毛佳， 吳險平， 王宏寶*， 王曉飛， 高玉俠

(1.江蘇徐淮地區(qū)淮陰農(nóng)業(yè)科學研究所，江蘇 淮安 223001； 2.淮安市農(nóng)業(yè)科技實業(yè)總公司，江蘇 淮安 223001；3.淮安市淮安區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，江蘇 淮安 223200)

根結(jié)線蟲(Meloidogyneincognita)是危害最嚴重的植物病原線蟲之一，在世界各地廣泛分布，可寄生于3 000多種植物，尤以茄科、葫蘆科和十字花科等植物受害嚴重[1]。據(jù)估計，全世界農(nóng)業(yè)生產(chǎn)每年因各類災害造成的總損失中，根結(jié)線蟲的危害約占到5%左右，多達500億美元。黃瓜作為我國重要蔬菜種類，近年來隨著日光溫室黃瓜栽培面積的逐步擴大和復種指數(shù)的提高，根結(jié)線蟲危害日趨嚴重，并已成為黃瓜生產(chǎn)中的主要障礙，一般危害造成減產(chǎn)20%～30%，嚴重的達70%以上，甚至絕收[2-3]。近年來，由于根結(jié)線蟲危害嚴重，給蔬菜產(chǎn)量造成極大損失，對當?shù)剞r(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展帶來極大影響，有一些關于中低毒藥劑和生防菌防治根結(jié)線蟲病方面的試驗報道[4-8]，然而在氯溴異氰尿酸及植物源材料檳榔粉等方面的報道較少。為解決生產(chǎn)中根結(jié)線蟲病的防治難題，本文通過不同外源物對根結(jié)線蟲室內(nèi)活性及盆栽等藥效進行測定，研究了南方根結(jié)線蟲與土壤理化性質(zhì)對不同外源物的響應，以期為南方根結(jié)線蟲病綜合防控提供技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

試驗供試外源物為40%辛硫磷乳油(連云港立本作物科技有限公司)，1.8%阿維菌素乳油(連云港立本作物科技有限公司)，50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑(南京南農(nóng)科技發(fā)展有限公司)，25%噻蟲嗪水分散粒劑(江蘇寶靈化工股份有限公司)，檳榔粉(提取比例15∶1，質(zhì)量比，寶雞市方晟生物開發(fā)有限公司)。

1.2 幼蟲準備

在溫室內(nèi)盆栽番茄繁殖南方根結(jié)線蟲。將番茄種子播種在育苗床中，20 d后稍顯粗壯時移為盆栽。接種南方根結(jié)線蟲，1個月后，根部會產(chǎn)生大量卵囊。將根取出并洗去泥土，用鑷子挑取卵囊置于培養(yǎng)皿中，用0.5%的次氯酸鈉處理3 min，再用無菌水沖洗3次，置于25 ℃培養(yǎng)箱中進行孵化。3 d左右就會孵化出大量2齡幼蟲(J2)，生物檢測備用[9]。

1.3 外源物對南方根結(jié)線蟲活性試驗

各種藥劑分別配制100倍液和150倍液2份母液備用，同時配置約200條·mL-1的線蟲懸浮液備用。用移液槍吸取0.5 mL線蟲懸浮液置入5 mL離心管后，各濃度線蟲處理液容積統(tǒng)一設定為2 mL，根據(jù)總?cè)萘糠謩e計算對應400、600、800、1 200、1 600、2 400倍液所需要的母液量和用水量。配置處理液時，先將計算好的用水量加入離心管的線蟲懸浮液中，接著加入不同稀釋倍數(shù)所需的母液量。將配置好的不同倍數(shù)處理液搖勻后置于試管架上，在25 ℃黑暗培養(yǎng)箱中分別處理24 h，鏡檢觀察線蟲死亡率。鏡檢時分別將處理液倒入凹面皿中并置于體視顯微鏡下統(tǒng)計存活狀態(tài)，線蟲存活狀態(tài)通過針刺法測定，即線蟲僵直不動為死蟲，彎曲蠕動狀態(tài)為活蟲[10]。試驗通過計算不同外源物對線蟲的擊倒率(矯正死亡率)來測定線蟲對各外源物的敏感性?？瞻讓φ赵O為清水組，每個處理重復3次，每個處理的線蟲數(shù)量約為100條。

1.4 外源混合物對南方根結(jié)線蟲盆栽藥效試驗

試驗作物：黃瓜，品種為冬美906，由天津德瑞特種業(yè)有限公司生產(chǎn)。將黃瓜種子(盆栽3顆種子)種在透明塑料杯中(口徑10 cm，高15 cm)，每盆土樣重0.5 kg，土壤中每100 g干土中2齡幼蟲數(shù)量為38.4條。出苗后保留2株用于試驗，待黃瓜苗2葉期進行灌根處理，共設5個盆栽處理和1個空白對照，每個處理用藥情況見表1，處理期間每2 d澆少許水以保持土壤濕度，處理30 d后觀察統(tǒng)計根部侵染情況，每個處理重復10盆。藥效調(diào)查采用數(shù)根瘤法，每個處理取5盆統(tǒng)計根結(jié)(瘤)量，計算根結(jié)減退率[11]。

表1 各處理不同外源物的混合比例

1.5 土壤理化指標測定

方法1.4中統(tǒng)計根結(jié)數(shù)量后的盆栽土壤按照不同處理分別混合均勻后自然陰干過篩、分裝、檢測，測定指標及測定方法參照王宏寶等[12-13]報道的土壤理化指標測定方法，即土壤多酚氧化酶活力測定采用紫色沒食子素比色法，土壤脲酶活力采用靛酚藍比色法，蔗糖酶活力采用3,5-二硝基水楊酸比色法，纖維素酶活力采用蒽酮比色法，土壤有機質(zhì)采用重鉻酸鉀容量法，全氮采用凱氏定氮法，全磷采用鉬銻抗比色法，pH采用pH計測定，每個指標測定重復3次。

1.6 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2019和DPS 7.05軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計和差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源物對南方根結(jié)線蟲J2活性的影響

表2顯示，線蟲在氯溴異氰尿酸和阿維菌素不同濃度下時對線蟲活性高，2種藥劑在稀釋2 400倍液時擊倒率仍達70%左右；而噻蟲嗪僅在400倍液下對線蟲的擊倒率為97.0%，其他濃度下?lián)舻孤瘦^低；檳榔粉在400～600倍液處理下表現(xiàn)出較好的擊倒率，辛硫磷在800倍液下?lián)舻孤蕿?1.7%，其他濃度處理擊倒率低。

表2 不同外源物對南方根結(jié)線蟲J2的擊倒率

2.2 各處理對南方根結(jié)線蟲的盆栽藥效

圖1、圖2顯示，隨著氯溴異氰尿酸含量的增加，根結(jié)線蟲侵染引起的根結(jié)數(shù)量逐漸降低，其中，20%和40%的氯溴異氰尿酸混合物處理(圖1中處理4和處理5)后根結(jié)數(shù)量減退率顯著降低，防控效果達到了68.4%和77.9%(圖2中處理4和處理5)。

1—2.5%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；2—5%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；3—10%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；4—20%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；5—40%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g。圖2 同。圖1 各處理對黃瓜根部根結(jié)數(shù)量的影響

圖2 各處理對盆栽黃瓜線蟲病的防控效果

2.3 土壤生物酶及理化性質(zhì)對各處理的響應

土壤生物酶對氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應見表3，土壤多酚氧化酶除了處理2有所下降外，其他處理土壤多酚氧化酶與對照相比，含量均有所提高；土壤纖維素酶變化顯示，處理1、4、5與對照相比，促進了纖維素酶含量的增加，而處理2、3則抑制了土壤纖維素酶含量的增加。土壤脲酶含量變化顯示，不同處理正向促進了土壤脲酶含量增加，但各處理與對照間差異不顯著；土壤蔗糖酶變化顯示，不同處理作用下，土壤蔗糖酶含量均有所增加，其中，處理2、3、4、5對土壤中蔗糖酶正向促進效應顯著。

表3 土壤生物酶對氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應

土壤理化性質(zhì)對氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應見表4，氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物促進了土壤全磷含量的增加，其中處理1、2、3、4土壤全磷含量與對照相比顯著增加。土壤pH變化顯示，與對照相比，混合物處理后，pH有所下降，處理2和處理3達到顯著性差異，其他處理不顯著。土壤有機質(zhì)變化顯示，混合物處理后，有機質(zhì)有所增加，差異不顯著；土壤全氮分析顯示，處理2、4、5與對照相比差異顯著，即氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物(外源物)施用后對土壤全氮起到了正向效應，表現(xiàn)為土壤全氮含量有所增加。

表4 土壤理化性質(zhì)對氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應

3 小結(jié)與討論

王金柱等[13-14]報道了50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑對小麥、大豆、西瓜、生姜等作物土傳病害有較好的防效，且在試驗劑量內(nèi)對作物安全。50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑37.5～45.0 kg·hm-2處理對小麥紋枯病、小麥根腐病、大豆根腐病、西瓜枯萎病、西瓜蔓枯病、姜瘟病和姜莖基腐病的防效分別為85.7%、64.4%、70.4%、90.0%、80.0%、100.0%和100.0%。本試驗發(fā)現(xiàn)，氯溴異氰尿酸單劑及混配制劑對根結(jié)線蟲的防控效果明顯，同時分析了不同比例氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物對土壤理化性質(zhì)的影響，發(fā)現(xiàn)該混合物施用后對土壤全氮、全磷、有機質(zhì)、土壤脲酶、土壤蔗糖酶起到了正向促進效應，同時對土壤pH有一定調(diào)控作用，可以作為一種土壤調(diào)理劑在生產(chǎn)中運用。