jì)南卓隆生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)）、LX-C50L滅菌器（成都宜恒實(shí)驗(yàn)儀器有限公司生產(chǎn)）、SHP-250生化培養(yǎng)箱（江蘇新春蘭科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)）、220V/1 kW電子萬用爐（浙江省上虞市通州實(shí)驗(yàn)儀器廠生產(chǎn)）、菌餅打孔器（6 mm，北京普博斯生物科技有限公司生產(chǎn)）、BCD-539WT冰箱（青島海爾股份有限公司生產(chǎn)）、DHG-9023A電熱恒溫干燥箱（上海印溪儀器儀表有限公司生產(chǎn)）、ME204G電子天平（梅特勒—托利多儀器—上海有限公司生產(chǎn)）、培養(yǎng)皿（直徑90 mm，成都典銳實(shí)驗(yàn)儀器有限公司生產(chǎn)）、接種環(huán)、漏斗、試管、試管架、燒杯、紗布、玻璃棒等為常用實(shí)驗(yàn)用品。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 含藥培養(yǎng)基的制備 將戊唑醇母液稀釋成0.01 μg/ml、0.1 μg/ml、1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml 5個(gè)濃度置于45℃的PDA培養(yǎng)基中，制成含藥平板。

1.2.2 佛手瓜綿腐病菌和向日葵菌核病菌對(duì)戊唑醇敏感性測(cè)定 采用菌絲生長(zhǎng)速率法，在含藥平板上分別對(duì)供試佛手瓜綿腐病菌和向日葵菌核病菌進(jìn)行戊唑醇抗藥性測(cè)定。供試藥劑均設(shè)置0.01 μg/ml、0.1 μg/ml、1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml 5個(gè)濃度，以不加藥劑平板為空白對(duì)照，共6個(gè)處理，重復(fù)3次，在新鮮向日葵菌核病菌和佛手瓜綿腐病菌菌落邊緣分別打取6 mm菌餅，分別接種于含藥培養(yǎng)基平板中央，在22℃黑暗環(huán)境中培養(yǎng)72 h，測(cè)量菌落直徑，計(jì)算菌絲生長(zhǎng)抑制百分率平均值，作抑菌率變化趨勢(shì)圖，并求出毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)以及有效抑制中濃度（EC50值）。

抑制率/%= ×100%

抗性水平依據(jù)紀(jì)明山等的敏感基線值進(jìn)行判別，菌株EC50值<0.455 μg/ml為敏感菌株;菌株EC50值處于0.455～0.911 μg/ml為低抗菌株;菌株EC50值處于0.911～3.644μg/ml為中抗菌株;菌株EC50值>3.644 μg/ml為高抗菌株。

2 結(jié)果與分析

2.1 戊唑醇對(duì)向日葵菌核病和佛手瓜綿腐病抑菌率及抑菌趨勢(shì)

戊唑醇無論是對(duì)向日葵菌核病菌還是佛手瓜綿腐病菌的抑菌效果均隨著濃度的增加而增加，濃度越大，抑菌效果越好，在濃度為100 μg/ml時(shí)，二者抑菌率達(dá)到最高（表1）。從橫向來看，不同濃度的戊唑醇對(duì)佛手瓜綿腐病菌抑菌效果比對(duì)向日葵菌核病菌抑菌效果分別高出23.1%、46.6%、54.02%、50.2%、100.8%。

戊唑醇對(duì)佛手綿腐菌具有顯著的敏感性，隨著濃度升高，抑菌率也不斷升高，在濃度還是1 μg/ml時(shí)，抑菌率就已達(dá)63.87%。戊唑醇對(duì)向日葵菌核病菌敏感性則較弱，濃度為10 μg/ml時(shí)，抑菌率只有60.22%。隨著濃度增長(zhǎng)抑菌效果在不斷加強(qiáng)，在100 μg/ml濃度時(shí)抑菌效果最好。戊唑醇對(duì)佛手瓜綿腐菌病菌抑菌效果要優(yōu)于對(duì)向日葵菌核病菌的抑菌效果（圖1）。

2.2 不同菌種、不同濃度間抑菌差異性的分析以及比較

為了更好地說明戊唑醇對(duì)二種菌的抑菌效果，用方差分析進(jìn)一步比較（表2）。

對(duì)濃度間和菌種間進(jìn)行F測(cè)驗(yàn)方差分析，可知，濃度間F=43.843>F0.05=6.39，F(xiàn)=43.843>F0.01=15.98，即濃度間表現(xiàn)出了極顯著的差異，隨著濃度增大，抑菌率明顯增加;菌種間F=9.149>F0.05=7.71，F(xiàn)=9.149

濃度間多重比較結(jié)果如下（表3）：100 μg/ml與1 μg/ml、0.1 μg/ml、0.01 μg/ml之間都存在極顯著的差異，與10 μg/ml之間存在顯著的差異。10 μg/ml與100 μg/ml、1 μg/ml、0.1 μg/ml、0.01 μg/ml之間也存在極顯著的差異。1 μg/ml與100 μg/ml、10 μg/ml、0.01 μg/ml之間存在極顯著的差異，與0.1 μg/ml存在顯著的差異。0.1 μg/ml和100 μg/ml、10 μg/ml之間存在極顯著的差異，與0.01 μg/ml、0.01 μg/ml之間存在顯著的差異。0.01 μg/ml和100 μg/ml、10 μg/ml、1 μg/ml之間存在極顯著的差異，和0.1 μg/ml之間存在顯著的差異。

從結(jié)果可以得出，不同濃度之間存在顯著的差異，甚至是極顯著的差異，濃度越高，抑菌效果越好。說明戊唑醇在抑制這兩種病菌生長(zhǎng)時(shí)會(huì)因?yàn)闈舛雀淖兌挂志Ч伯a(chǎn)生很大的變化。

2.3 向日葵菌核病菌和佛手瓜綿腐病菌對(duì)戊唑醇的敏感性分析

使用SPSS軟件求出向日葵菌核病菌和佛手瓜綿腐病菌對(duì)戊唑醇敏感的相關(guān)回歸方程、相關(guān)系數(shù)和EC50（表4）。

向日葵菌核病菌對(duì)戊唑醇的敏感性EC50值為2.704 μg/ml，該數(shù)值在0.911～3.644 μg/ml之間，因此向日葵菌核病菌對(duì)戊唑醇為中抗;佛手瓜綿腐病菌對(duì)戊唑醇的敏感性EC50為0.2105 μg/ml，該數(shù)值<0.455 μg/ml，因此佛手瓜綿腐病菌對(duì)戊唑醇為敏感，可以得知用戊唑醇處理佛手瓜綿腐病菌效果較好。

3 結(jié)束語(yǔ)

從對(duì)佛手瓜綿腐病菌和向日葵菌核病菌抑菌率數(shù)據(jù)敏感性分析和方差分析可以看出，戊唑醇對(duì)佛手瓜綿腐病菌抑菌效果比向日葵菌核病菌抑菌效果好。并且在5個(gè)濃度中，無論是戊唑醇對(duì)佛手瓜綿腐病菌還是對(duì)向日葵菌核病菌抑菌效果都會(huì)隨著濃度的增大而增加。因此，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，防治佛手瓜綿腐病危害，選用戊唑醇防治效果更好，且要選用適宜的濃度。而對(duì)防治向日葵菌核病來說，向日葵菌核病已經(jīng)對(duì)戊唑醇產(chǎn)生了中抗，防治效果不佳，不提倡使用，需要更換藥劑。

參考文獻(xiàn)

[1] 賀峰.防風(fēng)的化學(xué)成分和藥理作用[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2011，30（10）：43.

[2] Sun Xialin， Zhang Tingwen，Zhao Yan， et al. The protective effect of 5-O-methylvisammioside on LPS-induced depression in mice by inhibiting the over activation of BV-2 microglia through Nf-κB/IκB-α pathway[J].Phytomedicine， 2020（79）： 153348.

責(zé)任編輯：黃艷飛