譚 麗，馬 羽，高慧娟，翟金婷，歐陽惠楠，王 威，馮興中,

(1. 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京世紀(jì)壇醫(yī)院，北京 100038；2. 清華大學(xué)玉泉醫(yī)院(清華大學(xué)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院)，北京 100040；3. 北京中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院，北京 100700)

帕金森病(Parkinson’s disease,PD)是中老年運(yùn)動障礙性疾病中最為常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病[1]，以靜止性肢體震顫、肌肉強(qiáng)直、運(yùn)動遲緩和姿勢反射異常等運(yùn)動癥狀為主要臨床特征，常伴隨便秘、睡眠障礙、汗出異常等自主神經(jīng)功能紊亂以及認(rèn)知功能下降等非運(yùn)動癥狀。近年來，其發(fā)病率隨著人口老齡化的增長而增加。流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示，55歲以上人群中PD的患病率為1%，65歲以上的PD患病率則上升為男性1.70%、女性1.60%[2]。目前，PD的發(fā)病機(jī)制并未完全清楚，主流觀點(diǎn)認(rèn)為發(fā)病機(jī)制主要有α-突觸核蛋白調(diào)控異常、線粒體功能障礙、氧化應(yīng)激、免疫炎癥反應(yīng)[3-5]。西醫(yī)藥物治療首選左旋多巴，隨著用藥時間的增加，常發(fā)生劑末惡化、開關(guān)現(xiàn)象、異動癥等一系列癥狀，嚴(yán)重影響患者的生活和工作[6]，造成沉重的家庭和社會負(fù)擔(dān)[7]。

中醫(yī)藥在“未病先防”“既病防變”理論指導(dǎo)下，治療PD運(yùn)動及非運(yùn)動癥狀具有整體調(diào)節(jié)、西藥用量減少、療效持續(xù)時間延長、不良反應(yīng)較少等獨(dú)特的優(yōu)勢[8-9]。辨證論治是中醫(yī)藥理論的一大特色與精華，中醫(yī)的療效取決于辨證的精準(zhǔn)。而證候是辨證論治體系的精髓，是中醫(yī)現(xiàn)代化研究的核心問題。王永炎院士在《中醫(yī)老年顫證診斷和療效評定標(biāo)準(zhǔn)(試行)》[10]中將PD證候診斷分為痰熱風(fēng)動、血瘀動風(fēng)、氣血兩虛、肝腎不足、陰陽兩虛證5個類型，為中醫(yī)學(xué)者研究PD中醫(yī)證候樹立了一面旗幟。PD中醫(yī)證候及物質(zhì)研究不僅有利于PD中醫(yī)研究動向，還可促進(jìn)中西醫(yī)結(jié)合治療PD的發(fā)展。筆者查閱近10年來發(fā)表在國內(nèi)期刊上關(guān)于PD中醫(yī)臨床證候的相關(guān)文獻(xiàn)，發(fā)現(xiàn)這些文獻(xiàn)大體從整體、運(yùn)動癥狀、非運(yùn)動癥狀這3個方面研究PD中醫(yī)證候，物質(zhì)基礎(chǔ)多從α-突觸蛋白、氧化應(yīng)激、免疫炎癥、氨基酸代謝等9方面進(jìn)行研究，本文從上述方面對PD中醫(yī)證候研究及其物質(zhì)基礎(chǔ)研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為中西醫(yī)干預(yù)PD的臨床治療提供借鑒和新思路。

1 整體證候研究

1.1證候要素研究 田浩林[11]采用橫斷面研究方法對254例PD患者中醫(yī)四診資料進(jìn)行分析得出髓減證分布比率最高，其次是肝風(fēng)、氣虛證。李婷等[12]對100例PD患者進(jìn)行中醫(yī)證候研究，結(jié)果顯示PD主要中醫(yī)證候依次為髓減證、肝風(fēng)證、氣虛證、內(nèi)熱證、陰虛證、陽亢證。靳昭輝等[13]收集118例PD患者四診信息研究分析，提出證候要素以髓減、氣虛、陰虛、腎虛為主，陽亢、內(nèi)熱、痰濁次之。

1.2證候類型研究 楊寧等[14]采用數(shù)理統(tǒng)計方法對350例PD患者中醫(yī)證型進(jìn)行分析，結(jié)果顯示PD常見證型依次為肝腎陰虛、氣血兩虛、陰陽兩虛、痰熱動風(fēng)、血瘀動風(fēng)型?；羟嗟萚15]對60例PD患者采集信息分析，初步得到PD臨床常見肝腎陰虛、陰虛風(fēng)動、氣血兩虛、痰瘀阻絡(luò)4種證型。趙俊杰[16]采用橫斷面研究方法對170例PD患者中醫(yī)四診資料進(jìn)行分析得出，常見證型出現(xiàn)頻率依次為肝腎陰虛、血瘀動風(fēng)、痰熱動風(fēng)、氣血虧虛、陰陽兩虛證。PD早期多見于血瘀動風(fēng)證，中期多見于肝腎陰虛證，晚期多見于陰陽兩虛證。黃銀龍[17]對40例PD患者資料進(jìn)行調(diào)查研究，結(jié)果提示肝腎陰虛、陰虛風(fēng)動、氣血兩虛、痰瘀阻絡(luò)是PD基本證候。陳婉珉等[18]對100例PD患者四診信息調(diào)查研究，通過聚類分析初步得出腎陽虧虛兼瘀血內(nèi)阻、肝腎陰虛兼瘀血風(fēng)動、氣血虧虛、痰熱瘀血風(fēng)動4種證候類型。陳彪[19]研制PD癥狀定式問卷調(diào)查125例PD患者，結(jié)果為常見中醫(yī)證候分布頻率從高到低為脾腎兩虛(22.4%)、肝腎陰虛(18.4%)、脾腎陽虛(16%)、氣陰兩虛(15.2%)、痰熱動風(fēng)(12.8%)、氣虛血瘀、陰陽兩虛、脾虛濕盛、濕熱內(nèi)蘊(yùn)、肝郁脾虛和肝火上炎證。進(jìn)一步分層研究提出早期多見肝腎陰虛，伴見瘀血、痰熱；中期多見脾腎虧虛兼痰濕壅盛；晚期多見氣虛、陽虛甚則陰陽兩虛。劉峘等[20]基于醫(yī)院信息系統(tǒng)對全國17家三級甲等醫(yī)院4 497例PD患者提取四診信息進(jìn)行研究分析結(jié)果顯示：PD中醫(yī)證候主要是肝腎陰虛和肝風(fēng)內(nèi)動證。王亞麗[21]對臨床觀察的45份病例進(jìn)行證候分析，常見中醫(yī)證候分布頻率依次為肝腎陰虛、腎虛髓減、痰濁內(nèi)蘊(yùn)、瘀血阻絡(luò)、痰瘀內(nèi)阻、氣血雙虧、風(fēng)痰阻絡(luò)、痰熱動風(fēng)證。并表明PD基礎(chǔ)證候是肝腎陰虛，痰濁瘀血是產(chǎn)生變證的病理因素，腎虛髓減是PD證候進(jìn)展的必然結(jié)果。

2 運(yùn)動癥狀證候研究

2.1相關(guān)性研究 李婷等[22]對178例PD患者進(jìn)行證候相關(guān)性研究，結(jié)果顯示：以震顫為主的PD與髓減、氣虛、血虛動風(fēng)、內(nèi)熱動風(fēng)4種證候關(guān)系密切；僵直少動型PD與陰虛證相關(guān)性顯著；以姿勢步態(tài)異常為主的與氣虛、血虛2種證候關(guān)系密切。

2.2證候要素研究 王茜[23]采用橫斷面研究方法對100例PD患者證候研究，結(jié)果顯示：以震顫為主的中醫(yī)證候要素以肝風(fēng)、腎虛和血瘀證為主；強(qiáng)直組中醫(yī)證候要素以腎虛、血虛和陽虛證為主；震顫強(qiáng)直組中醫(yī)證候要素以肝風(fēng)、腎虛和氣虛證為主。徐金輝等[24]運(yùn)用PD中醫(yī)臨床信息采集表收集60例PD患者四診信息研究，結(jié)果提示震顫型PD以血瘀、風(fēng)證為主，僵直少動型PD則以血瘀、陽虛證為主。

2.3證候類型研究 周雪倩[25]采用大樣本流行病學(xué)調(diào)查方法對308例PD受試者進(jìn)行問卷調(diào)查分析，結(jié)果顯示早中期PD患者運(yùn)動癥狀中醫(yī)證候從高到低依次為痰熱動風(fēng)、肝腎虧虛、氣血不足、氣滯血瘀證。黃健庭等[26]采集100例僵直少動型PD患者的四診信息，提出PD僵直少動型患者證候要素以氣虛、陽虛、痰濕、血瘀證為主。通過分層研究提出早期常見證型為脾腎兩虛兼水濕瘀阻型；中期常見證型為脾腎陽虛兼痰濕瘀阻型；晚期常見證型為脾腎陽虛兼痰濕瘀阻型、脾腎兩虛兼水濕瘀阻型。

3 非運(yùn)動癥狀證候研究

3.1PD睡眠障礙 周滬方等[27]采用PD證候要素量表對105例PD伴睡眠障礙患者進(jìn)行證候要素研究，結(jié)果顯示PD睡眠障礙證候要素以陰虛、髓減證為主，中醫(yī)證候多以陰虛陽亢、腎虛髓減證為主。周雪倩[25]對57例PD伴有快動眼期睡眠行為異常患者進(jìn)行證候研究，結(jié)果提示PD伴有快動眼期睡眠行為異常患者以肝腎不足、氣血不足證為主。

3.2PD便秘 周雪倩[25]對76例PD便秘患者進(jìn)行證候研究，結(jié)果提示早中期PD便秘患者主要以肝腎不足、氣血不足、痰熱動風(fēng)證為主。張?zhí)烨宓萚28]對44例PD排便障礙患者進(jìn)行中醫(yī)證候研究，提示PD排便障礙患者以髓減、肝風(fēng)、脾虛證為主要證候特征。同時對123例PD合并功能性便秘患者進(jìn)行中醫(yī)證候研究，結(jié)果顯示PD合并功能性便秘患者以陰虛、陽亢、內(nèi)熱、腎虛、肝風(fēng)、氣虛、髓減為主要中醫(yī)證候要素[29]。盧璐等[30]采集57例PD伴有便秘患者的四診信息研究，結(jié)果顯示伴有便秘的PD患者多見陰陽兩虛證，PD便秘患者多見脾腎陽虛證。

3.3PD疲勞 賈冬冬[31]采用橫斷面的研究方法應(yīng)用PD證候量表(PD-PES-13)對43例PD疲勞患者進(jìn)行證候要素研究，結(jié)果提示PD疲勞患者主要證候要素為氣虛、血虛和髓減證。姚璇等[32]在其基礎(chǔ)上對32例PD疲勞與51例PD非疲勞患者進(jìn)行證候要素辨別，結(jié)果顯示脾虛、血虛和復(fù)合證候要素脾虛+血虛、脾虛+髓減、腎虛+陰虛在PD疲勞患者中出現(xiàn)頻率更高，且可能為發(fā)病的危險因素。

3.4PD劑末現(xiàn)象 吉婷[33]采用橫斷面研究方法收集60例PD劑末現(xiàn)象陽性患者四診信息，由兩位及以上副主任中醫(yī)師同時判定中醫(yī)證型，結(jié)果顯示PD劑末現(xiàn)象患者多見于肝腎不足、氣血兩虛、陰陽兩虛3類中醫(yī)證型。

3.5PD抑郁 李雨濛等[34]對135例PD抑郁患者進(jìn)行中醫(yī)證候要素診斷，結(jié)果顯示PD抑郁患者以陰虛、內(nèi)熱、氣滯和髓減證為主要中醫(yī)證素。柳娜[35]對30例PD伴有情緒障礙患者進(jìn)行證候要素診斷，結(jié)果提示PD伴有情緒障礙者證候要素出現(xiàn)頻率從高到低依次為肝風(fēng)、髓減、氣虛、陰虛、陽亢、脾虛、內(nèi)熱，其中氣虛、陽亢證存在顯著性差異(P<0.05)。

3.6PD認(rèn)知功能障礙 王彩娟[36]調(diào)查102例PD輕度認(rèn)知功能障礙(mild cognitive impairment，MCI)患者中醫(yī)證候分布，結(jié)果顯示證型分布頻率依次為髓海不足證(50.00%)、瘀證(43.14%)、痰證(35.29%)，本虛證如氣虛、髓海不足證出現(xiàn)頻率顯著增加，標(biāo)實(shí)證如風(fēng)、痰、瘀、熱出現(xiàn)頻率降低，由此認(rèn)為PD-MCI的主要病機(jī)是髓海不足、痰瘀阻竅。李青松[37]收集23例PD癡呆及47例PD-MCI患者的四診信息進(jìn)行中醫(yī)證候診斷研究，提出PD癡呆患者以肝腎不足證為主，PD-MCI多見于血瘀風(fēng)動證；并且發(fā)現(xiàn)注意力、記憶力方面與肝腎不足證表現(xiàn)存在密切關(guān)系，執(zhí)行功能、視覺空間、語言等方面與血瘀風(fēng)動表現(xiàn)存在密切關(guān)聯(lián)。

3.7PD嗅覺障礙 李葭榮[38]采用橫斷面的研究方法收集66例PD嗅覺功能障礙患者四診信息進(jìn)行證候要素研究，結(jié)果顯示證候要素分布頻率依次為血虛、內(nèi)熱、陰虛、瘀血、痰濁證。李雨濛[39]對70例PD嗅覺障礙患者進(jìn)行證候要素研究，提出PD嗅覺障礙患者以肝風(fēng)、髓減、陰虛和陽亢證為主要證素，其中陽亢證可能是PD患者嗅覺障礙的危險因素。

4 PD證候物質(zhì)基礎(chǔ)研究

2011年熊新貴等[40]對PD、腦出血、腦梗死、頸椎病肝陽化風(fēng)證四病同類證進(jìn)行代謝組學(xué)分析，發(fā)現(xiàn)有1個共同表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)——硫氧環(huán)蛋白依賴性過氧化物酶(thioredoxin-dependent peroxide reductase,TPx)，提示中醫(yī)學(xué)的證候有微觀物質(zhì)基礎(chǔ)。近10年眾多科研工作者在此基礎(chǔ)上從α-突觸核蛋白、氧化應(yīng)激、免疫炎癥、氨基酸代謝、脂質(zhì)代謝、腸道菌群等多層次多角度進(jìn)行探索，為PD辨證客觀化指標(biāo)提供指導(dǎo)依據(jù)，現(xiàn)介紹如下。

4.1證候與α-突觸核蛋白 魏曉維[41]將60例早期PD患者隨機(jī)分為對照組與觀察組各30例，經(jīng)補(bǔ)腎復(fù)方治療后，觀察組較治療前血漿磷酸化α-突觸核蛋白(α-synuclein,α-syn)表達(dá)明顯減少(P<0.01)，提示補(bǔ)腎復(fù)方聯(lián)合西藥可有效治療早期PD，降低血漿α-syn的表達(dá)水平。梁艷[42]運(yùn)用蕓芍帕安合劑干預(yù)慢性PD模型小鼠，結(jié)果顯示可逆轉(zhuǎn)MPTP誘導(dǎo)的酪氨酸羥化酶(tyrosine bydroxylase,TH)陽性神經(jīng)元數(shù)目的減少(P<0.05)，上調(diào)自噬相關(guān)蛋白Beclin-1、LC3和P62等的表達(dá)，促進(jìn)α-syn降解，下調(diào)α-syn水平，從而減少多巴胺(dopamine,DA)能神經(jīng)元凋亡。田浩林[11]采用補(bǔ)腎平肝方干預(yù)PD A53T轉(zhuǎn)基因模型大鼠，補(bǔ)腎平肝方中藥組與模型組比較，大鼠腦內(nèi)黑質(zhì)TH(P=0.000)、LAMP-2A(P=0.000)、LC3Ⅱ/Ⅰ及P62相對蛋白含量表達(dá)，降低減少α-syn的表達(dá)(P=0.042)；提示補(bǔ)腎平肝方與PD核心靶標(biāo)包括SNCA、TH及LAMP-2，可能是通過LAMP-2的作用靶點(diǎn)調(diào)控自噬溶酶體(autophagy lysosomal pathway,ALP)相關(guān)生物學(xué)過程，提高對大鼠中腦黑質(zhì)α-syn的降解作用。邱朝陽[43]皮下注射魚藤酮建立慢性PD小鼠模型，經(jīng)水木和寧方干預(yù)治療后，中腦黑質(zhì)TH、泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(ubiquitin-proteasomesystem,UPS)相關(guān)蛋白E1、Parkin、UCH-L1及ubiquitin蛋白及mRNA表達(dá)較模型組升高，α-syn蛋白及mRNA表達(dá)較模型組降低(P均<0.01)，提示水木和寧方可通過調(diào)節(jié)UPS功能，促進(jìn)α-syn的降解，減輕異常聚集的α-syn對DA能神經(jīng)元的損傷。

4.2證候與氧化應(yīng)激 冉秋等[44]采用經(jīng)典的6-羥基多巴胺(6-hydroxydopamine，6-OHDA)損毀注射法制作陰虛動風(fēng)證PD模型，天麻鉤藤飲治療后可明顯降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)、環(huán)磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、內(nèi)皮素(endothelin，ET)、血漿血栓素B2(thromboxane B2，TXB2)(P<0.05或P<0.01),升高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、還原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH-Px)、環(huán)磷酸鳥苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)、6-酮-前列腺素F1α(P均<0.01)。梁建慶等[45]采用綠茶多酚干預(yù)PD大鼠，結(jié)果顯示大鼠紋狀體內(nèi)SOD、GSH、GSH-Px的含量均呈現(xiàn)增加趨勢,MDA含量呈減少趨勢(P均<0.01)，提示綠茶多酚可能通過清除自由基,減輕對細(xì)胞的損傷，從而改善大鼠的氧化應(yīng)激反應(yīng)。陳秀艷[46]制備腎虛髓空的PD大鼠模型，檢測其黑質(zhì)、紋狀體中泛素(ubiquitin,Ub)、泛素活化酶(E1 ubiquitin activating enzyme，E1)、泛素C末端水解酶(ubiquitin carboxy-terminal hydrolases L1，L1UCH-L1)及20S蛋白酶體的蛋白表達(dá)量減少，表明UPS功能減退，經(jīng)地黃飲子干預(yù)后，黑質(zhì)、紋狀體中Ub、E1、UCH-L1及20S蛋白酶體的蛋白表達(dá)量增加，提示地黃引子干預(yù)PD腎虛髓空證的效應(yīng)機(jī)制可能是調(diào)控下丘腦-垂體-腎上腺皮質(zhì)軸功能虛性亢進(jìn)，提高腦組織抗氧化水平，恢復(fù)UPS降解功能。梁建慶等[47]采用復(fù)方地黃湯干預(yù)陰虛風(fēng)動證PD小鼠，與正常組、模型組比較,水煎液組MDA含量顯著下降,GSH、GSH-Px、SOD含量顯著升高(P均<0.01)，提示中藥組可更好地改善小鼠腦組織的氧化應(yīng)激指標(biāo)。張靜艷等[48]采用附子湯灌胃聯(lián)合腹腔注射MPTP法制備PD肝陽上亢證小鼠模型，與模型組、白芍組相比，牛膝組及配伍組可顯著提高小鼠腦組織SOD及GSH水平，降低MDA含量，激活腦組織氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白核因子NF-E2相關(guān)因子2(nuclearfactor erythroidderived 2-like 2,Nrf2)核轉(zhuǎn)位并上調(diào)血紅素氧合酶1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白的表達(dá)，對氧化應(yīng)激有一定程度的改善，而白芍組對改善氧化應(yīng)激作用不明顯；提示配伍組可能通過牛膝激活Nrf2/HO-1信號通路抑制氧化應(yīng)激，發(fā)揮協(xié)同增效的神經(jīng)保護(hù)作用。

4.3證候與免疫炎癥 郭健等[49]給予滋腎柔經(jīng)湯聯(lián)合烏靈膠囊治療53例PD肝腎陰虛證患者，結(jié)果顯示觀察組血清脂聯(lián)素(adiponectin，APN)、尿酸(uric acid，UA)和SOD水平均顯著高于對照組，腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)和白細(xì)胞介素-6(interleukin-6，IL-6)水平均明顯低于對照組(P<0.05)。李瀟清[50]采用腹腔注射MPTP建立PD模型小鼠，與模型組相比，中藥組小鼠腦組織NLRP3、ASC、caspase-1、IL-1β、TNF-α蛋白表達(dá)水平顯著性下降(P<0.05)，提示補(bǔ)腎益髓方可能通過抑制NLRP3炎癥小體的激活，下調(diào)IL-1β、TNF-α炎癥因子的表達(dá)水平，減輕神經(jīng)炎癥反應(yīng)，減少DA神經(jīng)元受損而保護(hù)神經(jīng)。

4.4證候與代謝組學(xué) 李若瑜[51]收集50例PDD患者治療前的尿液樣本進(jìn)行代謝組學(xué)分析，與正常組相比，PDD患者尿液中主要包括肌酐、牛磺酸、檸檬酸、二甲胺、甘氨酸、丙酮酸、氧化三甲胺7種生物代謝標(biāo)志物，提示PDD的發(fā)病應(yīng)與能量代謝、神經(jīng)遞質(zhì)代謝、脂質(zhì)代謝的異常有關(guān)。

4.5證候與神經(jīng)遞質(zhì) 洪芳等[52]采用復(fù)方地黃方干預(yù)陰虛動風(fēng)證PD異動癥(levodopa-induced dyskinesia，LID)模型大鼠，與正常對照組、假手術(shù)組比較，LID模型組紋狀體DA D1、D2受體含量明顯下調(diào)(P<0.05)；可見復(fù)方地黃方通過調(diào)節(jié)D1、D2受體的水平,改善直接通路和間接通路的失衡。滕龍等[53]制備PD LID模型大鼠，檢測LID大鼠大麻素CB1受體的含量明顯升高，而復(fù)方地黃方干預(yù)后大麻素CB1受體的表達(dá)呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢(P均<0.01)；提示復(fù)方地黃方可能通過激活紋狀體內(nèi)大麻素CB1受體，抑制興奮性氨基酸的釋放，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生級聯(lián)反應(yīng)，從而減弱神經(jīng)元的興奮性。梁建慶等[48]采用復(fù)方地黃湯干預(yù)陰虛風(fēng)動證PD小鼠，與正常組、模型組比較,中藥組可顯著升高神經(jīng)遞質(zhì)DA、DOPAC、HVA的含量(P均<0.01)，提示復(fù)方地黃湯對PD小鼠具有良好的治療作用。

4.6證候與蛋白質(zhì) 于磊[54]采用補(bǔ)腎活血顆粒干預(yù)6-OHDA毀傷法制作的PD大鼠模型，結(jié)果顯示：與正常組、模型組相比，治療組血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、絡(luò)氨酸激酶受體b(tyrosine kinase receptor B,TrKb)表達(dá)明顯增強(qiáng)(P<0.01),Tau蛋白表達(dá)顯著降低(P<0.01)；提示補(bǔ)腎活血顆粒的作用機(jī)制可能是通過上調(diào)與神經(jīng)保護(hù)因子相關(guān)的VEGF、Trkb蛋白表達(dá)，下調(diào)與蛋白質(zhì)凝聚相關(guān)的Tau蛋白表達(dá)從而抑制細(xì)胞凋亡，達(dá)到保護(hù)神經(jīng)元。梁建慶等[55]采用復(fù)方地黃顆粒干預(yù)陰虛動風(fēng)證PD大鼠，檢測其神經(jīng)生長因子及其受體(nerve growth factor，NGF)、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(brain-derived neurotrophic factor，BDNF)、膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(glialcellline-derived neurotrophic factor，GDNF)、Trk，GDNF家族受體GFR-α1以及Ret mRNA及蛋白的表達(dá)，TH mRNA及蛋白的表達(dá)，結(jié)果顯示：與正常組、模型組比較,復(fù)方地黃顆粒各劑量組NGF、BDNF、GDNF、Trk A、Trk B、GFR-α1、Ret、TH的mRNA及蛋白表達(dá)均明顯升高(P均<0.01)，提示復(fù)方地黃顆粒抗PD的作用機(jī)制可能是通過調(diào)控神經(jīng)營養(yǎng)因子及其受體的表達(dá)。

4.7證候與氨基酸代謝 張晨光等[56]運(yùn)用復(fù)方地黃方干預(yù)陰虛動風(fēng)證PD LID大鼠模型，結(jié)果顯示陰虛動風(fēng)證PD LID模型大鼠紋狀體內(nèi)興奮性氨基酸顯著升高;復(fù)方地黃方干預(yù)后興奮性氨基酸含量顯著降低,抑制性氨基酸含量明顯升高(P<0.05)；提示復(fù)方地黃方可能是通過調(diào)節(jié)腦內(nèi)氨基酸的水平來緩解PD LID。梁建慶等[57]采用復(fù)方地黃顆粒和毛蕊花糖苷干預(yù)PD大鼠，檢測各組大鼠N-甲基-D-天冬氨酸受體1(N-methyl-D-asperate receptor 1,NMDA-R1)、NMDA-R2、γ-氨基丁酸B1受體(γ-aminobutyric acid receptor type B,GABA-RB1)mRNA水平、天門冬氨酸(aspartic acid,ASP)、谷氨酸(glutamic acid,GLU)、甘氨酸(glycine,GLY)、GABA、TH陽性細(xì)胞數(shù)等，結(jié)果顯示復(fù)方地黃顆粒和毛蕊花糖苷可使PD模型大鼠右側(cè)紋狀體NMDA-R1、NMDA-R2 mRNA水平明顯降低,GABA-RB1 mRNA表達(dá)升高(P均<0.01);ASP、GLU含量升高,GLY、GABA含量降低(P均<0.01)；TH陽性表達(dá)細(xì)胞數(shù)明顯增多(P<0.01)；提示復(fù)方地黃顆粒的作用靶標(biāo)可能包括TH以及氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)及其受體基因。周霖[58]運(yùn)用補(bǔ)心滋腎方治療心腎不交型PD伴睡眠障礙患者，治療后PD患者腦內(nèi)氨基酸神經(jīng)遞質(zhì)Glu與GABA水平較治療前升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。章林[59]選取130例PD患者，檢測其血清Cys C、UA、HCY與證型之間的相關(guān)性，結(jié)果顯示PD患者常伴有高血清Cys C、高HCY、低UA，正虛證(陰陽虧虛、氣血不足、肝腎不足證)血清Cys C顯著升高(P<0.05)。陳燕[60]選取60例腎虛血瘀證PD患者隨機(jī)分為對照組和治療組，治療組在對照組的基礎(chǔ)上加用補(bǔ)腎活血湯治療，治療組的UA水平較對照組明顯升高，治療組的Hcy水平較對照組明顯降低(P均<0.05)；提示補(bǔ)腎活血湯可以改善腎虛血瘀型PD患者癥狀，作用機(jī)制可能與升高UA、降低Hcy水平相關(guān)。

4.8證候與脂質(zhì)代謝 王彩娟[61]通過分析52例PD患者不同中醫(yī)證型與血脂水平之間的關(guān)系，結(jié)果顯示氣虛證及髓海不足證PD患者總膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL-C)、Ox-LDL水平顯著低于其他證型(P均<0.05)，提示脂質(zhì)代謝異常可能是導(dǎo)致PD發(fā)病的因素之一，且可能為PD患者痰、瘀等病理因素的生化物質(zhì)基礎(chǔ)和客觀指標(biāo)之一。

4.9證候與腸道菌群 周夢玲等[62]對18例PD患者進(jìn)行證候辨別，并采集其糞便樣本測序分析糞便菌群類別結(jié)構(gòu)，結(jié)果顯示內(nèi)熱證與擬桿菌門呈正相關(guān)(r=-0.534,P=0.022),與厚壁菌門呈負(fù)相關(guān)(r=-0.480,P=0.044),痰濁證與厚壁菌門呈負(fù)相關(guān)(r=-0.470,P=0.049),陰虛證與軟壁菌門呈負(fù)相關(guān)(r=-0.572,P=0.013)；提示擬桿菌門與中醫(yī)內(nèi)熱證相關(guān),而非特異的厚壁菌門分別與內(nèi)熱證和痰濁證負(fù)相關(guān)。李婷[63]應(yīng)用量表評估25例PD患者中醫(yī)證候特征，并采集糞便樣本應(yīng)用16Sr RNA高通量測序分析，結(jié)果顯示擬桿菌門相對豐富度與中醫(yī)證候肝風(fēng)證存在顯著相關(guān)性(Spearman’sR=0.432,P=0.031)。唐莉莉[64]運(yùn)用溫腎養(yǎng)肝方治療20例PD患者，收集治療組和健康對照組患者前后糞便樣本，結(jié)果顯示，與健康對照組相比，PD患者糞球菌、瘤胃球菌、乳桿菌、雙歧桿菌類、毛螺菌明顯減少；桿菌、腸球菌、變形桿菌、克雷伯菌屬豐度偏高(P均<0.05)。經(jīng)溫腎養(yǎng)肝方治療后，PD患者乳酸乳球菌、毛螺菌科、普雷沃氏菌豐度上升，綠彎菌門豐度較前下降；提示溫腎養(yǎng)肝方可能從增加有益菌屬豐度，降低有害菌屬來調(diào)節(jié)腸道菌群起到治療PD的作用。

5 小 結(jié)

PD中醫(yī)證候研究仍缺乏統(tǒng)一的指南，通過上述研究仍有據(jù)可循，整體以肝腎陰虛及風(fēng)證為主要證候，早期多標(biāo)實(shí)內(nèi)盛，多為痰瘀動風(fēng)，中期多本虛標(biāo)實(shí)，本虛多為肝腎陰虛、脾腎虧虛，標(biāo)實(shí)為痰濕壅盛，晚期多以正氣虛耗為主，如氣虛、陽虛甚至陰陽兩虛；震顫型PD中醫(yī)證候主要為腎虛髓減、氣虛血瘀、血虛動風(fēng)、痰熱動風(fēng)證，僵直型PD中醫(yī)證候主要為陰陽兩虛、氣血虧虛、腎虛血瘀證；非運(yùn)動癥狀中醫(yī)證候以腎虛髓減、氣血虧虛本虛證為主，兼以痰瘀內(nèi)熱動風(fēng)標(biāo)實(shí)證。大量物質(zhì)基礎(chǔ)研究表明PD證候與α-突觸核蛋白、氧化應(yīng)激反應(yīng)、免疫炎癥、代謝組學(xué)、神經(jīng)遞質(zhì)、蛋白質(zhì)代謝、氨基酸代謝、脂質(zhì)代謝、腸道菌群等客觀指標(biāo)存在顯著的相關(guān)性，進(jìn)而證實(shí)PD中醫(yī)證候有物可循。如何將PD證候研究與基礎(chǔ)研究有機(jī)結(jié)合更好地服務(wù)于臨床仍是當(dāng)前的重點(diǎn)和難點(diǎn)。未來需要多中心研究人員將臨床研究和物質(zhì)基礎(chǔ)研究進(jìn)行聯(lián)動，一方面中醫(yī)證候仍運(yùn)用中醫(yī)原創(chuàng)思維進(jìn)行研究，另一方面，借助現(xiàn)代先進(jìn)的科學(xué)技術(shù)，對實(shí)驗(yàn)動物及受試者的樣本進(jìn)行精密地檢測以獲得更高質(zhì)量的成果；進(jìn)而構(gòu)建PD病證結(jié)合的證候與物質(zhì)基礎(chǔ)的數(shù)據(jù)庫，探索病-證-客觀指標(biāo)三者之間的內(nèi)在聯(lián)系，為中醫(yī)證型研究開辟新路徑，有望為全面構(gòu)建中醫(yī)藥治療PD療效評價體系提供數(shù)據(jù)支持。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。