楊培偉，劉光偉，趙文霞

河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院 脾胃肝膽科，鄭州 450000

自身免疫性肝炎(AIH)是一種針對異常自身免疫反應(yīng)所介導(dǎo)的慢性肝細胞損傷，以高球蛋白血癥、自身抗體檢測以及T淋巴細胞、巨噬細胞和漿細胞侵入門靜脈周圍實質(zhì)的界面性肝炎為特征[1]。盡管多年來AIH的機制研究取得較大進展，但對于AIH的發(fā)病機制尚未完全清楚[2]。其病因仍然未知，考慮與多種危險因素有關(guān)，其中環(huán)境因素(接觸微生物、病毒以及異種生物等)和易患遺傳因素與AIH的發(fā)生密切相關(guān)[3]。AIH可向肝硬化、失代償性疾病、門靜脈高壓癥和肝細胞癌的方向發(fā)展，并且有研究[4]發(fā)現(xiàn)，AIH患者患肝癌或肝外惡性腫瘤的風(fēng)險增加。因此，及時而正確的診斷和治療是改善AIH預(yù)后的關(guān)鍵。

自噬是一種溶酶體降解途徑，對細胞質(zhì)內(nèi)穩(wěn)態(tài)至關(guān)重要。自噬是一種雙向調(diào)節(jié)的過程，在應(yīng)激時激活細胞自噬可以提供能量或在損傷后清除受損的細胞器和蛋白質(zhì)來促進細胞存活；但過度和持續(xù)的壓力誘發(fā)的細胞自噬會導(dǎo)致肝細胞凋亡和壞死[5-6]。自噬包括3種形式：巨自噬(依賴溶酶體途徑對胞質(zhì)蛋白和細胞器進行降解的一種過程)、微自噬和分子伴侶介導(dǎo)的自噬[7]。近年來，許多研究發(fā)現(xiàn)自噬功能與AIH的發(fā)病機制高度相關(guān)，包括自噬調(diào)節(jié)免疫炎癥反應(yīng)、自噬調(diào)節(jié)免疫信號傳導(dǎo)和防止過度激活的先天免疫反應(yīng)。本文將討論自噬在AIH發(fā)生發(fā)展中的重要作用，細胞自噬參與AIH的病理生理學(xué)證據(jù)，以及自噬在本病中可能的治療靶點。

1 自噬調(diào)節(jié)免疫炎癥反應(yīng)

伴刀豆球蛋白A(ConA)誘導(dǎo)的AIH模型是免疫介導(dǎo)的肝損傷具有代表性的成熟模型，注射ConA可產(chǎn)生大量炎癥細胞，主要是CD4+細胞、巨噬細胞和自然殺傷T淋巴細胞的滲濾和聚集，引起各種細胞因子和炎癥介質(zhì)的釋放，導(dǎo)致肝細胞的壞死和凋亡[8]。有研究[9-10]報道在AIH中觀察到自噬相關(guān)蛋白LC3和p62表達增加，表明在自噬發(fā)生過程中自噬溶酶體降解水平受到抑制，并與廣泛的壞死炎癥等級和過度激活的免疫反應(yīng)有關(guān)。有研究[11]顯示，敲除小鼠Atg7相關(guān)自噬基因，可通過活性氧介導(dǎo)的p38/MAPK信號通路，增加促炎細胞因子TNFα、IFNγ、IL-6和IL-1β表達，加重ConA誘導(dǎo)的AIH的肝損傷；提示自噬可以減弱ConA誘導(dǎo)的AIH炎癥反應(yīng)，這可能是AIH的潛在治療靶點。在免疫系統(tǒng)中，自噬影響T淋巴細胞增殖和生存以及B淋巴細胞亞群的發(fā)育和維持[12]。細胞表面Toll樣受體(TLR)是一種先天免疫受體，能增加直接對抗病原體入侵的炎癥反應(yīng)，同時啟動適應(yīng)性免疫系統(tǒng)，被認為是B淋巴細胞介導(dǎo)自身免疫的治療靶點[13]。Weindel等[14]研究發(fā)現(xiàn)，B淋巴細胞通過自噬依賴機制，啟動自噬核心受體TLR7誘導(dǎo)自身免疫，產(chǎn)生抗核抗體和慢性炎癥；相反，與TLR7敲除組相比，B淋巴細胞自噬缺乏，炎癥消失，提示自噬參與自身免疫炎癥反應(yīng)。在實驗性AIH模型中，觀察到ConA促進成熟常規(guī)樹突狀細胞(cDCs)的分泌、自噬相關(guān)蛋白的表達和自噬體的形成；與CD4+T淋巴細胞共培養(yǎng)時，自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤和巴佛洛霉素A1抑制了cDCs的成熟狀態(tài)和促炎細胞因子的分泌；提示異常自噬在AIH cDCs的免疫原性成熟中起著至關(guān)重要的作用，通過抑制自噬產(chǎn)生耐受性cDCs可以作為AIH的一種新療法[15]。Li等[16]研究報道，ConA處理富含內(nèi)源性ω-3多不飽和脂肪酸(n-3 PUFAs)的脂肪-1轉(zhuǎn)基因小鼠，通過抑制促炎因子(如TNFα、IL-6、IL-17A和IFNγ)的產(chǎn)生，抑制NF-κB p65磷酸化，顯著提高自噬活性，而氯喹阻斷肝自噬活性則減少了肝損傷，表明n-3 PUFAs通過自噬依賴機制限制ConA誘導(dǎo)的AIH，這可作為治療AIH的一種新方法。

2 自噬調(diào)節(jié)免疫信號傳導(dǎo)

自噬是一種高度保守的調(diào)節(jié)機制，宿主免疫功能失調(diào)是AIH的基礎(chǔ)發(fā)病機制，自噬在先天免疫和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中起關(guān)鍵作用。在先天免疫應(yīng)答中，異質(zhì)性自噬可以觸發(fā)相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，促進自然殺傷T淋巴細胞激活、細胞因子分泌和吞噬。在適應(yīng)性免疫應(yīng)答中，自噬反應(yīng)對T淋巴細胞的穩(wěn)態(tài)、功能和分化、B淋巴細胞的生存和發(fā)育以及漿細胞的生存有重要影響[17]。研究[18]發(fā)現(xiàn)自噬相關(guān)的多種蛋白特別是Atg蛋白、信號通路和細胞調(diào)節(jié)因子參與了AIH的發(fā)生和發(fā)展。自噬的兩條主要調(diào)控通路包括Akt/mTOR/p70S6K和ERK1/2、Akt通路，通過直接激活mTOR/MLST8/Raptor復(fù)合物或通過間接抑制結(jié)節(jié)性硬化癥復(fù)合物(TSC)1-TSC2的mTOR復(fù)合物1來調(diào)節(jié)自噬[19-20]。而TSC-mTOR信號通路調(diào)節(jié)先天免疫系統(tǒng)的各種成分，在自身免疫性疾病中起重要作用[21]。Kerkar等[22]研究提示雷帕霉素直接作用于mTOR信號通路，用于治療AIH；mTOR通路能夠激活和/或抑制下游靶點并調(diào)控自噬，刺激mTOR可能是自身免疫性疾病的標志[23]，而這為自噬通過mTOR信號通路調(diào)節(jié)AIH提供了思路。PI3K-Akt信號通路是mTOR信號通路的上游，在AIH發(fā)病中起重要作用，而Akt通路能下調(diào)自噬[18,24]。Fan等[25]研究發(fā)現(xiàn)甲基潑尼松龍(MP)通過Akt/mTOR信號通路，降低自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ、p62/SQSTM1和Beclin-1水平，上調(diào)磷酸化p-Akt和p-mTOR水平，減輕實驗性AIH模型肝臟炎癥，進一步表明MP減弱了ConA誘導(dǎo)的肝細胞自噬和凋亡。有研究[26]顯示表沒食子兒茶素沒食子酸酯通過下調(diào)IL-6/JAKs/STAT3/BNIP3信號通路，阻斷Beclin-1的自噬，從而減輕ConA誘導(dǎo)的AIH，提示表沒食子兒茶素沒食子酸酯可能是治療AIH的理想藥物。Wu等[27]研究報道槲皮素通過抑制炎癥因子TNFα介導(dǎo)的TRAF6/JNK通路，抑制ConA誘導(dǎo)的AIH的細胞自噬和凋亡。同樣，他們發(fā)現(xiàn)延胡索乙素也可通過TRAF6/JNK通路，減少IL-6、TNFα等炎癥因子的釋放，改善肝細胞自噬和凋亡，進而減輕ConA誘導(dǎo)的AIH的急性肝損傷[28]。Xu等[29]研究發(fā)現(xiàn)海藻酸丙二醇硫酸鈉通過激活PI3K/Akt通路，下調(diào)炎癥因子TNFα/IL-1β、促調(diào)亡蛋白Bax/Caspase 3/Caspase 9和自噬相關(guān)蛋白P62的表達，上調(diào)Bcl-2/Beclin-1/LC3的表達，通過調(diào)控細胞自噬和凋亡來改善ConA誘導(dǎo)的AIH肝損傷，提示海藻酸丙二醇硫酸鈉具有抑制AIH的作用。有學(xué)者[30]報道蝦青素通過下調(diào)JNK/p-JNK通路，下調(diào)Bcl-2的磷酸化和自噬相關(guān)蛋白Beclin-1的表達，并將LC3-Ⅰ轉(zhuǎn)化為LC3-Ⅱ，通過減少凋亡和抑制自噬減輕ConA誘導(dǎo)的AIH肝損傷，提示蝦青素可作為潛在的治療AIH的藥物。

3 防止過度激活的先天免疫反應(yīng)

NOD樣受體(NLR)是病原體和危險相關(guān)分子模式的胞質(zhì)傳感器，也是自噬的核心受體之一，NLRP3炎性小體激活可介導(dǎo)IL-1β和IL-18的產(chǎn)生，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)。而線粒體自噬可通過阻止線粒體衍生的危險相關(guān)分子模式積累(活性氧和線粒體DNA等)，抑制IL-1β和IL-18的產(chǎn)生，提示自噬蛋白可通過抑制NALP3炎性小體介導(dǎo)的線粒體DNA釋放來調(diào)節(jié)先天免疫反應(yīng)[31-32]。NOD1和NOD2是自噬過程中招募Atg16L1的重要蛋白，而Atg16L1是自噬過程中的關(guān)鍵成分[33]。NOD1和NOD2與自身免疫性疾病之間的關(guān)系，強調(diào)了這些蛋白在AIH中的主要作用，而這些蛋白能夠控制先天免疫反應(yīng)[34]。有研究[35]報道，免疫系統(tǒng)的激活如上調(diào)免疫相關(guān)蛋白Stat1、Pkr、Atg7和Adrm1可導(dǎo)致自噬的失調(diào)(LC3B-Ⅱ和p62的積累)和ConA誘導(dǎo)的AIH，而牛蒡苷元通過抑制IFNγ/IL-6/Stat1通路和IL-6/Bnip3通路，抑制免疫系統(tǒng)和調(diào)節(jié)自噬緩解ConA誘導(dǎo)的AIH，提示牛蒡苷元對AIH具有治療潛力。最近研究[36]顯示，AIH患者外周血輔助性T淋巴細胞17和CD4+CD25+CD127low調(diào)節(jié)性T淋巴細胞存在自噬與免疫失衡現(xiàn)象，表明自噬和輔助性T淋巴細胞17/調(diào)節(jié)性T淋巴細胞免疫失衡參與了AIH的發(fā)生及發(fā)展，因此，平衡細胞自噬和免疫調(diào)節(jié)T淋巴細胞功能可能是治療AIH的新靶點。綜上所述，細胞自噬通過多途徑、多通路在AIH中發(fā)揮著重要作用，有望通過調(diào)節(jié)細胞自噬來阻斷AIH的病理進程。

4 展望

AIH的病因和發(fā)病機制仍未完全闡明，在臨床診療中也存在一定的難度，通過調(diào)節(jié)自噬來研究AIH發(fā)病機制面臨著巨大的挑戰(zhàn)。在臨床研究方面，自噬和AIH的諸多表象還需結(jié)合更多臨床樣本深入研究；自噬在AIH發(fā)病、疾病進展、肝組織和免疫系統(tǒng)的靶向作用尚有待更多的實驗研究進行充分證實。并且在研究細胞自噬與AIH的關(guān)系之前，重要的是要確定自噬的生理狀況，其對IL-1β、Ⅰ型IFN和其他細胞因子水平的影響是陽性還是陰性；另外，在實驗研究中還應(yīng)該明確受自噬活性影響最大的細胞類型和組織器官；在實驗研究時應(yīng)進行動物模型實驗，選擇性增強或阻斷自噬活性和溶酶體功能，以確定其對AIH的影響。目前細胞自噬在AIH發(fā)病機制中的價值仍有待于更多的實驗研究進行支持和論證，而這可能為AIH的機制研究提供新思路和新方法。

利益沖突聲明：所有作者均聲明不存在利益沖突。

作者貢獻聲明：楊培偉負責(zé)資料收集和撰寫論文；劉光偉負責(zé)擬定研究方向和寫作思路；趙文霞指導(dǎo)撰寫文章。