彭宇聰 高 源 王夢(mèng)思 崔清梅 徐 卓 彭 宇

(1.湖北大學(xué)資源環(huán)境學(xué)院 湖北武漢 430062；2.湖北大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 湖北武漢 430062；3.湖北省恩施州農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所 湖北恩施 44500)

茶脊冠網(wǎng)蝽Stephanitischinensis又名茶網(wǎng)蝽，是我國(guó)西南茶區(qū)主要害蟲[1]。茶脊冠網(wǎng)蝽具有體積小、易繁殖、易擴(kuò)散、易爆發(fā)、多重危害和難以控制等特點(diǎn)[2]。主要集中在成熟茶葉的背面刺吸葉片汁液，種群數(shù)量較大時(shí)也會(huì)危害到新生長(zhǎng)出來(lái)的嫩葉，使受害茶樹(shù)葉片正面呈現(xiàn)許多白色斑點(diǎn)，危害嚴(yán)重時(shí)茶園整體遠(yuǎn)看一片灰白[3]，影響茶樹(shù)生長(zhǎng)，導(dǎo)致茶樹(shù)產(chǎn)量和質(zhì)量下降[4]，甚至?xí)?dǎo)致茶樹(shù)枯死。

近年來(lái)，由于商貿(mào)往來(lái)、種苗采購(gòu)、氣候變化等使得該蟲傳播速度增長(zhǎng)較快[5]。2012年茶脊冠網(wǎng)蝽于陜西省紫陽(yáng)縣、鎮(zhèn)巴縣向東北方向呈梯次的傳播形式進(jìn)行擴(kuò)散[6]。2013年底，茶脊冠網(wǎng)蝽已擴(kuò)散到鎮(zhèn)巴縣的10個(gè)鎮(zhèn)，紫陽(yáng)縣5個(gè)鎮(zhèn)，大片茶園受到不同程度的危害[3]。截止2017年，茶脊冠網(wǎng)蝽已蔓延到漢江流域、嘉陵江流域的十五個(gè)重點(diǎn)產(chǎn)茶鄉(xiāng)鎮(zhèn)，約7297hm2茶園發(fā)生了茶脊冠網(wǎng)蝽危害[5]。2016-2020年茶脊冠網(wǎng)蝽在恩施州及其周邊茶區(qū)大爆發(fā)，已成為當(dāng)?shù)夭枞~生產(chǎn)中最嚴(yán)重的蟲害之一。

現(xiàn)階段茶脊冠網(wǎng)蝽的防治仍以化學(xué)防治為主，但化學(xué)防治會(huì)導(dǎo)致環(huán)境污染、農(nóng)藥殘留、害蟲抗藥性和傷害天敵等問(wèn)題[7-9]。30%茶皂素水劑為近年登記的植物源農(nóng)藥，對(duì)環(huán)境的兼容性好、無(wú)污染、殘留低，對(duì)多種茶園害蟲具有較好的防控效果[10]。為探究30%茶皂素水劑對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽的防治效果，我們測(cè)定了30%茶皂素水劑對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽和蜘蛛的室內(nèi)毒性，為利用30%茶皂素水劑防治茶脊冠網(wǎng)蝽提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試?yán)ハx

供試?yán)ハx為茶脊冠網(wǎng)蝽Stephanitischinensis2至3齡若蟲，采自恩施州農(nóng)科院茶葉所試驗(yàn)基地。

供試蜘蛛為機(jī)敏異漏斗蛛Agelenadifficilis、白斑獵蛛Evarchaparalbaria，采自恩施州農(nóng)科院茶葉所試驗(yàn)基地。將采回的蜘蛛單頭飼養(yǎng)于玻璃管(長(zhǎng)13cm，直徑2cm)中[11]。

1.2 供試殺蟲劑

30%茶皂素水劑，湖北信風(fēng)作物保護(hù)有限公司提供。0.3%苦參堿水劑，河北沃德豐藥業(yè)有限公司提供。

1.3 30%茶皂素水劑對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽若蟲的室內(nèi)毒力測(cè)定

采用葉片浸藥飼蟲法[12]測(cè)定30%茶皂素水劑對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽若蟲的毒性。將30%茶皂素水劑配置為10、20、40、80和160(單位：g/L)5個(gè)濃度?；炫湟簽?0%茶皂素水劑+0.3%苦參堿水劑。配置5個(gè)濃度梯度(單位：g/L)(5+2、10+4、20+8、40+16、80+32)。選用化學(xué)農(nóng)藥2.5%聯(lián)苯菊酯配置5個(gè)濃度梯度(單位：mg/L)(1、2、4、8和16)作為對(duì)照。

將新鮮茶葉用蒸餾水洗凈晾干，浸入藥液30s取出瀝干至茶葉表面不再形成水珠。用脫脂棉包住茶葉柄基部，滴加相對(duì)應(yīng)濃度的藥液以防葉片失水干枯。將浸藥茶葉置于直徑9cm培養(yǎng)皿中，每皿接入茶脊冠網(wǎng)蝽2-3齡若蟲20頭，置于培養(yǎng)箱中(T=28±1℃、RH=80%±5%、L：D=14：10)。每個(gè)濃度重復(fù)5次，以清水為空白對(duì)照。處理24h、48h和72h后觀察茶脊冠網(wǎng)蝽的死亡數(shù)。

1.4 30%茶皂素水劑對(duì)2種蜘蛛的毒性測(cè)定

使用藥膜法[13]測(cè)定30%茶皂素水劑及混配液對(duì)機(jī)敏異漏斗蛛、白斑獵蛛的毒性。將30%茶皂素水劑和混配液按照田間使用濃度進(jìn)行稀釋。即30%茶皂素水劑用水稀釋300倍，30%茶皂素水劑和0.3%苦參堿水劑等體積混合，用水稀釋500倍。用滴管向玻璃管(長(zhǎng)度13cm、直徑2cm)中分別滴加稀釋過(guò)的30%茶皂素水劑和混配液。轉(zhuǎn)動(dòng)玻璃管至玻璃管內(nèi)壁均被藥液潤(rùn)濕后將其倒置，等待玻璃管內(nèi)壁自然風(fēng)干。向風(fēng)干的玻璃管中接入1頭蜘蛛。24h和48h后檢查蜘蛛是否存活。每種藥劑處理蜘蛛30頭。

1.5 30%茶皂素水劑對(duì)2種蜘蛛的驅(qū)避率測(cè)定

參照秦燕妮的方法測(cè)定供試藥劑對(duì)蜘蛛的驅(qū)避作用[14]。供試藥劑及處理包括：30%茶皂素水劑300×、混配液同上和2.5%聯(lián)苯菊酯乳油1500×，以清水作為對(duì)照。先將直徑12cm的圓形濾紙對(duì)折分成4等份。用滴管將供試藥劑滴加到濾紙上，待藥液干后，將濾紙放入直徑12cm的培養(yǎng)皿中。每皿接入1頭蜘蛛，每1h觀察并記錄蜘蛛的所在位置。每種蜘蛛共測(cè)定30頭，每個(gè)處理重復(fù)5次。試驗(yàn)過(guò)程于安靜環(huán)境下進(jìn)行。

1.6 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)分析

死亡率=試蟲死亡數(shù)/試蟲總數(shù)×100%

校正死亡率=(處理死亡率-對(duì)照死亡率)/(1-對(duì)照死亡率)×100%

驅(qū)避率=(對(duì)照試蟲數(shù)-處理試蟲數(shù))/對(duì)照試蟲數(shù)×100%

運(yùn)用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。按照Finney幾率值分析法[15]，求毒力回歸方程、致死中濃度、95%置信限。在不同濾紙上蜘蛛的停留頭數(shù)差異采用單因素方差分析，平均數(shù)的多重比較采用最小顯著性極差法。

2 結(jié)果與分析

2.1 30%茶皂素水劑對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽若蟲的毒力測(cè)定

30%茶皂素水劑對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽若蟲具有一定的毒殺活性。24h后，茶脊冠網(wǎng)蝽在取食了供試藥劑處理的葉片后其活動(dòng)減弱，觸碰蟲體其反應(yīng)強(qiáng)度降低。供試藥液濃度越高茶脊冠網(wǎng)蝽致死性越強(qiáng)，且隨時(shí)間延長(zhǎng)，死蟲數(shù)增加。30%茶皂素水劑處理24h、48h和72h后，對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽若蟲的致死中濃度LC50(單位：g/L)分別為98.74、55.66和43.11(表1)。30%茶皂素水劑與0.3%苦參堿水劑混配液對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽若蟲的作用效果與30%茶皂素水劑一樣，隨時(shí)間延長(zhǎng)，毒殺效果逐漸增加。但LC50與30%茶皂素水劑相差不明顯，表明混配增效作用不明顯。2.5%聯(lián)苯菊酯處理后，迅速有若蟲死亡。隨時(shí)間延長(zhǎng)，死亡數(shù)逐漸增加。其對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽若蟲的速效性及毒力均高于30%茶皂素水劑。

表1 30%茶皂素水劑對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽若蟲的毒力回歸方程

表2 2.5%聯(lián)苯菊酯乳油對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽若蟲的毒力回歸方程

2.2 30%茶皂素水劑對(duì)2種蜘蛛的毒性

30%茶皂素水劑300倍稀釋液及其混配液處理的機(jī)敏異漏斗蛛和白斑獵蛛在24h、48h后均活動(dòng)正常。說(shuō)明30%茶皂素水劑300倍稀釋液及其混配液對(duì)供試的2種蜘蛛均無(wú)直接毒殺作用。

2.3 30%茶皂素水劑對(duì)2種蜘蛛的驅(qū)避作用

藥劑對(duì)蜘蛛驅(qū)避程度的大小可用該種試劑處理區(qū)域內(nèi)停留蜘蛛的數(shù)量表示，驅(qū)避程度大則該種試劑處理區(qū)域停留的蜘蛛數(shù)量少[16]。30%茶皂素水劑處理濾紙上蜘蛛的停留數(shù)與對(duì)照無(wú)差異，表明30%茶皂素水劑對(duì)機(jī)敏異漏斗蛛的驅(qū)避作用與對(duì)照沒(méi)有差異，極顯著低于化學(xué)藥劑2.5%聯(lián)苯菊酯處理，但混配液對(duì)機(jī)敏異漏斗蛛有一定的驅(qū)避作用(表3)。

表3 機(jī)敏異漏斗蛛在不同殺蟲劑處理濾紙上的停留數(shù)量

不同藥劑處理對(duì)白斑獵蛛的驅(qū)避作用與機(jī)敏異漏斗蛛類似(表4)。30%茶皂素水劑處理濾紙上白斑獵蛛的停留數(shù)與對(duì)照并無(wú)差異，但白斑獵蛛的在混配液處理的濾紙上停留的頭數(shù)顯著低于對(duì)照。表明30%茶皂素水劑對(duì)白斑獵蛛沒(méi)有驅(qū)避作用，但混配液對(duì)白斑獵蛛存在一定的驅(qū)避作用。30%茶皂素水劑及混配液對(duì)白斑獵蛛驅(qū)避作用均極顯著低于2.5%聯(lián)苯菊酯。

表4 白斑獵蛛在不同殺蟲劑處理濾紙上的停留數(shù)量

3 討論

茶脊冠網(wǎng)蝽的爆發(fā)已經(jīng)嚴(yán)重影響恩施州的茶葉產(chǎn)量與質(zhì)量，成為恩施州茶葉產(chǎn)業(yè)發(fā)展被制約的主要因素之一。30%茶皂素水劑作為植物源農(nóng)藥，具有純天然且環(huán)保、作用方式繁多、殺蟲針對(duì)性更強(qiáng)等諸多特點(diǎn)[17，18]。

本研究表明，30%茶皂素水劑對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽3齡及以下若蟲表現(xiàn)出毒殺活性，且隨時(shí)間延長(zhǎng)，處理藥劑濃度增加，其作用效果逐漸增強(qiáng)。盡管30%茶皂素水劑及混配液對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽的毒性比化學(xué)農(nóng)藥2.5%聯(lián)苯菊酯低，但對(duì)茶園蜘蛛的影響小[19]，對(duì)供試的機(jī)敏異漏斗蛛和白斑獵蛛沒(méi)有毒性，也無(wú)明顯的驅(qū)避作用，表明30%茶皂素水劑對(duì)茶脊冠網(wǎng)蝽的田間防治具有一定的潛力。

Pekar and Benes 認(rèn)為殺蟲劑對(duì)不同類型的蜘蛛的影響可能不同，由于蛛網(wǎng)的作用，結(jié)網(wǎng)型蜘蛛可能比游獵型蜘蛛具有更大的生存優(yōu)勢(shì)[20]。本研究的兩種蜘蛛均為恩施州茶園優(yōu)勢(shì)種蜘蛛[21]，其中，機(jī)敏異漏斗蛛為結(jié)網(wǎng)型蜘蛛，白斑獵蛛為游獵型蜘蛛，供試殺蟲劑對(duì)這兩種蜘蛛的驅(qū)避作用并沒(méi)有差異。由于本研究測(cè)定的蜘蛛種類較少，30%茶皂素水劑對(duì)蜘蛛的影響還有待進(jìn)一步研究。