方東輝，黃成軍，王 巍，賀 芳，阿果約達，甘 佳，易 軍*

（1.四川省畜牧科學(xué)研究院，動物遺傳育種四川省重點實驗室，四川 成都 610066；2.四川省旺蒼縣畜牧和動物疫病預(yù)防控制站，四川 旺蒼 628200）

加系西門塔爾牛屬于肉乳兼用型，主要用以改進我國黃牛的肉用性能。因其具有良好的產(chǎn)肉性能和環(huán)境適應(yīng)能力受到養(yǎng)殖戶的喜愛，但引進活牛的高昂成本在一定程度上阻礙了地方肉牛良種覆蓋率的增加，而采取胚胎移植技術(shù)，可大幅減低活牛成本和快速進行良種擴繁。為探討和研究西門塔爾牛胚胎移植在旺蒼縣的應(yīng)用前景，四川省畜牧科學(xué)研究院與旺蒼縣畜牧和動物疫病預(yù)防控制站于2021 年3 月起聯(lián)合開展了肉牛同期發(fā)情、胚胎移植技術(shù)的試驗工作。現(xiàn)將具體情況總結(jié)如下：

1 材料

1.1 胚胎來源 加系西門塔爾牛冷凍胚胎由北京加盛太平洋育種集團提供，共計34枚。

1.2 受體牛 在四川省旺蒼縣白水、嘉川、東河、黃洋、高陽、雙匯、龍鳳7個鄉(xiāng)鎮(zhèn)中選擇營養(yǎng)中等、發(fā)情正常的健康西雜母牛83 頭作為同期發(fā)情后備牛，要求育成牛18月齡以上或成母牛產(chǎn)犢后3月以上。同期發(fā)情處理后，通過對黃體篩查選擇符合移植條件的能繁母牛作為胚胎移植受體牛，并進行肉牛體況評分（BCS）。

1.3 器械及藥品試劑 顯微鏡，獸用B 超，胚胎移植槍、移植外套。氯前列腺醇（PG），2 mL，0.2 mg/支，寧波三生激素廠生產(chǎn)；鹽酸利多卡因注射液，0.1 g/支，石藥銀湖制藥有限公司生產(chǎn)；維生素A、D來自北京立時達藥業(yè)有限公司；亞硒酸鈉維生素E注射液為上海恒泰藥業(yè)公司出品。

2 方法

2.1 同期發(fā)情 采用雙PG注射方案，即第0 d第一次注射PG 4 mL、維生素A 10 mL、維生素E 10 mL，第11 d第二次注射PG 6 mL。

2.2 黃體篩查 針對發(fā)情牛進行直腸檢查，主要檢查左右側(cè)卵巢上的黃體，包括：黃體大小、發(fā)育程度、質(zhì)地軟硬、卵巢基礎(chǔ)和有無排卵點等。

2.3 胚胎移植操作

2.3.1 胚胎解凍與鑒定 在34 ℃溫水中快速解凍胚胎，100倍顯微鏡下觀察胚胎的形態(tài)、色調(diào)、大小、均勻度、細胞密度等情況，移植前胚胎裝管。

2.3.2 胚胎移植 將確認已排卵并形成黃體的母牛作為胚胎移植受體牛，將其保定，清除糞便，對外陰清洗消毒，用2%利多卡因5 mL 在1～2 尾椎間注射麻醉。采用直腸把握法將移植器中的胚胎移植于距離子宮角頂端1/2～1/4深處。

2.3.3 妊娠診斷 胚胎移植后90 d，采用獸用B超檢測妊娠情況。

3 結(jié)果與討論

3.1 同期發(fā)情及胚胎移植結(jié)果 同期發(fā)情處理后第20 d，83 頭后備牛中有63 頭牛發(fā)情，平均同期發(fā)情率為75.90%；篩選出符合胚胎移植條件的受體牛34頭進行胚胎移植，90 d后檢測到懷孕母牛數(shù)為13頭，平均妊娠率為38.24%。高立芳等［1］研究表明，牛胚胎移植妊娠率受多種因素的影響，如供體牛、受體牛、操作人員的技術(shù)水平及飼養(yǎng)管理水平等。本試驗受體牛相對分散，各農(nóng)戶間管理水平不一致，導(dǎo)致同期發(fā)情及胚胎移植效果略有差異。具體見表1。

表1 各鄉(xiāng)鎮(zhèn)同期發(fā)情及胚胎移植妊娠情況表

3.2 膘情對胚胎移植妊娠率的影響 表2 結(jié)果顯示：體況較瘦或較肥（評分為4～4.5 分或8～8.5分）的母牛妊娠率較低（僅有33.33%），其余膘情的妊娠率略高，分別為38.46%（5～5.5 分），42.86%（6～6.5 分）和40.00%（7～7.5 分）。受體牛的營養(yǎng)、膘情對于提高受體牛的移植可利用率、胚胎移植后的妊娠率及產(chǎn)犢率起著至關(guān)重要的作用。受體牛過瘦容易造成流產(chǎn)，過胖易引起妊娠后的熱應(yīng)激，影響妊娠率［2］。本試驗結(jié)果表明受體牛體況以中等以上為宜，體況評分在6～6.5分的妊娠率相對最高。

表2 膘情對胚胎移植妊娠率的影響

3.3 黃體大小對胚胎移植妊娠率的影響 表3顯示：具有0.8 cm、1.0 cm 和1.2 cm 黃體的受體母牛，其妊娠率分別為33.33%、35.71%和36.36%；具有1.5 cm 及以上黃體的受體母牛，妊娠率更高（達50.00%），但僅占總移植數(shù)的17.65%。該結(jié)果與張建軍等［3］報道的“具有1.5 cm 以上黃體的受體母牛的妊娠率較高”結(jié)果一致。建議黃體質(zhì)量好且略大的受體母牛，優(yōu)先進行胚胎移植。

表3 黃體大小對胚胎移植妊娠率的影響

4 結(jié)論

本研究得出：旺蒼縣西雜母牛的同期發(fā)情率為75.90%，胚胎移植妊娠率為38.24%；膘情過瘦或過肥均影響妊娠率，受體牛體況以中等偏上較為適宜；具有1.5 cm 及以上黃體的受體母牛的妊娠率較高。綜合考慮，肉牛胚胎移植技術(shù)適宜在旺蒼縣推廣應(yīng)用。