薛運(yùn)波│文 李志勇│圖

1 .單雄單雌授精

用1 只雄蜂精液給1 只蜂王進(jìn)行人工授精的方法稱為單雄單雌授精，這是研究中常用的一種技術(shù)。雄蜂是單倍體，在精子形成時(shí)沒(méi)有進(jìn)行減數(shù)分裂，仍然是16 條染色體。因此，1 只雄蜂所產(chǎn)生的所有精子在遺傳上是一致的，單雄授精蜂王所產(chǎn)生的雌性后代比多雄授精蜂王產(chǎn)生的雌性后代在親緣關(guān)系上更近一層，屬于超同胞。

操作方法：采集精液前授精針頭內(nèi)充滿生理液，首先，授精針頭內(nèi)吸入一個(gè)小氣泡，然后吸入1～2μl含有抗菌素的生理液，最后再吸入雄蜂精液（圖1）。授精時(shí)，把精液同氣泡前部的生理液一同注入蜂王的側(cè)輸卵管內(nèi)。次日，單雄授精的蜂王再次麻醉10分鐘。

圖1 單只雄蜂的精液

2 .單雄多雌授精

用1 只雄蜂的精液給多只蜂王進(jìn)行人工授精的方法稱為單雄多雌授精。這種方法可以使不同的蜂王得到遺傳學(xué)完全一致的精子。

單雄多雌授精有兩種方式：一種是采集1 只雄蜂的精液稀釋后分別給同一代次的多只蜂王進(jìn)行授精。用此方法可以從這些蜂王的后代工蜂中觀測(cè)出這些蜂王的親緣關(guān)系；另一種方式是利用1 只雄蜂的精液連續(xù)給F1、F2、F3 后代雌性進(jìn)行授精。用這種方法不僅使每世代的間隔時(shí)間縮短，同時(shí)還能得到遺傳非常接近父本的后代。

3 .自體授精

處女蜂王性成熟以后，用二氧化碳每天麻醉10分鐘，連續(xù)麻醉3 天，誘入到有雄蜂脾的核群中，促使其產(chǎn)下未受精卵。未受精卵經(jīng)過(guò)核群中的工蜂哺育，發(fā)育成雄蜂。雄蜂出房8 天左右，幽閉控制該蜂王產(chǎn)卵，使其生殖道排空，雄蜂性成熟后進(jìn)行采精，用該蜂王所產(chǎn)雄蜂精液給自體授精，從而達(dá)到自體授精的目的。

4 .產(chǎn)卵蜂王再授精

Harbo（1985）曾經(jīng)斷言，已經(jīng)交尾產(chǎn)卵的蜂王（自然交尾或人工授精），一經(jīng)再次注射精液就會(huì)死亡。但我國(guó)學(xué)者試驗(yàn)表明：已經(jīng)開(kāi)產(chǎn)的授精蜂王經(jīng)過(guò)囚禁，腹部收縮，可以成功進(jìn)行再次授精，尤其是在利用它所產(chǎn)的后代雄蜂的精液搞補(bǔ)償性授精時(shí)，效果不錯(cuò)。

5 .混合精液授精

蜜蜂混合精液的人工授精技術(shù)是將幾個(gè)蜜蜂品種（品系、配套系等）的雄蜂精液均勻混合后給處女蜂王進(jìn)行授精，主要用于蜜蜂雜種優(yōu)勢(shì)的利用方面。其主要技術(shù)環(huán)節(jié)是精液在無(wú)菌環(huán)境下均勻混合。方法：分別采集不同蜜蜂品種（品系、配套系等）的雄蜂精液，在超凈工作臺(tái)或者特制的無(wú)菌箱內(nèi)（圖2），將各自雄蜂精液按比例或數(shù)量加入到事先凈化滅菌的混合管內(nèi)，用毛細(xì)管混勻器按同一個(gè)方向慢慢轉(zhuǎn)動(dòng)，轉(zhuǎn)速大約為5～10r/s，避免來(lái)回轉(zhuǎn)動(dòng)和產(chǎn)生氣泡，以防損傷蜜蜂精子，蜜蜂精液混勻大約2分鐘左右即可。再用人工授精儀的進(jìn)樣器將混合好的精液吸入授精針頭內(nèi)進(jìn)行人工授精。

圖2 便攜式授精混合設(shè)備

6 .從雄蜂貯精囊收集精子進(jìn)行人工授精

當(dāng)迫切需要從1 只特殊的雄蜂得到精液，而用通常的方法擠壓雄蜂又無(wú)法得到精液時(shí)，可以從雄蜂貯精囊收集精子進(jìn)行人工授精，這種方法獲得的精液數(shù)量可以滿足最低限度的授精需要。這種授精方式有兩種取精方法：一是取出貯精囊（圖3），通過(guò)擠壓迫使精液排出，用注射器直接收集起來(lái)；二是將貯精囊放入尖底離心管中，加入少量生理液后，迫使貯精囊排出精液，收集混入精液的生理液，進(jìn)行人工授精。

圖3 解剖雄蜂貯精囊

7 .用來(lái)自1只蜂王受精囊的精子給另一只蜂王授精

這一技術(shù)是進(jìn)行配子回交或只回收貯存在另一只蜂王的精子時(shí)應(yīng)用，處女蜂王可以成為貯存精子的場(chǎng)所。方法是從供精蜂王取出受精囊（圖4），去除受精囊外圍包被物，用細(xì)針刺穿它，然后用注射器收集精液，最后按照通常的方法授精。

圖4 密被微氣管的受精囊

8 .冷凍精液授精

蜜蜂是典型的營(yíng)群體生活的社會(huì)性昆蟲(chóng)。在高寒山區(qū)，越冬雄蜂的壽命只有8 個(gè)月以上，給蜜蜂育種、保種等方面帶來(lái)很大困難。為此，長(zhǎng)期貯存蜜蜂精液，實(shí)行蜜蜂冷凍精液人工授精，是解決蜜蜂精液利用受到季節(jié)、雄蜂壽命等限制問(wèn)題的有效途徑。有利于蜜蜂良種遺傳資源的保護(hù)和利用以及蜜蜂引種、血統(tǒng)更新等，具有重要意義。