鄒芳霞，忽勝和，張麗蓉

(大理大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科 1.檢驗(yàn)科；2.生殖醫(yī)學(xué)科，云南 大理 671000)

進(jìn)入21 世紀(jì)后，不孕不育已經(jīng)成為繼心腦血管疾病、糖尿病、腫瘤三大疾病之后的又一研究熱點(diǎn)[1]，我國(guó)已婚夫婦不孕不育約占 10%～15%，并呈逐年增加的趨勢(shì)[2]，不孕不育問題已成為備受關(guān)注的社會(huì)問題。國(guó)內(nèi)外對(duì)不孕不育因素的研究比較多，從臨床、病原學(xué)等不同的角度進(jìn)行了研究，認(rèn)為支原體感染是不孕不育的病因之一，只是各地區(qū)的流行情況不同。本文旨在對(duì)2002 年9月-2017年9月就診于本院生殖醫(yī)學(xué)科的511對(duì)(1022例)不孕不育夫婦生殖道支原體的檢測(cè)及藥敏情況做回顧性統(tǒng)計(jì)，并分析其與不孕不育癥的關(guān)系，為滇西地區(qū)臨床治療生殖道支原體感染和治療不孕不育提供科學(xué)依據(jù)?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

選取以2002 年9月-2017年9月在大理大學(xué)第一附屬醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科就診的來自滇西地區(qū)的511對(duì)(1022例)不孕不育夫婦為研究對(duì)象。排除生殖器官先天異常、理化因素等引起的不孕不育，研究患者根據(jù)藥敏結(jié)果選取對(duì)其敏感的藥物進(jìn)行治療，治療后隨訪妊娠情況。研究對(duì)象均為夫妻性生活正常，無任何避孕措施2年以上未懷孕者，其中既往有過妊娠史的為繼發(fā)性不孕不育，反之為原發(fā)性不孕不育。

1.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)

1.2.1 標(biāo)本采集

(1)女性：用窺陰器將陰道口向外擴(kuò)開，先用無菌棉拭子將宮頸外口處的全部分泌物拭去，然后用1支專用無菌棉拭子插進(jìn)宮頸內(nèi)1～2 cm，旋轉(zhuǎn)3圈后，停留30 s，取出棉拭子送檢。(2)男性：使用無菌專用棉拭子伸入尿道內(nèi)2 cm處，旋轉(zhuǎn)1圈停留30 s，取出棉拭子送檢。

1.2.2 檢測(cè)方法

采用珠海市銀科醫(yī)學(xué)工程股份有限公司支原體鑒定藥敏試劑盒(培養(yǎng)法)，按如下步驟進(jìn)行檢測(cè)。用無菌吸嘴吸取培養(yǎng)液 100 μL加入C-空白對(duì)照孔，然后將標(biāo)本加入培養(yǎng)液中充分搖勻使之混合。吸取100 μL含菌培養(yǎng)液加入試劑條其余的微孔中；在試劑條的所有微孔中加入1～2滴礦物油。將測(cè)試板加蓋，37℃培養(yǎng)24～48 h，觀察結(jié)果。

1.2.3 結(jié)果判斷

(1)鑒定計(jì)數(shù)：于24 h后觀察并記錄解脲支原體(Ureaplasma urealyticum，Uu)的結(jié)果，48 h后觀察并記錄人型支原體(Mycoplasma hominis，Mh)的結(jié)果。微孔顏色變紅為陽性，不變?yōu)殛幮?。C-孔陰性時(shí)，試驗(yàn)有效，反之無效；C+孔陰性，則報(bào)告為培養(yǎng)陰性；反之為陽性，還須判讀Uu及Mh分別≥ 104CCU/mL的結(jié)果情況。(2)藥敏測(cè)

定：A行為低濃度，B行為高濃度，上下一一對(duì)應(yīng)為一種藥，兩孔顏色都變紅為耐藥，兩孔顏色都不變?yōu)槊舾?，低濃度孔變紅高濃度孔顏色不變?yōu)橹卸让舾?注：由于支原體是泌尿生殖道的定植菌之一，在正常情況下也可檢測(cè)出支原體，但在患者泌尿生殖道損傷、免疫力低下、生殖道環(huán)境PH改變等情況下可引起致病，所以檢測(cè)出的支原體是否有臨床意義，還需要根據(jù)其細(xì)菌數(shù)量和聯(lián)系其臨床癥狀來綜合分析。當(dāng)支原體計(jì)數(shù)結(jié)果≥104CCU時(shí)，表示感染的危險(xiǎn)性較高。)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 支原體感染情況分析

男性和女性各511例(共1022例)不孕不育患者中支原體培養(yǎng)結(jié)果為陽性的有341例(33.37%)，其中感染Uu的共有289例(28.27%)，感染Mh的共有14例(1.37%)，混合感染的共有38例(3.72%)。Uu的感染率明顯高于Mh和Uu+Mh，3種類型的支原體的感染率不全相同，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。男性與女性相比較，女性支原體Uu的單獨(dú)感染率明顯高于男性(P<0.05)，見表1。

表1 不同性別患者支原體感染情況[n(%)]

2.2 陽性患者治療后妊娠情況分析

511對(duì)不孕不育夫婦中，檢出支原體的共264對(duì)(51.67%)，其中治療后妊娠的有134對(duì)(50.76%)。男女夫婦雙方均為陽性的有77對(duì)(15.07%)，其中治療后成功妊娠的有41對(duì)(53.25%)，男性為陽性而女性為陰性的有66對(duì)(12.92%)，其中治療后成功妊娠的有30對(duì)(45.45%)，女性為陽性而男性為陰性的有121對(duì)(23.68%)，其中治療后成功妊娠的有63對(duì)(52.07%)。分別與男女均陰組比較，其余3種類型的妊娠率差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表2。

表2 陽性患者治療后妊娠情況[對(duì)(%)]

2.3 原發(fā)性與繼發(fā)性不孕不育患者支原體感染情況分析

原發(fā)性不孕不育患者總支原體感染率(31.65%)與繼發(fā)性不孕不育患者總支原體感染率(35.41%)相比較無明顯差異(P>0.05)。原發(fā)性患者的Uu(25.72%)感染率明顯低于繼發(fā)性患者的Uu(31.33%)，感染率P<0.05。Mh和Uu+Mh感染率原發(fā)性與繼發(fā)性感染無明顯差異(P>0.05)，見表3。

表3 原發(fā)性與繼發(fā)性不孕不育患者支原體感染情況比較[n(%)]

2.4 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

1022例不孕不育癥患者藥敏結(jié)果統(tǒng)計(jì)顯示，單獨(dú)感染Uu的藥物敏感率較高且大于80%的前3位的依次為：交沙霉素(94.81%)、克拉霉素(93.43%)、強(qiáng)力霉素(91.35%)，環(huán)丙沙星的耐藥率最高(56.75%)。單獨(dú)感染Mh的藥物敏感率較高且大于80%的前3位為：美滿霉素(92.86%)、交沙霉素(85.71%)、強(qiáng)力霉素(85.71%)，阿奇霉素的耐藥率最高(71.43%)。Uu+Mh混合感染的藥物敏感率較高的前3位為：交沙霉素(60.53%)、強(qiáng)力霉素(57.89%)、美滿霉素(55.26%)，羅紅霉素的耐藥率最高(86.84%)。綜上，單獨(dú)感染Uu的患者對(duì)交沙霉素等多種常用藥物的敏感性較高，Uu+Mh混合感染的患者對(duì)各種藥物的敏感性均低，即混合感染的患者對(duì)抗生素的耐藥性最高，見表4。

表4 不同類型支原體對(duì)10種抗生素的藥敏結(jié)果[n(%)]

3 討論

不孕不育癥是不孕和不育這兩種疾病的統(tǒng)稱，指育齡夫婦在同居一年以上，未使用任何避孕措施且性生活正常的前提下，無法成功懷孕或是懷孕后流產(chǎn)[3]。引起不孕不育癥的因素有許多，而生殖道病原微生物的感染是引發(fā)不孕不育癥的重要原因之一[4]，其中支原體是引起生殖道感染最為常見的病原微生物之一，其中以Uu和Mh最為常見[5]。生殖道支原體感染導(dǎo)致不孕不育引起的炎癥反應(yīng)與致病機(jī)制主要為以下幾點(diǎn)[6-11]：(1)支原體感染引起生殖道炎癥，如女性子宮內(nèi)膜炎及輸卵管炎，前者阻礙受精卵的著床及干擾胚胎的早期發(fā)育。后者阻礙精子和卵子的結(jié)合。(2)Uu產(chǎn)生的尿素酶分解尿素，一方面破壞女性生殖道自潔生理屏障；另一方面產(chǎn)生的氨，對(duì)生殖道的黏膜上皮細(xì)胞具有毒性作用，從而阻礙受精卵的形成或使精子的通道受阻；(3)Uu分泌及釋放神經(jīng)毒素、磷酸酶等，影響宿主細(xì)胞的新陳代謝；(4)支原體產(chǎn)生的神經(jīng)氨酸酶樣物質(zhì)與人精子膜有共同抗原，對(duì)精子造成免疫性損傷導(dǎo)致不孕不育；(5)Uu可吸附于精子上，導(dǎo)致精子活動(dòng)力降低、穿透卵細(xì)胞的能力降低，從而對(duì)受精造成影響。

本研究結(jié)果顯示，滇西地區(qū)不孕不育患者支原體陽性率為33.37%，與其他各地區(qū)報(bào)道不同[12-15]，如吉林為35.4%，滄州為51.7%，巴西為28.1%，與印度，西方國(guó)家等都存在差異，支原體的感染情況存在地域差異。男性與女性相比，女性的支原體感染率明顯高于男性，這可能與女性生殖道解剖生理特點(diǎn)和生殖道黏膜環(huán)境特點(diǎn)比男性更適合病原體的生長(zhǎng)有關(guān)[16，17]。原發(fā)性與繼發(fā)性不孕不育患者比較，前者的Uu感染率明顯低于后者，說明Uu感染可能是引發(fā)繼發(fā)性不孕不育的重要病因之一。

支原體是一群不具備細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物[18]。正因?yàn)榇颂攸c(diǎn)臨床醫(yī)師通常選用作用于細(xì)胞膜、核糖體、蛋白核酸合成之類的藥物，如大環(huán)內(nèi)酯類和四環(huán)素類為主要抑制蛋白合成的兩類抗生素，喹諾酮類為阻止DNA 復(fù)制的抗生素[1]。正因?yàn)榇巳惪股氐膹V泛及大量使用，使支原體對(duì)這些抗生素出現(xiàn)了不同程度的耐藥情況。然而本研究的藥敏結(jié)果和其他地區(qū)的文獻(xiàn)報(bào)道[19]不一致，通過與其他地區(qū)的對(duì)比發(fā)現(xiàn)各地區(qū)支原體對(duì)抗生素的敏感性和耐藥性各不相同。本研究中264對(duì)陽性患者經(jīng)治療后有134對(duì)(50.76%)患者成功妊娠，說明對(duì)不孕不育患者進(jìn)行有效的治療是很有必要的。因此應(yīng)盡量進(jìn)行支原體鑒定，進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果選擇恰當(dāng)?shù)乃幬飳?duì)支原體感染的不孕不育患者進(jìn)行合理的治療。

4 結(jié)論

綜上所述，滇西地區(qū)不孕不育患者的生殖道支原體感染率較高，主要以Uu感染為主，其次為Uu+Mh混合感染。單獨(dú)感染Uu、Mh的患者對(duì)多種常用藥物的敏感率較高，而混合感染的患者對(duì)藥物的敏感率較低。滇西地區(qū)生殖道支原體感染與不孕不育緊密相關(guān)，因此，育齡期夫婦應(yīng)加強(qiáng)支原體及相關(guān)病原微生物的篩查和治療。