李卓嫻 徐麗靜 夏猛

肝癌是最常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率居全球惡性腫瘤第三位,具有起病隱匿、發(fā)病率高、致死率高、術(shù)后復(fù)發(fā)率高、預(yù)后差、生存率低的特點(diǎn)。世界衛(wèi)生組織估計(jì)到2030年全球?qū)⒂谐^100萬的人死于肝癌。目前治療肝癌的方法主要有移植、切除、射頻消融、靶向藥治療等,但肝癌患者仍面臨著高死亡率、高復(fù)發(fā)率、耐藥性及嚴(yán)重副作用等問題。因此,尋求低毒、耐藥性小的肝癌治療策略仍是當(dāng)前亟待解決的關(guān)鍵問題。肝癌屬于中醫(yī)學(xué)“癥瘕”“鼓脹”等范疇,從臨床證型看,肝郁脾虛型是其重要的一類證型。逍遙散出自《太平惠民和劑局方》,以疏肝解郁、健脾養(yǎng)血作用見長。目前用于治療肝癌的常見逍遙散類處方有黑逍遙散、加味逍遙散、四逆散、加味四逆散、肝積方、丹梔逍遙丸、柴胡疏肝散、逍遙丸等,這些處方對肝癌的細(xì)胞增殖、免疫功能、神經(jīng)系統(tǒng)、肝功能以及腸道菌群調(diào)節(jié)等方面均具有干預(yù)作用。本文通過檢索相關(guān)的研究文獻(xiàn),對以上功能和作用進(jìn)行了搜集和整理,總結(jié)如下。

1 逍遙散類方對肝癌腫瘤細(xì)胞的影響

1.1 阻滯細(xì)胞周期抑制肝癌細(xì)胞增殖

細(xì)胞凋亡是由細(xì)胞內(nèi)基因及其產(chǎn)物調(diào)控發(fā)生的一種程序性細(xì)胞死亡,阻滯細(xì)胞的周期進(jìn)程可抑制細(xì)胞的增殖及誘導(dǎo)凋亡,對肝癌治療具有著重要意義。逍遙散主要成分姜黃素作用于肝癌細(xì)胞SMMC7721、Huh-7,誘導(dǎo)其S期細(xì)胞增加以及G0-G1期細(xì)胞減少,阻滯肝癌細(xì)胞的正常周期,顯著減少細(xì)胞增殖[1-3]。不同劑量的四逆散含藥血清處理肝癌HepG2細(xì)胞后發(fā)現(xiàn)[4],隨著劑量的濃度增加,G1期細(xì)胞隨之增加,G2期隨之減少,使肝癌細(xì)胞滯留于G1期,阻滯其細(xì)胞周期,抑制肝癌細(xì)胞的增殖,其中方中所含的山奈酚活性成分發(fā)揮著顯著作用[5]。山奈酚是多種疏肝藥物的重要成分之一,如白芍、梔子、甘草、柴胡、丹皮等疏肝重要中均含有該成分,而這幾種藥物也多包含在逍遙散類方中,說明逍遙散類方治療肝癌的重要機(jī)制之一可能與方中疏肝類藥物的活性成分山奈酚有關(guān)。

1.2 調(diào)控Ca2+信號誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡

細(xì)胞間的信號傳導(dǎo)可作為腫瘤發(fā)生關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一[6],Ca2+作為參與調(diào)節(jié)多種神經(jīng)細(xì)胞功能活動的信使,Ca2+失衡會引起神經(jīng)元損害并成為“最后共同通路”導(dǎo)致細(xì)胞死亡[7]。加味逍遙散對離體的肝癌SMMC-7721細(xì)胞的增殖具有較強(qiáng)抑制作用,且具有明顯的濃度依賴性[8],其由調(diào)控Ca2+凋亡信號從而調(diào)節(jié)與其相關(guān)敏感的關(guān)鍵酶誘導(dǎo)凋亡,以此抑制肝癌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)凋亡。另有研究表明,黑逍遙散及逍遙散中也存在著調(diào)控Ca2+信號的功能[9-10]。目前對于此方面的研究在逍遙散類方中還較少,但從已有研究表現(xiàn)出的效果看,逍遙散類方對其作用確切,但具體是什么成分對其發(fā)揮作用、其機(jī)制如何尚有待深入探討。

1.3 調(diào)控癌基因、抑癌基因誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡

Bcl-2癌基因家族具備抑制細(xì)胞凋亡的作用,Bcl-2與Bax的聚合抑制Bcl-2的活性從而促進(jìn)了細(xì)胞的凋亡。四逆散可使Bcl-2表達(dá)下降,Bax、Caspase-3、Caspase-9及Cyt-c表達(dá)升高,誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡、抑制其增殖[4];肝積方也可通過調(diào)節(jié)Bcl-2癌基因家族并激活Caspase-3,誘導(dǎo)線粒體途徑發(fā)揮促細(xì)胞凋亡作用,最終抑制肝癌細(xì)胞的增殖并發(fā)揮抑瘤作用[11-15]。TP53為與人類半數(shù)腫瘤相關(guān)的基因,其所表達(dá)的P53蛋白可抑制腫瘤細(xì)胞的生長,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的凋亡。四逆散中所含的槲皮素誘導(dǎo)TP53抑癌基因?qū)е翯2/M細(xì)胞周期阻滯,從而推動了細(xì)胞凋亡進(jìn)程[5];運(yùn)用其干預(yù)移植性肝癌裸鼠可使肝癌裸鼠腫瘤組織中Sirt1蛋白表達(dá)減少,p53乙?；潭仍黾?經(jīng)SIRT1/p53信號通路途徑[16-18],促進(jìn)人肝癌HepG2細(xì)胞凋亡。逍遙散類方對于肝癌細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)和作用機(jī)制研究目前較為普遍,也基本成為評價逍遙散類方是否具有抗癌作用的有效評價指標(biāo)之一。

1.4 調(diào)控血管生成因子,抗腫瘤血管生成,抑制肝癌細(xì)胞侵襲

腫瘤細(xì)胞的血管是腫瘤細(xì)胞獲得血氧、營養(yǎng)的重要通道,抗腫瘤血管生成可通過抑制血管的生存和數(shù)量,抑制腫瘤細(xì)胞的生長、轉(zhuǎn)移從而發(fā)揮抗癌作用[19-20]。使用加味四逆散干預(yù)治療H22腹水瘤小鼠與S180實(shí)體瘤小鼠,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后檢驗(yàn)其血清中血管內(nèi)皮生長因子的濃度水平并觀察經(jīng)蘇木精—伊紅染色的腫瘤病理組織切片發(fā)現(xiàn),加味逍遙散可降低模型小鼠血清血管內(nèi)皮長生因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)濃度,減少肝癌組織內(nèi)微血管的密度、數(shù)量,抑制腫瘤組織血管生成[21];逍遙散也可下調(diào)VEGF表達(dá),抑制血管的生成并干預(yù)原發(fā)性肝癌[22]。肝積方作用于肝癌的差異基因包含與血管生長因子相關(guān)的早期生長反應(yīng)基因-1,抑制腫瘤血管生成為肝積方作用于肝癌的重要機(jī)制之一[23]。

在抑制肝癌進(jìn)展的過程中,抑制肝癌細(xì)胞的增殖、分化、侵襲以及促進(jìn)凋亡發(fā)揮著重要作用,是抗肝癌的重要機(jī)制之一。聚焦于對肝癌腫瘤細(xì)胞的影響,對探究逍遙散類治療肝癌的具體作用機(jī)制具有重要意義。根據(jù)上述文獻(xiàn)得知,目前對逍遙散類方影響肝癌細(xì)胞的機(jī)制研究多匯聚在通過阻滯細(xì)胞周期,調(diào)控Ca2+信號、癌基因Bcl-2、抑癌基因TP53、血管內(nèi)皮長生因子等方面發(fā)揮抑制肝癌細(xì)胞增殖、侵襲,促進(jìn)其凋亡的作用,缺乏對其他影響肝癌細(xì)胞機(jī)制的研究,如肝癌細(xì)胞自噬[24]、黏附[25]、鐵死亡[26]、焦亡[27]等。逍遙散類方通過影響肝癌細(xì)胞治療肝癌層面的研究仍有許多未涉及的區(qū)域,有待各學(xué)者進(jìn)一步的探索、發(fā)掘以及驗(yàn)證。

2 逍遙散類方對免疫機(jī)制的調(diào)節(jié)作用

2.1 調(diào)控炎性細(xì)胞因子

細(xì)胞因子是一類具有調(diào)控細(xì)胞免疫激活、生長、分化作用的小分子或蛋白質(zhì)物質(zhì),其中參與炎性反應(yīng)的稱炎性細(xì)胞因子,包含白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-6、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)等,可調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境,參與腫瘤過程。使用四逆散加味治療肝郁肝癌模型大鼠,實(shí)驗(yàn)結(jié)束后制備脾細(xì)胞懸液測定IL-2、γ-干擾素的活性,四逆散加味治療可增強(qiáng)肝癌大鼠脾淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-2、γ-干擾素的能力,提升機(jī)體免疫功能[28];可提升肝癌荷瘤小鼠的TNF-α、IL-12、IL-6含量水平,提升脾臟指數(shù),提高肝癌裸鼠模型的免疫力,發(fā)揮抗腫瘤免疫力的調(diào)控功能[16]。加味四逆散也同樣具備著調(diào)節(jié)免疫機(jī)制的作用,由提高肝癌荷瘤小鼠的IL-2活性而發(fā)揮作用[21]。此方面研究說明,在發(fā)揮抗腫瘤過程中,逍遙散類方對調(diào)節(jié)炎癥狀態(tài)具有作用,這可能也是中醫(yī)藥在臨床發(fā)揮抗腫瘤,改善患者生存質(zhì)量的機(jī)制之一。

2.2 調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞亞群

淋巴細(xì)胞作為機(jī)體重要的免疫細(xì)胞,可分為T、B、NK細(xì)胞三大類,而淋巴亞群作為機(jī)體免疫功能及狀態(tài)平衡反映的重要指標(biāo),參與免疫過程,反映免疫狀態(tài)。加味四逆散可通過提高NK細(xì)胞增殖活性、T淋巴細(xì)胞活性,發(fā)揮調(diào)節(jié)免疫機(jī)制的作用[21]。四逆散提高肝癌大鼠的脾T、B淋巴細(xì)胞增殖能力,提高肝癌大鼠的免疫功能[28]。由肝積方進(jìn)一步加工制成的疏肝清熱消積顆粒可通過調(diào)節(jié)CD4+、CD8+,增加肝癌荷瘤小鼠的T淋巴細(xì)胞增殖并刺激總T淋巴細(xì)胞的生長,發(fā)揮改善免疫的作用[29]。

在機(jī)體出現(xiàn)腫瘤時,免疫系統(tǒng)可迅速識別、清除微環(huán)境中的腫瘤細(xì)胞,免疫功能在抑制腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮著重要的作用。大量臨床研究發(fā)現(xiàn),放、化療或其他介入療法的治療在殺滅腫瘤細(xì)胞的同時會損傷機(jī)體的免疫功能,逍遙散類方治療肝癌可有效增強(qiáng)肝癌患者的免疫功能,對增強(qiáng)機(jī)體抗腫瘤免疫能力及殺滅腫瘤細(xì)胞具有重要意義。但現(xiàn)階段對逍遙散類方發(fā)揮免疫機(jī)制調(diào)節(jié)治療肝癌的研究多集中于臨床研究,基礎(chǔ)研究鮮見,且多于進(jìn)行其他作用機(jī)制研究時發(fā)現(xiàn),對于逍遙散類方通過調(diào)節(jié)免疫機(jī)制發(fā)揮肝癌治療作用的相關(guān)研究較少,且多匯集于調(diào)控炎性細(xì)胞因子、淋巴細(xì)胞亞群方面,深入研究逍遙散類方通過調(diào)節(jié)免疫機(jī)制發(fā)揮肝癌治療作用的具體機(jī)制,為臨床運(yùn)用提供新思路,以期提高肝癌患者的生存質(zhì)量。

3 逍遙散類方對神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用

3.1 對單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的調(diào)節(jié)作用

單胺類神經(jīng)遞質(zhì)為中樞神經(jīng)遞質(zhì)中的一種,其重要組成包括5-羥色胺及多巴胺等,當(dāng)其神經(jīng)元功能下降時會導(dǎo)致快感缺乏出現(xiàn)絕望、焦慮行為,與抑郁等精神疾病密切相關(guān)[30]。加味逍遙散提高肝癌大鼠腦內(nèi)多巴胺、5-羥色胺等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)水平,發(fā)揮調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)的作用[31]。柴胡疏肝散、四逆散同樣具備著調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)的作用,可下調(diào)抑郁小鼠模型大腦、肝臟、結(jié)腸中犬尿氨酸/色氨酸比值及上調(diào)肝臟中5-羥色胺/色氨酸比值,由調(diào)控色氨酸的代謝進(jìn)而調(diào)節(jié)神經(jīng)遞質(zhì)發(fā)揮其抗抑郁作用[32]。臨床上,肝癌患者多伴有嚴(yán)重的情緒障礙,出現(xiàn)抑郁、焦慮等,逍遙散類方在調(diào)節(jié)患者情緒方面,具有疏肝解郁、調(diào)暢情志的作用,從其作用機(jī)制看,逍遙散類方對興奮性神經(jīng)遞質(zhì)的上調(diào)作用,可能正是其既能抗癌,又能改善患者情緒的重要原因之一。

3.2 調(diào)節(jié)神經(jīng)營養(yǎng)因子

腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 (brain-derived neurotrophic factor,BDNF)具有修復(fù)、再生神經(jīng)的功能。慢性應(yīng)激及促抑郁的造模手段會導(dǎo)致海馬BDNF的減少、神經(jīng)元凋亡的增加以及再生能力的受損。神經(jīng)營養(yǎng)因子3則為最有效的神經(jīng)支持因子之一,可促進(jìn)神經(jīng)元的發(fā)育、存活以及修復(fù)。逍遙散不但可降低由慢性應(yīng)激所誘發(fā)的肝癌標(biāo)志物甲胎蛋白水平的上升,預(yù)防由慢性應(yīng)激所誘發(fā)的肝癌的早期發(fā)生[33-34],還具有保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)、規(guī)避應(yīng)激的作用,可恢復(fù)由慢性束縛應(yīng)激所導(dǎo)致的神經(jīng)營養(yǎng)因子BDNF的減少,并增加神經(jīng)因子3表達(dá),從而發(fā)揮保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)的作用[35];還可增強(qiáng)抑郁小鼠海馬中神經(jīng)營養(yǎng)因子BDNF的表達(dá)水平,恢復(fù)抑郁小鼠海馬中的神經(jīng)損傷[36]。

在肝癌的治療過程中,中醫(yī)藥可發(fā)揮整體調(diào)節(jié)的作用。抑郁作為肝癌的一個重要并發(fā)癥,中醫(yī)藥可干預(yù)抑郁、焦慮等情緒問題,在臨床治療肝癌中運(yùn)用疏肝解郁之法,對改善肝癌患者情緒、提高生活治療、延長生存期具有重要意義。除調(diào)節(jié)單胺類神經(jīng)遞質(zhì)、神經(jīng)營養(yǎng)因子外,中醫(yī)藥還具有通過調(diào)節(jié)下丘腦—垂體—腎上腺軸、血管內(nèi)皮生長因子以及相關(guān)的信號通路等調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)并輔助治療肝癌的作用機(jī)制[37],但目前對逍遙散類方通過上述機(jī)制發(fā)揮神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)并輔助治療肝癌的研究尚未見報(bào)道,仍有待進(jìn)一步研究。

4 逍遙散類方可以抗氧化應(yīng)激及控制炎癥反應(yīng),保護(hù)肝功能

4.1 調(diào)節(jié)相關(guān)抗氧化酶

超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶均屬于抗氧化酶,可以降低機(jī)體氧化速度,降低氧化損傷對機(jī)體造成的傷害。機(jī)體清除氧自由基的能力常由超氧化物歧化酶活力間接反映,機(jī)體受自由基損傷程度則常由丙二醛含量間接反映。谷丙轉(zhuǎn)氨酶與谷草轉(zhuǎn)氨酶的顯著上升證明了肝臟的受損,通過減低二者的水平可發(fā)揮護(hù)肝作用。逍遙散可降低血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性并增加超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶水平,同時降低丙二醛的含量,經(jīng)抗氧化應(yīng)激而發(fā)揮護(hù)肝作用,其減輕氧化應(yīng)激的損傷并發(fā)揮保肝作用[38-39],對肝功能具有一定的保護(hù)及修復(fù)作用[40],并具有一定濃度依賴性[41]。四逆散及加味四逆散也具備肝臟保護(hù)的作用[42-43],同樣由下調(diào)應(yīng)激大鼠血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶表達(dá)水平來改善肝損傷[44-45]。逍遙散類方在肝癌的治療中往往表現(xiàn)出對肝臟的保護(hù)作用,其具體作用機(jī)制與調(diào)節(jié)抗氧化酶,抗氧化應(yīng)激密切相關(guān)。

4.2 激活核因子E2相關(guān)因子2信號通路

核因子E2相關(guān)因子2(nuclear factor-E2 related factor2,Nrf2)是胞外生物與氧化應(yīng)激的主要協(xié)調(diào)者之一,可通過抗氧化響應(yīng)元件(antioxidant response element,ARE)的結(jié)合來調(diào)節(jié)相關(guān)抗氧化、抑炎基因進(jìn)而發(fā)揮調(diào)控氧化應(yīng)激的作用[46]。逍遙散可激活Nrf2-ARE信號通路來發(fā)揮其抗氧化應(yīng)激的作用[47],其對氧化應(yīng)激的對抗作用還可通過激活Nrf2的上游磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B通路并激活Nrf2-Keap1信號來改善氧化應(yīng)激狀態(tài)[48]。Nrf2信號通路是抗氧化應(yīng)激的重要通路之一,但目前逍遙散類方對于Nrf2信號通路的研究較少,仍有待挖掘。

4.3 抑制一氧化氮水平

一氧化氮(nitric oxide,NO)參與宿主的防御及免疫并調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng),宿主在對病毒、細(xì)菌感染的反應(yīng)中,NO會過量表達(dá)并通過促氧化應(yīng)激促進(jìn)某些發(fā)病機(jī)制,阻滯NO釋放從而抗氧化應(yīng)激是阻滯炎癥損傷細(xì)胞、誘發(fā)肝損傷的重要方法之一。丹梔逍遙丸基于其方中組成中藥的藥物特性而具備抗氧化活性及NO抑制相關(guān)的抗炎特性[49]。四逆散可顯著降低應(yīng)激負(fù)荷肝損傷小鼠肝組織中的NO水平[50]。

肝癌的治療除抑制腫瘤細(xì)胞的生長外,還可以通過保護(hù)自身肝臟功能發(fā)揮治療作用。中醫(yī)藥參與肝癌治療,可發(fā)揮緩解術(shù)后癥狀、保護(hù)肝功能、降低術(shù)后不良反應(yīng)的發(fā)生率等多種作用。逍遙散類方可通過調(diào)節(jié)抗氧化酶、激活Nrf2信號通路以及抑制NO水平發(fā)揮抗氧化應(yīng)激及控制炎癥反應(yīng)從而保護(hù)肝功能的作用。

5 調(diào)節(jié)益生菌的豐度,恢復(fù)腸道菌群的構(gòu)成

逍遙散可以增加腸道中梭菌綱、Faecalibaculum屬豐度,降低Muribaculaceae科的豐度,使有益菌豐度增加、致病菌豐度減少[51];還可以升高擬桿菌科Bacteroidaceae的豐度,恢復(fù)腸道微生物的多樣性,發(fā)揮調(diào)節(jié)腸道菌群的作用[52-53]。逍遙丸的主要成分芍藥苷可增加益生菌的豐度并調(diào)節(jié)腸道菌群的組成[54]。逍遙散及其拆方可保護(hù)菌群的構(gòu)成及多樣性,部分恢復(fù)腸道菌群的正常結(jié)構(gòu),當(dāng)健脾藥物被去掉時逍遙散對肝臟的保護(hù)作用會被減弱[55]。

最近幾年的研究表明,腸道在肝癌的治療過程中表現(xiàn)出良好的作用,人體腸道中正常菌群可形成保護(hù)屏障抵御病原體,而腸道菌群的失調(diào)會導(dǎo)致多途徑的推動肝癌的發(fā)生與發(fā)展,通過改善腸道菌群可起到改變甚至逆轉(zhuǎn)肝癌進(jìn)展的作用。逍遙散類方可以通過調(diào)節(jié)益生菌的豐度來恢復(fù)腸道菌群的構(gòu)成,但其如何通過調(diào)控腸道菌群來發(fā)揮肝癌治療的具體作用機(jī)制尚未見報(bào)道,仍待深入研究。

6 結(jié)語

逍遙散類方是一類以調(diào)和肝脾、疏肝解郁為主旨,在逍遙散基礎(chǔ)上隨證化裁衍化出來的方劑。逍遙散類方兼具備能疏肝解郁、健脾養(yǎng)血的特點(diǎn),可廣泛應(yīng)用于肝癌的現(xiàn)代臨床治療中。此類方藥在肝癌的臨床治療中,不但表現(xiàn)出抑制肝癌細(xì)胞的增殖與侵襲、促進(jìn)肝癌細(xì)胞凋亡、修復(fù)患者免疫功能,對神經(jīng)、肝功能的保護(hù)作用,而且還表現(xiàn)出對腸道菌群的調(diào)節(jié)作用。這充分的說明了逍遙散類方在抗癌過程中具有多靶點(diǎn)、多環(huán)節(jié)、多層次的綜合抗癌作用。但從目前的研究看,大部分的研究只從抑制腫瘤生長、侵襲、免疫等方面的某個環(huán)節(jié)入手,未能真正從網(wǎng)絡(luò)整體效應(yīng)機(jī)制入手,并不能真實(shí)詮釋或揭示逍遙散類方的整體機(jī)制,也沒有真正體現(xiàn)其中醫(yī)功能特點(diǎn)。從以上文獻(xiàn)結(jié)合逍遙散類方本身的功能特點(diǎn)看,其疏肝解郁作用很可能與對神經(jīng)功能的保護(hù)作用有關(guān),如逍遙散、加味逍遙散均顯示出對BDNF和5-羥色胺水平的提升作用,正恰合了其對情志病證的調(diào)節(jié)作用。其健脾養(yǎng)血作用,則可能與對腸道菌群的調(diào)節(jié)作用以及對腫瘤血管的抑制作用(抑制腫瘤血管而達(dá)到促進(jìn)全身血液運(yùn)行的作用)有關(guān),如逍遙散、肝積方等對VEGF及早期生長反應(yīng)基因-1具有重要的調(diào)節(jié)作用。其抗癌作用則大多是通過抑制肝癌細(xì)胞生長、調(diào)節(jié)免疫功能實(shí)現(xiàn)。這些數(shù)據(jù)表明,在肝癌的治療過程中,逍遙散類方雖然具有一定的抗癌作用,但其主要的功能更多是對全身整體功能的調(diào)控而實(shí)現(xiàn),在臨床及實(shí)驗(yàn)研究中還需要通過整體網(wǎng)絡(luò)作用來全面闡釋其抗癌靶點(diǎn)和效應(yīng)機(jī)制。