曾燕嬌（江西省尋烏縣人民醫(yī)院,江西 贛州 342200）

輸血治療是救治患者的特殊措施，可以快速提高患者紅細(xì)胞及血紅蛋白含量[1]，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于臨床治療。但輸血的異源性也會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)類似過(guò)敏、發(fā)熱、溶血等反應(yīng)[2-3]。因此輸血前應(yīng)對(duì)患者進(jìn)行血型鑒定、抗體篩選、交叉配血等關(guān)鍵措施，以避免發(fā)生輸血不良反應(yīng)[4]。目前常用的抗體篩查和交叉配血方法有鹽水法、凝聚胺法等，但風(fēng)險(xiǎn)較大，輸血不良反應(yīng)較多。隨著交叉配血的應(yīng)用和發(fā)展，微柱凝膠技術(shù)的優(yōu)勢(shì)逐漸顯現(xiàn)，其避免了傳統(tǒng)交叉配血的弊端，且安全性、靈敏性大大提高[5]，但臨床上該方法對(duì)臨床輸血的安全性尚未達(dá)到共識(shí)。因此，本研究通過(guò)選取2019年5月-2021年5月在本院收治的68例易發(fā)生交叉配血不合的患者，分析本院需要輸血的患者采用凝聚胺法和微柱凝膠法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查和交叉配血實(shí)驗(yàn)，比較這些檢查方法對(duì)結(jié)果的影響，以期了解微柱凝膠技術(shù)對(duì)交叉輸血對(duì)臨床輸血安全性的影響，以提高臨床輸血有效率。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年5月-2021年5月在本院收治的68例易發(fā)生交叉配血不合的患者，男39例，女29例，年齡16-76歲，平均（47.34±9.31）歲，其中白血病18例，淋巴瘤9例，自身免疫系統(tǒng)疾病10例，貧血15例，其他16例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所有納入患者均符合輸血治療指征[6]，需要接受臨床輸血治療；②患者及家屬了解研究目的并知情同意；③存在臨床反復(fù)輸血、腫瘤、貧血或其他易發(fā)生交叉配血不合的患者；④存在凝聚胺法和微柱凝膠技術(shù)交叉配血適應(yīng)證。排除標(biāo)準(zhǔn)：①心功能不全；②急性肺水腫；③高血壓；④真性紅細(xì)胞增多癥；⑤既往有嚴(yán)重輸血反應(yīng)史。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)通過(guò)。

1.2 檢測(cè)方法 （1）采集所有患者靜脈血標(biāo)本3ml，置于4℃環(huán)境中儲(chǔ)存待檢，所有標(biāo)本檢測(cè)在2h內(nèi)完成。所有納入患者同時(shí)采用抗體篩選（鑒定），采用微柱凝膠法和凝聚胺法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查和交叉配血實(shí)驗(yàn)。（2）抗體篩選（鑒定）：取三支試管，分別標(biāo)記①、②、③，各加入患者血清2滴，再分別加入篩選細(xì)胞2滴，混勻，37℃孵育1h，離心15s。輕輕懸浮細(xì)胞，觀察凝集結(jié)果并記錄。依據(jù)譜細(xì)胞數(shù)量取相應(yīng)數(shù)目試管，分別標(biāo)記序號(hào)，各加入患者血清2滴，再分別加入譜細(xì)胞2滴，混勻，37℃孵育1h，離心15s。輕輕懸浮細(xì)胞，觀察凝集結(jié)果并記錄。（3）不規(guī)則抗體篩查和交叉配血實(shí)驗(yàn)：①凝聚胺法：首先取潔凈試管2支，一支標(biāo)記為主側(cè)，向其中加入受血者的血清和獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞懸液，另一支標(biāo)記為次側(cè)，向其中加入獻(xiàn)血者的血清和受血者的紅細(xì)胞懸液。向主側(cè)和次側(cè)兩支試管中均加入0.65ml低離子介質(zhì)，混勻，再加1滴凝聚胺混勻，離心（3500r/min，15s），倒掉上清液，輕輕搖動(dòng)試管，凝集1min后在光學(xué)顯微鏡下觀察，若無(wú)凝集則為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合，反之則為配血結(jié)果不合。②微柱凝膠法：先將供（受）血標(biāo)本制備0.5%紅細(xì)胞低離子介質(zhì)懸液，取出Coombs配血卡，放于離心機(jī)離心15min，加100μl紅細(xì)胞懸液，次側(cè)加供（受）者血清或血漿各50μl，將檢測(cè)卡置于溫度為37℃環(huán)境下反應(yīng)15min，離心（轉(zhuǎn)速1500r/min，時(shí)間3min），若經(jīng)肉眼可觀察到紅細(xì)胞全部沉積于膠底則表示陰性，其他情況均為陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 不規(guī)則抗體篩查和配血情況 所有患者采用微柱凝膠技術(shù)和凝聚胺法進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查和檢測(cè)交叉配血不合情況，比較兩組患者篩查結(jié)果和交叉配血不合結(jié)果。

1.3.2 抗體鑒定 所有患者進(jìn)行抗體鑒定，比較兩組方法檢測(cè)交叉配血不合的靈敏度和對(duì)各不規(guī)則抗體（抗-M、抗-E、抗-D、抗-S、抗-K、抗-C）的檢出率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析所有數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料用率表示，采用χ2檢驗(yàn)比較組間差異，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 抗體篩選（鑒定）結(jié)果 68例患者經(jīng)抗體篩選（鑒定）結(jié)果顯示，交叉配血不合者56例（82.35%），不規(guī)則抗體36例（52.94%）。

2.2 微柱凝膠法和凝聚胺法交叉配血檢查結(jié)果比較 微柱凝膠法檢出交叉配血不合檢出率為73.53%（50/68），高于凝聚胺法檢測(cè)交叉配血不合檢出率57.35%（39/68）（P＜0.05）。

2.3 微柱凝膠法和凝聚胺法抗體篩查陽(yáng)性結(jié)果分析 經(jīng)抗體鑒定，確診交叉配血不合者56例。微柱凝膠法檢出交叉配血不合者50例（89.29%），其中不規(guī)則抗體36例（64.29%），自身抗體14例（25.00%）；凝聚胺法檢出交叉配血不合者39例（69.64%），其中不規(guī)則抗體24例（42.86%），自身抗體15例（26.79%）。微柱凝膠法檢測(cè)交叉配血不合抗體陽(yáng)性檢出率為89.29%，高于凝聚胺法檢測(cè)的69.64%（P＜0.05）。見表1。

表1 微柱凝膠法和凝聚胺法抗體篩查陽(yáng)性結(jié)果分析[n(%)]

2.4 36例不規(guī)則抗體者用微柱凝膠法和凝聚胺法篩查陽(yáng)性分型結(jié)果分析 經(jīng)抗體鑒定，不規(guī)則抗體為36例，微柱凝膠法檢測(cè)不規(guī)則抗體篩查中抗-M抗體（30.56%）、抗-E抗體（38.89%）和抗-C抗體（8.33%）陽(yáng)性率分型比凝聚胺法的22.22%、16.67%、5.56%高。見表2。

3 討論

輸血是臨床常用的通過(guò)靜脈輸注全血和成分血以補(bǔ)充血容量，改善貧血，增加機(jī)體抵抗力的治療方法[7-8]。但輸血存在過(guò)敏、溶血、發(fā)熱等諸多不良反應(yīng)[9]，臨床輸血的安全性、有效性是判斷輸血能否成功救治患者的標(biāo)準(zhǔn)[10]。在血型鑒定的基礎(chǔ)上，通過(guò)交叉配血進(jìn)一步證實(shí)受血者和供血者之間不存在血型不合的抗原-抗體反應(yīng)，以保證受血者輸血安全[11]。交叉配血兩側(cè)均無(wú)凝集反應(yīng)，為配血相合，方可輸血。因而交叉配血決定臨床輸血的可行性，能夠有效保證受血者的輸血安全，避免輸血意外情況的發(fā)生。因此，輸血前交叉配血實(shí)驗(yàn)對(duì)臨床輸血安全具有重要意義。

凝聚胺法在臨床上操作簡(jiǎn)便快捷，檢測(cè)所需成本低，在需緊急輸血情況下具有優(yōu)勢(shì)，但存在較高的漏檢率[12-13]。而微柱凝膠技術(shù)結(jié)合了離心和免疫反應(yīng)技術(shù)[14]，漏檢率低于凝聚胺法，結(jié)果更加可靠。本研究結(jié)果顯示，微柱凝膠法不規(guī)則抗體檢出率和交叉配血不合檢出率高于凝聚胺法，提示微柱凝膠技術(shù)相比于凝聚胺法檢查結(jié)果更加準(zhǔn)確，安全性更高。分析本研究中的結(jié)果變化，可能與凝聚胺法檢測(cè)結(jié)果不直觀，且易受肝素、藥物等影響，導(dǎo)致誤差有關(guān)[15]。而微柱凝膠技術(shù)結(jié)合生物化學(xué)凝膠過(guò)濾技術(shù)、離心技術(shù)與免疫化學(xué)抗原抗體反應(yīng)相結(jié)合的原理，結(jié)果穩(wěn)定，易于觀察，且受混雜因素影響較小。既往研究顯示，微柱凝膠技術(shù)交叉配血的不合檢出率高于凝聚胺法，能檢測(cè)到弱的抗原抗體反應(yīng)，并正確指導(dǎo)臨床選擇合適的輸血方案[16]，本研究結(jié)果與其部分一致，提示通過(guò)微柱凝膠技術(shù)用于交叉配血具有檢測(cè)影響因素少、結(jié)果準(zhǔn)確等特點(diǎn)。

本研究結(jié)果顯示，微柱凝膠法檢測(cè)交叉配血不合抗體陽(yáng)性檢出率為89.29%，高于凝聚胺法檢測(cè)的69.64%，且對(duì)抗-M抗體、抗-E抗體和抗-C抗體的靈敏度更高，提示微柱凝膠法相比凝聚胺法有更多弱陽(yáng)性檢出，靈敏度更高，誤差更少。微柱凝膠法是在注有凝膠的微孔里，通過(guò)離心，將其血液中的紅細(xì)胞特異性抗體是否形成復(fù)合物浮于膠體表面而進(jìn)行判定[17]。既往研究顯示，微柱凝膠技術(shù)更加標(biāo)準(zhǔn)化，重復(fù)性更高，誤差更小[18]，與本研究結(jié)果部分一致，分析其原因可能是運(yùn)用了微柱凝膠抗人球蛋白法進(jìn)行交叉配血[19]，提示微柱凝膠技術(shù)可以提高輸血的有效性和安全性，保證患者安全用血。本研究結(jié)果顯示，微柱凝膠法配血成功率高于微聚胺法配血成功率，說(shuō)明微柱凝膠法臨床輸血安全高于微聚胺法。

綜上所述，微柱凝膠技術(shù)交叉輸血可以提高交叉配血不合檢出率。交叉配血不合的靈敏度較高，且臨床輸血安全性更高，治療效果更佳，本研究?jī)H觀察了微柱凝膠技術(shù)及凝聚胺法兩種方式單獨(dú)檢測(cè)交叉輸血的靈敏度和安全性，兩種方式聯(lián)合使用的靈敏度及準(zhǔn)確率尚需進(jìn)一步深入研究。